稳定表达全长人TSH受体的细胞株及构建方法

    公开(公告)号:CN107630040A

    公开(公告)日:2018-01-26

    申请号:CN201710907347.8

    申请日:2017-09-29

    Abstract: 本发明公开稳定表达全长人TSH受体(hTSHR)的细胞株TSHR-LV-CHO,其保藏编号为:CCTCC NO:C2017177。将全长hTSHR克隆到慢病毒真核表达载体中,用慢病毒—hTSHR真核表达载体感染CHO细胞,并在细胞中表达,获得稳定表达hTSHR细胞株。本发明的优点在于:本发明构建了稳定表达人TSH受体的细胞株TSHR-LV-CHO,采用慢病毒作为真核表达载体进行转染的细胞不但达到了人TSH受体稳定表达的目的,且细胞的功能更强,更敏感,为TSAb和TBAb的检测奠定了基础,也为进一步研究人TSH受体的结构和功能打下了基础。

    一种人TSH受体全长cDNA的细胞株及其构建方法

    公开(公告)号:CN101575591A

    公开(公告)日:2009-11-11

    申请号:CN200810037200.9

    申请日:2008-05-09

    Abstract: 本发明涉及一种细胞株及其构建方法。其技术方案如下:一种人TSH受体全长cDNA的细胞株,它由下列方法制得:(1)扩增hTSHR基因编码区的全部序列;(2)将hTSHR cDNA克隆入pGEM-T载体;(3)将hTSHR cDNA再克隆入酶pcDNA3.1质粒;(4)将重组的pcDNA3.1-hTSHR转化菌DH5α;(5)pcDNA3.1-hTSHR质粒的转染CHO细胞。本发明优点表现在:将扩增好的hTSHRcDNA克隆入pGEM-T载体,酶切鉴定确定是目的基因片段后再将其克隆到真核细胞表达载体pcDNA3.1中,并再次进行双酶切鉴定以保证基因片段的正确性。

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