公开(公告)号：CN109820819A

公开(公告)日：2019-05-31

申请号：CN201910133030.2

申请日：2019-02-22

Applicant: 上海海洋大学

Inventor： 严继舟 ,  杜新路 ,  郭会萍 ,  王成辉

IPC: A61K9/08 ,  A61K9/00 ,  A61K48/00 ,  A61K31/7105 ,  A61P15/08

Abstract: 本发明属于注射液技术领域，公开了一种改良注射混合液制备及使用方法。改良的注射混合液按比例由转染脂质体载体、外源质粒和外源miRNAs溶液组成；制备方法包括：将构建的外源质粒使用灭菌的ddH2O稀释浓度为500ng/μL；其次将定制的miRNAs使用灭菌的ddH2O稀释浓度为20pmoL/μL；然后准备转染脂质体载体；并按照转染脂质体载体：Sox9a外源质粒：外源miRNA(可为一种或多种混合物)＝2:1:1的比例配置混合液2～4μL。使用方法采用性腺体外显微注射结合电转染。本发明通过向原有的混合液中添加不同比例和不同种类的外源miRNAs，能够控制6个月斑马鱼精巢和卵巢的分化以及成鱼性腺再生。

公开(公告)号：CN109820819B

公开(公告)日：2021-03-23

申请号：CN201910133030.2

申请日：2019-02-22

Applicant: 上海海洋大学

Inventor： 严继舟 ,  杜新路 ,  郭会萍 ,  王成辉

IPC: A61K9/08 ,  A61K9/00 ,  A61K48/00 ,  A61K31/7105 ,  A61P15/08

Abstract: 本发明属于注射液技术领域，公开了一种改良注射混合液制备及使用方法。改良的注射混合液按比例由转染脂质体载体、外源质粒和外源miRNAs溶液组成；制备方法包括：将构建的外源质粒使用灭菌的ddH2O稀释浓度为500ng/μL；其次将定制的miRNAs使用灭菌的ddH2O稀释浓度为20pmoL/μL；然后准备转染脂质体载体；并按照转染脂质体载体：Sox9a外源质粒：外源miRNA(可为一种或多种混合物)＝2:1:1的比例配置混合液2～4μL。使用方法采用性腺体外显微注射结合电转染。本发明通过向原有的混合液中添加不同比例和不同种类的外源miRNAs，能够控制6个月斑马鱼精巢和卵巢的分化以及成鱼性腺再生。