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公开(公告)号:CN103304662A
公开(公告)日:2013-09-18
申请号:CN201310150976.2
申请日:2013-04-27
Applicant: 上海海洋大学
IPC: C07K16/00 , C12P21/08 , C12N5/20 , G01N33/577 , C12R1/91
Abstract: 本发明涉及无色孔雀石绿单克隆抗体、产生该单克隆抗体的杂交瘤细胞株、其制备方法和用途,还涉及含有该单克隆抗体的组合物及检测试剂盒。本发明成功地制备了无色孔雀石绿单克隆抗体,该单克隆抗体灵敏度高,特异性强,仅与孔雀石绿存在交叉反应,与副品红、甲基蓝、结晶紫、环丙沙星、氯霉素均不存在交叉反应,为为无色孔雀石绿在水产品中残留的快速检测提供了关键技术,并为其检测试剂盒的研发奠定了基础。
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公开(公告)号:CN101792738A
公开(公告)日:2010-08-04
申请号:CN200910194842.4
申请日:2009-08-31
Applicant: 上海海洋大学
Abstract: 本发明公开了一种环丙沙星单克隆抗体细胞株及其单克隆抗体,所得到的单克隆抗体可用于制备环丙沙星的快速检测酶联免疫(ELISA)试剂盒,实现在水产品中快速检测残留的环丙沙星。在本发明中,首先采用了碳二亚胺一步法,制备了免疫原——环丙沙星与牛血清白蛋白的偶联物(CIP-BSA),及包被原——环丙沙星与鸡卵血清白蛋白的偶联物(CIP-OVA)。用CIP-BSA免疫Balb/c小鼠,将免疫后的Balb/c小鼠的脾脏细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合。采用间接ELISA法对阳性克隆进行筛选,经过多次的亚克隆,获得了稳定分泌的针对环丙沙星的单克隆抗体细胞株;采用动物体内诱生法制备腹水,腹水经纯化后得到单克隆抗体。
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公开(公告)号:CN101710123A
公开(公告)日:2010-05-19
申请号:CN200910200072.X
申请日:2009-12-08
Applicant: 上海海洋大学
IPC: G01N33/577 , C07K16/44 , C12N5/20
Abstract: 本发明公开了一种检测环丙沙星胶体金层析试纸,包括硝酸纤维素膜、样品垫、胶体金结合垫、吸水垫和PVC背衬。在本发明中,采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金溶液并利用其标记环丙沙星单克隆,同时在硝酸纤维素膜上包被环丙沙星-牛血清白蛋白偶联物及羊抗鼠IgG抗体,分别构成检测区(T)和质控区(C)。当待测样品中含有环丙沙星时能够使检测区颜色发生变化,从而通过肉眼判定结果。本发明提供的胶体金层析试纸灵敏度高、检测迅速、价格低廉,可以用于现场检测水产品中环丙沙星的残留。
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公开(公告)号:CN104774802B
公开(公告)日:2017-12-08
申请号:CN201510206829.1
申请日:2015-04-27
Applicant: 上海海洋大学
Abstract: 本发明涉及银鲫鱼背鳍细胞系,所述的银鲫鱼背鳍细胞系银鲫鱼的背鳍经过原代培养、传代培养得到的,所用的细胞培养液为M199培养基制得。本发明还提供该银鲫鱼背鳍细胞系的构建方法和应用。其优点表现在:本发明建立的银鲫鱼背鳍细胞系可以连续传代,能提供大量的银鲫鱼背鳍细胞系。该细胞系可以直接应用于银鲫鱼免疫相关功能基因的研究,对于银鲫鱼的病毒感染实验可以应用细胞系,节约了大量的人力,物力且效果较好。银鲫鱼背鳍细胞系可以反复冻融,可应用于细胞生物学、病毒学、毒理学、分子生物学、遗传学和免疫学等重要研究。
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公开(公告)号:CN104762252A
公开(公告)日:2015-07-08
申请号:CN201510206830.4
申请日:2015-04-27
Applicant: 上海海洋大学
Abstract: 本发明涉及一种草金鱼腹鳍细胞系及其构建方法,针对草金鱼腹鳍组织细胞的特征,采用胰蛋白酶、EDTA、透明质酸酶对组织块进行消化,将消化后的组织块移植到培养瓶中,加入专用增殖培养液进行原代培养,继而构成功构建草金鱼腹鳍细胞系。通过本发明的方法原代培养3天后均能分离大量细胞,均具有连续传代的能力;稳定传代后,细胞呈典型的成纤维形态,证明该细胞系是一种特性稳定、成分均一的中国草金鱼腹鳍细胞系,是作为研究水产动物病毒学和免疫学的良好材料。目前,该草金鱼腹鳍细胞系已传代60代,细胞能稳定增殖,具有连续传代的能力。
