公开(公告)号：CN110456034B

公开(公告)日：2022-07-22

申请号：CN201810425065.9

申请日：2018-05-07

Applicant: 上海市第十人民医院

Inventor： 孙奋勇 ,  潘秋辉 ,  江赐忠 ,  吴棋 ,  黄楠 ,  崔中奇

IPC: G01N33/50

Abstract: 本发明涉及一种循环肿瘤细胞的检测方法：采集人体液样本，用甲醛固定后增加细胞膜通透性，将细胞加入若干组PCR多联管中，每管加有携带ID1的逆转录引物，逆转录成cDNA分子后，收集细胞混合加入另一组PCR多联管中，每管中加有携带ID2且3’端能够特异性识别cDNA分子的3’端的延伸引物，通过序列互补后进行延伸反应，收集并裂解细胞，通过PCR引物预扩增延伸产物。高通量测序，分析ID1:ID2的组合方式。其优点在于：同时对不同的标志物进行逆转录与PCR扩增，可准确识别循环肿瘤细胞、发生EMT的循环肿瘤细胞，并能联合其它技术使用，最大程度检测体液样本中极少的循环肿瘤细胞以及其它非体液稀有细胞。

公开(公告)号：CN110456034A

公开(公告)日：2019-11-15

申请号：CN201810425065.9

申请日：2018-05-07

Applicant: 上海市第十人民医院

Inventor： 孙奋勇 ,  潘秋辉 ,  江赐忠 ,  吴棋 ,  黄楠 ,  崔中奇

IPC: G01N33/50

Abstract: 本发明涉及一种循环肿瘤细胞的检测方法：采集人体液样本，用甲醛固定后增加细胞膜通透性，将细胞加入若干组PCR多联管中，每管加有携带ID1的逆转录引物，逆转录成cDNA分子后，收集细胞混合加入另一组PCR多联管中，每管中加有携带ID2且3’端能够特异性识别cDNA分子的3’端的延伸引物，通过序列互补后进行延伸反应，收集并裂解细胞，通过PCR引物预扩增延伸产物。高通量测序，分析ID1:ID2的组合方式。其优点在于：同时对不同的标志物进行逆转录与PCR扩增，可准确识别循环肿瘤细胞、发生EMT的循环肿瘤细胞，并能联合其它技术使用，最大程度检测体液样本中极少的循环肿瘤细胞以及其它非体液稀有细胞。