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公开(公告)号:CN110760473B
公开(公告)日:2020-12-18
申请号:CN201911204404.1
申请日:2019-11-29
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N5/075
Abstract: 一种猪卵母细胞体外成熟培养液及其制备方法与应用,属于卵母细胞体外成熟培养技术领域。为了解决目前猪卵母细胞体外成熟率和发育率低的问题,本发明提供了一种猪卵母细胞体外成熟培养液及其制备方法与应用。本发明所述的培养液由基础培养液TCM‑199,青霉素,链霉素,NaHCO3,4‑羟乙基哌嗪乙磺酸,聚乙烯醇,丙酮酸钠,胰岛素,半胱氨酸,表皮生长因子,猪卵泡液,孕马血清促性腺激素,人绒毛膜促性腺激素和单宁酸组成。本发明所述的培养液,可以提高卵母细胞体外成熟质量、卵丘细胞扩散指数、孤雌胚胎囊胚率和囊胚总细胞数、体外受精胚胎卵裂率、囊胚率以及囊胚总细胞数。
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公开(公告)号:CN110760473A
公开(公告)日:2020-02-07
申请号:CN201911204404.1
申请日:2019-11-29
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N5/075
Abstract: 一种猪卵母细胞体外成熟培养液及其制备方法与应用,属于卵母细胞体外成熟培养技术领域。为了解决目前猪卵母细胞体外成熟率和发育率低的问题,本发明提供了一种猪卵母细胞体外成熟培养液及其制备方法与应用。本发明所述的培养液由基础培养液TCM-199,青霉素,链霉素,NaHCO3,4-羟乙基哌嗪乙磺酸,聚乙烯醇,丙酮酸钠,胰岛素,半胱氨酸,表皮生长因子,猪卵泡液,孕马血清促性腺激素,人绒毛膜促性腺激素和单宁酸组成。本发明所述的培养液,可以提高卵母细胞体外成熟质量、卵丘细胞扩散指数、孤雌胚胎囊胚率和囊胚总细胞数、体外受精胚胎卵裂率、囊胚率以及囊胚总细胞数。
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公开(公告)号:CN118480135A
公开(公告)日:2024-08-13
申请号:CN202410697366.2
申请日:2024-05-31
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 一种基于液相分离技术的RNA实时示踪系统及其应用,属于活细胞检测技术领域。本发明为解决现有技术中MCP‑MS2系统存在目标RNA表达与转运不稳定,成像信噪比较低,荧光背景较高的技术问题,提供一种基于液相分离技术的RNA实时示踪系统,所述RNA实时示踪系统包括MS2环状结构和MS2外壳蛋白。本发明提供的RNA实时示踪系统实现了活细胞内源性和外源性RNA成像和双色荧光标记的目的,提升了靶标位点的荧光信号,显著提高了信噪比,降低了荧光背景。本发明提供的RNA实时示踪系统可应用于活细胞RNA实时示踪成像,具体指利用RNA实时示踪系统对RNA的空间定位、蛋白翻译和RNA位移过程进行监控。
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公开(公告)号:CN115948477A
公开(公告)日:2023-04-11
申请号:CN202210856638.X
申请日:2022-07-20
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开一种提高CRISPR/Cas9的同源重组修复效率的诱导剂、方法以及应用,属于基因工程技术领域。为了提高CRISPR/Cas9的同源重组修复效率以及多基因编辑的效率的技术问题。本发明公开一种提高CRISPR/Cas9的同源重组修复效率的诱导剂,所述诱导剂为Nedisertib或/和ssODN‑M。该方法对单个基因或同时对多个基因提高CRISPR/Cas9的同源重组修复效率。
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公开(公告)号:CN115948477B
公开(公告)日:2024-05-28
申请号:CN202210856638.X
申请日:2022-07-20
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开一种提高CRISPR/Cas9的同源重组修复效率的诱导剂、方法以及应用,属于基因工程技术领域。为了提高CRISPR/Cas9的同源重组修复效率以及多基因编辑的效率的技术问题。本发明公开一种提高CRISPR/Cas9的同源重组修复效率的诱导剂,所述诱导剂为Nedisertib或/和ssODN‑M。该方法对单个基因或同时对多个基因提高CRISPR/Cas9的同源重组修复效率。
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公开(公告)号:CN116590322A
公开(公告)日:2023-08-15
申请号:CN202310577474.1
申请日:2023-05-22
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N15/63 , C12N15/113 , C12N15/55 , C12N15/66
Abstract: 本发明公开了一种CRISPR‑MCPN载体及其构建方法、应用,属于基分子生物学领域。本发明CRISPR‑MCPN载体可以实现在同一个细胞中达到多水平调控、提高基因调控的效率。所述CRISPR‑MCPN载体包括CRISPR‑Cas9基因调控组件、tRNA‑array序列、融合在sgRNA的茎环中RNA发夹序列、适配体‑RNA结合蛋白和基因调控结构域。所述CRISPR‑MCPN载体及其构建方法使一个单一启动子能够在一个单一的转录本中同时表达多个蛋白和gRNAs,从而实现一个单独载体可以使激活、抑制、甲基化和去甲基化四种功能在同一细胞中独立作用。
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公开(公告)号:CN110004181B
公开(公告)日:2022-10-11
申请号:CN201910212739.1
申请日:2019-03-20
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 一种附加型CRISPR/Cas9表达载体及其构建方法与应用,属于细胞工程领域。为了解决现有的CRISPR/Cas表达系统易整合到宿主细胞基因组,破坏基因组内序列的问题,本发明提供了一种附加型CRISPR/Cas9表达载体,该载体为含有S/MAR序列的CRISPR/Cas9表达载体,是指含有S/MAR序列的CRISPR/Cas9表达载体,所述S/MAR序列,其核苷酸如SEQ ID NO:1所示;所述S/MAR序列位于该载体中能编码蛋白的编码区序列和bGH poly(A)序列之间。本发明提供的附加型CRISPR/Cas9表达载体,可以游离在染色体外表达Cas9蛋白和单链的引导RNA,可用于基因敲除研究。
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公开(公告)号:CN110004181A
公开(公告)日:2019-07-12
申请号:CN201910212739.1
申请日:2019-03-20
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 一种附加型CRISPR/Cas9表达载体及其构建方法与应用,属于细胞工程领域。为了解决现有的CRISPR/Cas表达系统易整合到宿主细胞基因组,破坏基因组内序列的问题,本发明提供了一种附加型CRISPR/Cas9表达载体,该载体为含有S/MAR序列的CRISPR/Cas9表达载体,是指含有S/MAR序列的CRISPR/Cas9表达载体,所述S/MAR序列,其核苷酸如SEQ ID NO:1所示;所述S/MAR序列位于该载体中能编码蛋白的编码区序列和bGH poly(A)序列之间。本发明提供的附加型CRISPR/Cas9表达载体,可以游离在染色体外表达Cas9蛋白和单链的引导RNA,可用于基因敲除研究。
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