公开(公告)号：CN112522178A

公开(公告)日：2021-03-19

申请号：CN202011360049.X

申请日：2020-11-27

Applicant: 上海市东方医院(同济大学附属东方医院)

Inventor： 何志颖 ,  杨羊 ,  徐茗扬 ,  李玉婷

IPC: C12N5/071

Abstract: 本发明提供了一种在体外长期培养和扩增成熟肝细胞的方法。本发明所述的方法通过在合适的细胞培养和传代的时机进行培养基的更替，细胞增殖速度明显提高，细胞均为典型的上皮样形态。在更替培养基后，细胞度过增殖瓶颈期，继续培养至细胞稳定期恢复原培养基，细胞形态维持不变，细胞仍继续增殖。本发明的技术方案有利于帮助细胞度过增殖瓶颈期。所述方法获得的肝细胞具有典型的肝前体细胞的特征，通过去分化为肝前体细胞来实现成熟肝细胞的体外增殖，进而实现成熟肝细胞的体外长期培养，可至少培养至第30代。本发明为肝细胞移植提供足够数量的供体肝细胞提供了新的途径。

公开(公告)号：CN112522178B

公开(公告)日：2023-05-16

申请号：CN202011360049.X

申请日：2020-11-27

Applicant: 上海市东方医院(同济大学附属东方医院)

Inventor： 何志颖 ,  杨羊 ,  徐茗扬 ,  李玉婷

IPC: C12N5/071

Abstract: 本发明提供了一种在体外长期培养和扩增成熟肝细胞的方法。本发明所述的方法通过在合适的细胞培养和传代的时机进行培养基的更替，细胞增殖速度明显提高，细胞均为典型的上皮样形态。在更替培养基后，细胞度过增殖瓶颈期，继续培养至细胞稳定期恢复原培养基，细胞形态维持不变，细胞仍继续增殖。本发明的技术方案有利于帮助细胞度过增殖瓶颈期。所述方法获得的肝细胞具有典型的肝前体细胞的特征，通过去分化为肝前体细胞来实现成熟肝细胞的体外增殖，进而实现成熟肝细胞的体外长期培养，可至少培养至第30代。本发明为肝细胞移植提供足够数量的供体肝细胞提供了新的途径。