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公开(公告)号:CN104762252B
公开(公告)日:2017-06-16
申请号:CN201510206830.4
申请日:2015-04-27
Applicant: 上海海洋大学
Abstract: 本发明涉及一种草金鱼腹鳍细胞系及其构建方法,针对草金鱼腹鳍组织细胞的特征,采用胰蛋白酶、EDTA、透明质酸酶对组织块进行消化,将消化后的组织块移植到培养瓶中,加入专用增殖培养液进行原代培养,继而构成功构建草金鱼腹鳍细胞系。通过本发明的方法原代培养3天后均能分离大量细胞,均具有连续传代的能力;稳定传代后,细胞呈典型的成纤维形态,证明该细胞系是一种特性稳定、成分均一的中国草金鱼腹鳍细胞系,是作为研究水产动物病毒学和免疫学的良好材料。目前,该草金鱼腹鳍细胞系已传代60代,细胞能稳定增殖,具有连续传代的能力。
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公开(公告)号:CN101792738B
公开(公告)日:2012-01-04
申请号:CN200910194842.4
申请日:2009-08-31
Applicant: 上海海洋大学
Abstract: 本发明公开了一种环丙沙星单克隆抗体细胞株及其单克隆抗体,所得到的单克隆抗体可用于制备环丙沙星的快速检测酶联免疫(ELISA)试剂盒,实现在水产品中快速检测残留的环丙沙星。在本发明中,首先采用了碳二亚胺一步法,制备了免疫原——环丙沙星与牛血清白蛋白的偶联物(CIP-BSA),及包被原——环丙沙星与鸡卵血清白蛋白的偶联物(CIP-OVA)。用CIP-BSA免疫Balb/c小鼠,将免疫后的Balb/c小鼠的脾脏细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合。采用间接ELISA法对阳性克隆进行筛选,经过多次的亚克隆,获得了稳定分泌的针对环丙沙星的单克隆抗体细胞株;采用动物体内诱生法制备腹水,腹水经纯化后得到单克隆抗体。
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公开(公告)号:CN104774802A
公开(公告)日:2015-07-15
申请号:CN201510206829.1
申请日:2015-04-27
Applicant: 上海海洋大学
Abstract: 本发明涉及银鲫鱼背鳍细胞系,所述的银鲫鱼背鳍细胞系银鲫鱼的背鳍经过原代培养、传代培养得到的,所用的细胞培养液为M199培养基制得。本发明还提供该银鲫鱼背鳍细胞系的构建方法和应用。其优点表现在:本发明建立的银鲫鱼背鳍细胞系可以连续传代,能提供大量的银鲫鱼背鳍细胞系。该细胞系可以直接应用于银鲫鱼免疫相关功能基因的研究,对于银鲫鱼的病毒感染实验可以应用细胞系,节约了大量的人力,物力且效果较好。银鲫鱼背鳍细胞系可以反复冻融,可应用于细胞生物学、病毒学、毒理学、分子生物学、遗传学和免疫学等重要研究。
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公开(公告)号:CN103242449A
公开(公告)日:2013-08-14
申请号:CN201310150920.7
申请日:2013-04-27
Applicant: 上海海洋大学
Abstract: 本发明涉及草鱼免疫球蛋白的单克隆抗体、产生该单克隆抗体的杂交瘤细胞株、其制备方法和用途,还涉及含有该单克隆抗体的组合物及检测试剂盒,所述的单克隆抗体由保藏号为CCTCC NO:C2012168的杂交瘤细胞株产生。本发明提供了草鱼免疫球蛋白的单克隆抗体和产生该单克隆抗体的杂交瘤细胞株,为建立以草鱼Ig水平为基础评价疫苗免疫效果的方法奠定了基础,进一步有利于建立快速、高效、统一的疫苗评价标准。
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公开(公告)号:CN101710124A
公开(公告)日:2010-05-19
申请号:CN200910200078.7
申请日:2009-12-08
Applicant: 上海海洋大学
IPC: G01N33/577 , G01N33/531 , C07K14/765 , C07K1/113
Abstract: 本发明公开了一种检测水产品中环丙沙星残留的酶联免疫试剂盒,该试剂盒主要包括:包被有环丙沙星-鸡卵血清白蛋白偶联物(CIP-OVA)的酶标板、环丙沙星单克隆抗体、环丙沙星(CIP)标准品溶液、酶标二抗、底物显色液、洗液、终止液。本发明还公开了一种利用上述试剂盒检测水产品中环丙沙星残留的方法,它包括以下步骤:首先对样品进行前处理,然后利用试剂盒检测,最后分析实验结果。本发明提供的试剂盒操作简便、灵敏度高、特异性强,适合大规模的样品检测。
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