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公开(公告)号：CN103898157A
公开(公告)日：2014-07-02
申请号：CN201210567600.7
申请日：2012-12-24
Applicant: 上海市儿童医院 , 上海滔滔转基因工程股份有限公司
IPC: C12N15/85 , C12N15/14 , C07K14/765
Abstract: 本发明公开了一种利用转基因动物的乳腺生产人血清白蛋白的方法及其表达载体。本发明的方法，包括利用载体将人血清白蛋白基因表达盒转入哺乳动物基因组中获得转基因动物，从转基因动物乳汁中获得人血清白蛋白，所述的人血清白蛋白基因表达盒从5’到3’依次包括启动子、人血清白蛋白基因和终止子，还包括人血清白蛋白基因3’旁侧序列M2和β-酪蛋白基因的3’旁侧序列B3中的一种或两种，M2或B3位于终止子之后。本发明的方法，在动物的乳汁中人血清白蛋白的浓度至少可达到4.6-6.7g/L，完全能够达到商业利用的水平。从转基因牛的牛奶中分离获得人血清白蛋白给人血清白蛋白的生产提供了一种低成本，高产量的好方法。
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公开(公告)号：CN105543254B
公开(公告)日：2019-03-19
申请号：CN201610056474.7
申请日：2016-01-27
Applicant: 上海市儿童医院 , 上海滔滔转基因工程股份有限公司
Abstract: 本发明公开了属于生物化学与分子生物学技术领域的一种密码子优化的β‑半乳糖苷酶基因及其应用。该β‑半乳糖苷酶的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO.1所示。本发明根据牛乳汁中相关高表达蛋白密码子的偏爱性，对细菌来源的β‑半乳糖苷酶基因的密码子进行优化。优化后的OLacZ基因在小鼠乳腺上皮细胞中进行验证，证明其相对于野生型的LacZ基因表达量有着显著提高,约3.7倍。经密码子优化的OLacZ基因在泌乳期母鼠的乳腺组织中，更能有效表达。β‑半乳糖苷酶作为一种报告基因，在牛乳腺组织中的高效表达，为进一步研制乳腺生物反应器，提供一种有效的工具基因。
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公开(公告)号：CN105543254A
公开(公告)日：2016-05-04
申请号：CN201610056474.7
申请日：2016-01-27
Applicant: 上海市儿童医院 , 上海滔滔转基因工程股份有限公司
CPC classification number: C12N9/2471 , C12Y302/01023
Abstract: 本发明公开了属于生物化学与分子生物学技术领域的一种密码子优化的β-半乳糖苷酶基因及其应用。该β-半乳糖苷酶的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO.1所示。本发明根据牛乳汁中相关高表达蛋白密码子的偏爱性，对细菌来源的β-半乳糖苷酶基因的密码子进行优化。优化后的OLacZ基因在小鼠乳腺上皮细胞中进行验证，证明其相对于野生型的LacZ基因表达量有着显著提高,约3.7倍。经密码子优化的OLacZ基因在泌乳期母鼠的乳腺组织中，更能有效表达。β-半乳糖苷酶作为一种报告基因，在牛乳腺组织中的高效表达，为进一步研制乳腺生物反应器，提供一种有效的工具基因。
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公开(公告)号：CN103911393B
公开(公告)日：2019-01-18
申请号：CN201210594330.9
申请日：2012-12-31
Applicant: 上海滔滔转基因工程股份有限公司 , 上海市儿童医院
IPC: C12N15/85 , C12N15/12 , C07K14/79 , A01K67/027
Abstract: 本发明公开了一种利用转基因动物的乳腺生产人转铁蛋白的方法及其表达载体。本发明的方法包括利用含有人转铁蛋白基因表达盒的载体将人转铁蛋白基因表达盒转入哺乳动物基因组中获得转基因动物，从转基因动物乳汁中获得人转铁蛋白，其中，该表达盒从5’到3’依次包括启动子、人转铁蛋白基因和牛生长激素基因终止子，所述启动子是山羊β‑酪蛋白基因，其序列如SEQ ID NO.1所示，所述人转铁蛋白基因是序列表中SEQ ID NO.2所示，所述的载体是真核表达载体pcDNA3.1，所述的哺乳动物不包括人。本发明的方法，在动物的乳汁中人转铁蛋白的浓度至少可达到5g/L，比现有的方法提高了160倍以上，具有巨大的商业利用价值。
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公开(公告)号：CN103911393A
公开(公告)日：2014-07-09
申请号：CN201210594330.9
申请日：2012-12-31
Applicant: 上海滔滔转基因工程股份有限公司 , 上海市儿童医院
IPC: C12N15/85 , C12N15/12 , C07K14/79 , A01K67/027
