末端脱氧核苷酸转移酶变体、核酸及应用

    公开(公告)号:CN118256467B

    公开(公告)日:2024-09-20

    申请号:CN202410333012.X

    申请日:2024-03-22

    Abstract: 本发明涉及末端脱氧核苷酸转移酶变体、核酸及应用,涉及基因工程领域。其包括野生型或携带突变的末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)、单链DNA稳定因子(sSF)和柔性连接子;所述单链DNA稳定因子通过所述柔性连接子融合至所述末端脱氧核苷酸转移酶的N末端或/和C末端,或者插入至所述末端脱氧核苷酸转移酶的序列中间处。本发明获得了不依赖于模板的末端脱氧核苷酸转移酶突变体,这些TdT突变体能显著提高其耦合天然核苷酸和3’‑OH修饰核苷酸的效率,同时增强了3’‑OH修饰核苷酸掺入到具有发卡二级结构寡核苷酸的合成效率,可用于高效可控的合成寡核苷酸,这些TdT突变体可用于酶促寡核苷酸的合成,或用于其他循环合成功能DNA片段。

    末端脱氧核苷酸转移酶变体、核酸及应用

    公开(公告)号:CN118256467A

    公开(公告)日:2024-06-28

    申请号:CN202410333012.X

    申请日:2024-03-22

    Abstract: 本发明涉及末端脱氧核苷酸转移酶变体、核酸及应用,涉及基因工程领域。其包括野生型或携带突变的末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)、单链DNA稳定因子(sSF)和柔性连接子;所述单链DNA稳定因子通过所述柔性连接子融合至所述末端脱氧核苷酸转移酶的N末端或/和C末端,或者插入至所述末端脱氧核苷酸转移酶的序列中间处。本发明获得了不依赖于模板的末端脱氧核苷酸转移酶突变体,这些TdT突变体能显著提高其耦合天然核苷酸和3’‑OH修饰核苷酸的效率,同时增强了3’‑OH修饰核苷酸掺入到具有发卡二级结构寡核苷酸的合成效率,可用于高效可控的合成寡核苷酸,这些TdT突变体可用于酶促寡核苷酸的合成,或用于其他循环合成功能DNA片段。

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