公开(公告)号：CN118048697A

公开(公告)日：2024-05-17

申请号：CN202410076321.3

申请日：2024-01-18

Applicant: 上海浦东复旦大学张江科技研究院 ,  复旦大学

Inventor： 施奇惠 ,  王卓 ,  赵镱淳 ,  刘志刚

IPC: C40B40/08 ,  C40B50/06 ,  C12Q1/6806 ,  C12Q1/6869 ,  C12N15/11

Abstract: 本申请提供了一种单细胞基因组测序文库的构建方法及试剂盒。该方法包括步骤S1制备单细胞样本的基因组DNA；步骤S2将基因组DNA置于片段化反应体系中，获得具有细胞标签和文库扩增接头序列的片段化DNA，基因组DNA片段化反应体系中包括含有细胞标签和文库扩增接头序列的Tn5转座酶；步骤S3将不同单细胞来源的片段化后的基因组DNA混合；步骤S4将混合后的DNA使用测序文库接头引物同步完成DNA量的扩增和测序文库的构建。本申请通过使用Tn5转座酶，使极微量的单细胞基因组DNA在随机被切断的同时末端被引入文库扩增接头序列，以细胞标签区分不同单细胞，以测序文库接头作为引物扩增片段化后的DNA片段，同步实现多个单细胞基因组的扩增和文库的构建。