α-酮戊二酸依赖型酶的酶活检测试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN109929908A

    公开(公告)日:2019-06-25

    申请号:CN201711346017.2

    申请日:2017-12-15

    Abstract: 本发明公开α-酮戊二酸依赖型酶的酶活检测试剂盒及其应用,所述试剂盒包括还原型辅酶Ⅱ(NADPH)或者还原型辅酶Ⅰ(NADH)中的一种,异柠檬酸脱氢酶IDH突变体蛋白和缓冲盐,所述IDH突变体蛋白是指IDH特定氨基酸突变后所获得的具有催化α-酮戊二酸(2-OG)新功能的IDH突变体蛋白。作为一个优选方案,所述试剂盒还包括竞争亚铁离子的金属离子。本发明提供了一种高效率高精确度检测α-酮戊二酸含量的方法,可用于检测α-酮戊二酸依赖型酶的酶催化活性,测定其酶动力学参数,及针对该类型酶展开高通量药物筛选。该方法解决了α-酮戊二酸依赖型酶的酶活检测操作繁琐,准确度和可重复性差,通量低,难以进行高通量药物筛选等诸多问题。

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