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公开(公告)号:CN114164286A
公开(公告)日:2022-03-11
申请号:CN202111505493.0
申请日:2021-12-10
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明公开了一种检测沙门氏菌的多重液滴数字PCR试剂盒及其方法和应用,涉及微生物检测技术领域,试剂盒包含液滴数字PCR反应液和质控品,液滴数字PCR反应液中含有用于检测肠炎沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌核酸的引物和探针,探针的两端标记有荧光基团。本发明的试剂盒及检测方法有效的提高了检测的灵敏度,抗干扰性强,减少了检测的假阴性率,且与大肠杆菌、阪崎肠杆菌等均无交叉反应,检测特异性高,减少了检测的假阳性率。
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公开(公告)号:CN113999888A
公开(公告)日:2022-02-01
申请号:CN202111544235.3
申请日:2021-12-16
IPC: C12Q1/24
Abstract: 本发明公开了一种食源性致病菌洗脱方法,步骤为:1)配制洗脱液;2)洗脱液与样品按比例混合,放入无菌容器中孵育,收集洗脱溶液,洗脱液采用Tris·HCl缓冲溶液作为基础缓冲液,并通过加入蛋白胨、NaCl、纤维素酶、表面活性剂吐温20,增加拍打式均质机拍打,提高洗脱效率,本发明无需采取耗时的培养增菌方法,通过简单的操作让即食蔬菜污染到的食源性致病菌尽可能被洗脱下来,配合后续的检测方法,实现了食源性致病菌快速检测。
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公开(公告)号:CN114107530A
公开(公告)日:2022-03-01
申请号:CN202111534388.X
申请日:2021-12-15
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/42
Abstract: 本发明公开了一种针对生菜中沙门氏菌的液滴数字PCR检测方法及试剂盒,涉及食品安全检测技术领域,主要步骤包括对生菜样品中的沙门氏菌进行洗脱,提取洗脱悬浮液中DNA,设计合成沙门氏菌PCR扩增引物和探针,进行液滴PCR扩增反应,将扩增后的数字PCR芯片置于荧光读取仪中进行结果读取和分析,本发明具备了灵敏度高、特异性好和精确性高的优点,可以检测5fg/μL的DNA和102CFU/25mL的菌液。
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公开(公告)号:CN113981118A
公开(公告)日:2022-01-28
申请号:CN202111551734.5
申请日:2021-12-17
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/42
Abstract: 本发明涉及食品安全检测领域,公开了RPA‑LFD法快速检测沙门氏菌的引物对、方法、试剂盒及其应用。引物对为InvA‑F、InvA‑R,Stm‑F、Stm‑R,Sen‑F、Sen‑R;检测方法为提取样本总DNA,使用上述引物对进行RPA扩增反应和参数优化,应用靶标侧流层析试纸条进行检测,根据条带判读样品中是否含有沙门氏菌及其鼠伤寒、肠炎等血清型,整个检测过程可以在1小时内完成;试剂盒包括无菌双蒸水、缓冲液、标准阳性DNA、靶标侧流层析试纸条和产物稀释液。本发明包括检测沙门氏菌的引物对、方法和试剂盒,具有特异性强、简便、快速等特点,可用于沙门氏菌及其鼠伤寒和肠炎血清型的快速精准检测。
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公开(公告)号:CN104059977A
公开(公告)日:2014-09-24
申请号:CN201410293102.7
申请日:2014-06-25
Applicant: 上海交通大学
CPC classification number: C12Q1/6809 , C12Q2531/113 , C12Q2525/151
Abstract: 本发明提供一种沙门氏菌血清型鉴定方法,包括:1)提取待测样品中的DNA;2)将步骤1)获得的DNA作为模板,进行PCR检测,其中,PCR检测靶标为沙门氏菌CRISPR1和CRISPR2;3)将步骤2)中的PCR产物进行序列测定;4)借助在线免费软件CRISPRfinder,寻找对应CRISPR的前三个间隔序列,并与各血清型标准间隔序列进行同源比对;5)比对结果的判断,可同时鉴定23种沙门氏菌常见血清型。本发明还提供了一种沙门氏菌血清型的鉴定试剂盒,所述试剂盒包括用于扩增沙门氏菌CRISPR1和CRISPR2的引物,并提供23种沙门氏菌常见血清型的标准间隔序列表。
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公开(公告)号:CN105907889A