Abstract: 本发明公开了一种利用转基因动物的乳腺生产人转铁蛋白的方法及其表达载体。本发明的方法包括利用含有人转铁蛋白基因表达盒的载体将人转铁蛋白基因表达盒转入哺乳动物基因组中获得转基因动物，从转基因动物乳汁中获得人转铁蛋白，其中，该表达盒从5’到3’依次包括启动子、人转铁蛋白基因和牛生长激素基因终止子，所述启动子是山羊β-酪蛋白基因，其序列如SEQ？ID？NO.1所示，所述人转铁蛋白基因是序列表中SEQ？ID？NO.2所示，所述的载体是真核表达载体pcDNA3.1，所述的哺乳动物不包括人。本发明的方法，在动物的乳汁中人转铁蛋白的浓度至少可达到5g/L，比现有的方法提高了160倍以上，具有巨大的商业利用价值。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104232676B
公开(公告)日：2018-08-07
申请号：CN201310229687.1
申请日：2013-06-09
Applicant: 上海市儿童医院 , 上海滔滔转基因工程股份有限公司
Abstract: 本发明公开了种获得微环DNA的亲本质粒及其应用。该亲本质粒是在出发载体pEGFP‑N1‑attB质粒中插入attR片段和attL片段以及ΦC31整合酶基因表达盒构建而成,所述attR片段插入出发载体限制性内切酶SpeⅠ和DraⅢ的酶切位点之间,所述attL片段插入出发载体的限制性内切酶AflⅢ和AseⅠ的酶切位点之间,所述ΦC31整合酶基因表达盒插入出发载体的限制性内切酶AflⅢ的酶切位点。利用该亲本质粒能够快速、高效、经济地获得用于稳定整合的微环DNA,后续的转基因操作方法简单易行,具有重要的生物学意义及实际应用价值。
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公开(公告)号：CN103898157B
公开(公告)日：2018-05-15
申请号：CN201210567600.7
申请日：2012-12-24
Applicant: 上海市儿童医院 , 上海滔滔转基因工程股份有限公司
IPC: C12N15/85 , C12N15/14 , C07K14/765
Abstract: 本发明公开了一种利用转基因动物的乳腺生产人血清白蛋白的方法及其表达载体。本发明的方法，包括利用载体将人血清白蛋白基因表达盒转入哺乳动物基因组中获得转基因动物，从转基因动物乳汁中获得人血清白蛋白，所述的人血清白蛋白基因表达盒从5’到3’依次包括启动子、人血清白蛋白基因和终止子，还包括人血清白蛋白基因3’旁侧序列M2和β‑酪蛋白基因的3’旁侧序列B3中的一种或两种，M2或B3位于终止子之后。本发明的方法，在动物的乳汁中人血清白蛋白的浓度至少可达到4.6‑6.7g/L，完全能够达到商业利用的水平。从转基因牛的牛奶中分离获得人血清白蛋白给人血清白蛋白的生产提供了一种低成本，高产量的好方法。
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公开(公告)号：CN104232676A
公开(公告)日：2014-12-24
申请号：CN201310229687.1
申请日：2013-06-09
Applicant: 上海市儿童医院 , 上海滔滔转基因工程股份有限公司
Abstract: 本发明公开了一种获得微环DNA的亲本质粒及其应用。该亲本质粒是在出发载体pEGFP-N1-attB质粒中插入attR片段和attL片段以及ΦC31整合酶基因表达盒构建而成，所述attR片段插入出发载体限制性内切酶SpeⅠ和DraⅢ的酶切位点之间，所述attL片段插入出发载体的限制性内切酶AflⅢ和AseⅠ的酶切位点之间，所述ΦC31整合酶基因表达盒插入出发载体的限制性内切酶AflⅢ的酶切位点。利用该亲本质粒能够快速、高效、经济地获得用于稳定整合的微环DNA，后续的转基因操作方法简单易行，具有重要的生物学意义及实际应用价值。
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公开(公告)号：CN102399810B
公开(公告)日：2014-02-26
申请号：CN201110312992.8
申请日：2011-10-14
Applicant: 上海市儿童医院 , 上海滔滔转基因工程股份有限公司
IPC: C12N15/63
Abstract: 本发明公开了一种携带attB序列高效率定向整合基因组假attP位点的载体以及一种高效率定向整合基因组假attP位点的转基因方法。在携带外源功能基因的载体中插入多个互相间隔的attB序列，和表达噬菌体φC31整合酶的载体共转染宿主细胞，可以实现attB与基因组中的假attP位点的高效整合及外源基因的表达。载体携带3个attB和2个attB的整合率分别为携带1个attB载体的2.8和2.2倍。比不含整合酶的随机整合则分别提高了14.5和12倍多。有利于整合酶系统在基因治疗和转基因动物领域的应用。
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公开(公告)号：CN102399810A
公开(公告)日：2012-04-04
申请号：CN201110312992.8
申请日：2011-10-14
Applicant: 上海市儿童医院 , 上海滔滔转基因工程股份有限公司
IPC: C12N15/63
Abstract: 本发明公开了一种携带attB序列高效率定向整合基因组假attP位点的载体以及一种高效率定向整合基因组假attP位点的转基因方法。在携带外源功能基因的载体中插入多个互相间隔的attB序列，和表达噬菌体φC31整合酶的载体共转染宿主细胞，可以实现attB与基因组中的假attP位点的高效整合及外源基因的表达。载体携带3个attB和2个attB的整合率分别为携带1个attB载体的2.8和2.2倍。比不含整合酶的随机整合则分别提高了14.5和12倍多。有利于整合酶系统在基因治疗和转基因动物领域的应用。
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