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公开(公告)号：CN1563402A
公开(公告)日：2005-01-12
申请号：CN200410017019.3
申请日：2004-03-18
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种体外转录生成短双链干扰RNA方法，用于生物、基因工程技术领域。首先设计合成T7启动子18bp及含目标基因20bp和T7启动子反向互补序列18bpDNA寡核苷酸链，两者退火后形成双链DNA，合成T7启动子18bp及含目标基因反向互补序列20bp和T7启动子反向互补序列18bpDNA寡核苷酸链，两者退火后以两条含T7启动子的目标基因和目标基因反向互补序列的双链DNA链为模板分别转录生成正链RNA和反链RNA，将两条转录后的产物用DNase－I降解反应体系中的DNA，获得正单链RNA和反单链RNA，将两个反应体系中生成的正、负单链RNA退火并纯化后便获得短双链RNA。本发明获得的短双链干扰RNA导入细胞的短双链干扰RNA没有引起非特异性免疫反应，本发明操作简单、成本低、效率高。
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