公开(公告)号：CN110643625A

公开(公告)日：2020-01-03

申请号：CN201910899001.7

申请日：2019-09-23

Applicant: 上海应用技术大学

Inventor： 徐毅 ,  沈海云 ,  徐长利 ,  马宝娣 ,  吴小梅

IPC: C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P17/10 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开一种水相体系中高效绿色制备生物素中间体的方法，即采用重组微杆菌酯酶整细胞在纯水体系中催化内消旋生物素二甲酯不对称水解生成(4S,5R)-半甲酯。当底物浓度为200mM，反应时间为4h，(4S,5R)-半甲酯e.e.值大于99％，产率达100％，时空产率超过400g/L/d。该制备方法催化效率高、底物转化率高、产品光学纯度高，并且以不含有机溶剂的纯水作为反应介质，具有潜在的工业应用价值。

公开(公告)号：CN111549014A

公开(公告)日：2020-08-18

申请号：CN202010338502.0

申请日：2020-04-26

Applicant: 上海应用技术大学

Inventor： 徐毅 ,  沈海云 ,  魏凯欣 ,  马宝娣 ,  吴小梅 ,  刘胜利

IPC: C12N9/18 ,  C12N1/21 ,  C12N1/20 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种产酯酶自诱导培养基，配方为：甘油5～13g/L，葡萄糖0.3～1.3g/L，乳糖1～6g/L，胰蛋白胨10～30g/L，酵母浸粉3～13g/L，0.0～0.5g/L MgSO4，17～19g/L Na2HPO4，6～8g/L KH2PO4，2～3g/L NH4Cl，0.5～1.0g/L Na2SO4，痕量元素适量。与现有技术相比，本发明培养基组分及培养条件出发，找到一条既能高效表达外源蛋白，又能实现自动诱导的改进型产酯酶大肠杆菌自诱导培养基，利用改进型自诱导培养基，并采用双温度调控方式，对重组大肠杆菌E.coli BL21(DE3)/pET-21a-estsit01进行培养和发酵产酶；本发明的自诱导培养基利用乳糖作为底物诱导目的蛋白表达，具有产酶量高，成本低；重组酯酶细胞的酶活可以达到1684U/L的优点。