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公开(公告)号:CN101514353A
公开(公告)日:2009-08-26
申请号:CN200910046354.9
申请日:2009-02-19
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12P19/34
Abstract: 一种生物技术领域的SGAE标签3’端cDNA片段的克隆方法,包括如下步骤:利用修饰的oligo(dT16)反转录所有的mRMA,然后利用鼠源逆转录酶在合成的第一条cDNA的3’端添加3-5个胞嘧啶碱基,利用引物合成第一条cDNA的互补链,根据cDNA两端的已知序列合成一对引物,进行PCR扩增,富集所有的cDNA;以步骤一富集得到的cDNA为模板,采用半巢式PCR克隆含tag的特异性片段。本发明更加容易获得含有tag标签的特异性片段,过程更加简单,费用更加低廉。