公开(公告)号：CN106884002B

公开(公告)日：2021-03-19

申请号：CN201510939165.X

申请日：2015-12-15

Applicant: 上海市针灸经络研究所

Inventor： 施茵 ,  商海霞 ,  吴焕淦 ,  孙洁 ,  陈柳 ,  赵继梦 ,  季蓉 ,  包春辉 ,  吴璐一 ,  李雨薇

IPC: C12N5/071

Abstract: 本发明涉及生物技术领域，特别是涉及一种稳定的结肠上皮细胞培养方法。本发明所提供的培养方法包括如下步骤：将结肠组织剪碎，并加入消化液中进行消化，所述消化液中包含IV型胶原酶和透明质酸酶；将上清转移至离心管离心，离心后弃去上清，并使用完全培养基重悬细胞，并将细胞接种培养；培养至瓶底细胞覆盖率≥70%时消化、离心，并重悬于完全培养基中，传代培养后，即得结肠上皮细胞。本发明的成年大鼠结肠上皮细胞制备与培养方法，采用Ⅳ型胶原酶和透明质酸酶联合消化，并探索了最佳的消化时间，最终得到较纯的大鼠结肠上皮细胞。

公开(公告)号：CN106884002A

公开(公告)日：2017-06-23

申请号：CN201510939165.X

申请日：2015-12-15

Applicant: 上海市针灸经络研究所

Inventor： 施茵 ,  商海霞 ,  吴焕淦 ,  孙洁 ,  陈柳 ,  赵继梦 ,  季蓉 ,  包春辉 ,  吴璐一 ,  李雨薇

IPC: C12N5/071

CPC classification number: C12N5/0679

Abstract: 本发明涉及生物技术领域，特别是涉及一种稳定的结肠上皮细胞培养方法。本发明所提供的培养方法包括如下步骤：将结肠组织剪碎，并加入消化液中进行消化，所述消化液中包含IV型胶原酶和透明质酸酶；将上清转移至离心管离心，离心后弃去上清，并使用完全培养基重悬细胞，并将细胞接种培养；培养至瓶底细胞覆盖率≥70%时消化、离心，并重悬于完全培养基中，传代培养后，即得结肠上皮细胞。本发明的成年大鼠结肠上皮细胞制备与培养方法，采用Ⅳ型胶原酶和透明质酸酶联合消化，并探索了最佳的消化时间，最终得到较纯的大鼠结肠上皮细胞。