公开(公告)号：CN100368541C

公开(公告)日：2008-02-13

申请号：CN200610023640.X

申请日：2006-01-26

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 乔中东 ,  药晨江 ,  赵仰星 ,  周颖

IPC: C12N15/13 ,  C12N1/21 ,  C07K16/18 ,  C12N5/06 ,  A61D19/02

Abstract: 一种基于H-Y抗原分选奶牛X精子的免疫磁珠负筛选法，选择H-Y抗原所特有的4个抗原决定簇，利用反转录聚合酶链反应法扩增后连接，获得只编码这4个抗原决定簇的基因重组体并将其亚克隆入表达载体pET28a，在大肠杆菌BL21中诱导表达、Histrap柱纯化后获得一分子量为37kDa的融合蛋白。将融合蛋白免疫圈养鸡，从蛋黄中提取多克隆抗H-Y抗原的鸡IgY抗体并用纳米级磁珠标记，在新鲜奶牛精子中加入磁珠标记的抗体，反应后的精子缓慢通过放置于磁场中的磁柱，未吸附在磁柱上的精子即为X精子。本发明不需特殊的设备，成本低廉，获得的特异性抗体对X精子不会造成损伤，可在短时间内大批量进行精子分选。

公开(公告)号：CN1807625A

公开(公告)日：2006-07-26

申请号：CN200610023640.X

申请日：2006-01-26

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 乔中东 ,  药晨江 ,  赵仰星 ,  周颖

IPC: C12N15/13 ,  C12N1/21 ,  C07K16/18 ,  C12N5/06 ,  A61D19/02

Abstract: 一种基于H－Y抗原分选奶牛X精子的免疫磁珠负筛选法，选择H－Y抗原所特有的4个抗原决定簇，利用反转录聚合酶链反应法扩增后连接，获得只编码这4个抗原决定簇的基因重组体并将其亚克隆入表达载体pET28a，在大肠杆菌BL21中诱导表达、Histrap柱纯化后获得一分子量为37kDa的融合蛋白。将融合蛋白免疫圈养鸡，从蛋黄中提取多克隆抗H－Y抗原的鸡IgY抗体并用纳米级磁珠标记，在新鲜奶牛精子中加入磁珠标记的抗体，反应后的精子缓慢通过放置于磁场中的磁柱，未吸附在磁柱上的精子即为X精子。本发明不需特殊的设备，成本低廉，获得的特异性抗体对X精子不会造成损伤，可在短时间内大批量进行精子分选。