公开(公告)日:2016-08-31
申请号:CN201610293917.4
申请日:2016-05-05
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明提供了一种人源诺如病毒的检测试剂盒,所述检测试剂盒至少包括如下试剂:用于检测GI组人源诺如病毒的第一引物对和第一引物对配套TaqMan探针、用于检测GII组人源诺如病毒的第二引物对和第二引物对配套TaqMan探针、一步反转录聚合酶链式反应试剂。本发明还提供了该检测试剂盒的应用。本发明所提供的检测试剂盒特异性好,灵敏度高,使用简便,能高效检测人源诺如病毒。
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公开(公告)号:CN104437440A
公开(公告)日:2015-03-25
申请号:CN201410647601.1
申请日:2014-11-14
Applicant: 上海交通大学
IPC: B01J20/281 , B01J20/28 , B01J20/30 , C12N15/10
CPC classification number: B01J20/281 , B01J20/28009 , C12N15/1013
Abstract: 本发明公开了一种多氨基硅包磁性纳米粒子的制备方法与应用,以磁性纳米粒子为核心,用反相微乳液法对磁性核心进行包硅与氨基化修饰,在氨水催化作用下,水解TEOS和APTES,包被硅层的同时表面形成粗糙的网状结构,此结构表面携带大量的氨基基团,即为多氨基硅包磁性纳米粒子,可以用于非特异性以及特异性的DNA分离。本发明制备的多氨基硅包磁性纳米粒子原料成本低,制备方法操作简易、时间短,产物无毒,环境友好;与传统的先合成硅包磁性纳米粒子再氨基化制备的氨基硅包磁性纳米粒子相比,表面氨基数量极大提高,对DNA的分离率也大为提高。
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公开(公告)号:CN106244722A
公开(公告)日:2016-12-21
申请号:CN201610891572.2
申请日:2016-10-12
Applicant: 上海交通大学
CPC classification number: C12Q1/689
Abstract: 本发明公开一种可用于沙门氏菌及其血清型检测的引物、利用该引物检测沙门氏菌及血清型的方法及其试剂盒。通过该引物及检测方法能快速一体的对沙门氏菌及沙门氏菌血清型进行分型检测。本发明所述沙门氏菌及血清型的一体检测方法,具有检测方法快速、有效、低成本、操作简单、灵敏度高等优点,为沙门氏菌及其血清型的一体检测提供了新的技术平台,可用于畜牧业生产单位、基层医疗卫生单位和各疾病预防控制中心筛查和检测沙门氏菌及其血清型,具有广阔的市场前景和较大的经济、社会效益,适于大范围推广应用。
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公开(公告)号:CN104437440B
公开(公告)日:2016-10-12
申请号:CN201410647601.1
申请日:2014-11-14
Applicant: 上海交通大学
IPC: B01J20/281 , B01J20/28 , B01J20/30 , C12N15/10
Abstract: 本发明公开了一种多氨基硅包磁性纳米粒子的制备方法与应用,以磁性纳米粒子为核心,用反相微乳液法对磁性核心进行包硅与氨基化修饰,在氨水催化作用下,水解TEOS和APTES,包被硅层的同时表面形成粗糙的网状结构,此结构表面携带大量的氨基基团,即为多氨基硅包磁性纳米粒子,可以用于非特异性以及特异性的DNA分离。本发明制备的多氨基硅包磁性纳米粒子原料成本低,制备方法操作简易、时间短,产物无毒,环境友好;与传统的先合成硅包磁性纳米粒子再氨基化制备的氨基硅包磁性纳米粒子相比,表面氨基数量极大提高,对DNA的分离率也大为提高。
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公开(公告)号:CN104059977B
公开(公告)日:2016-08-24
申请号:CN201410293102.7
申请日:2014-06-25
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明提供一种沙门氏菌血清型鉴定方法,包括:1)提取待测样品中的DNA;2)将步骤1)获得的DNA作为模板,进行PCR检测,其中,PCR检测靶标为沙门氏菌CRISPR1和CRISPR2;3)将步骤2)中的PCR产物进行序列测定;4)借助在线免费软件CRISPRfinder,寻找对应CRISPR的前三个间隔序列,并与各血清型标准间隔序列进行同源比对;5)比对结果的判断,可同时鉴定23种沙门氏菌常见血清型。本发明还提供了一种沙门氏菌血清型的鉴定试剂盒,所述试剂盒包括用于扩增沙门氏菌CRISPR1和CRISPR2的引物,并提供23种沙门氏菌常见血清型的标准间隔序列表。
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