公开(公告)号：CN119391731A

公开(公告)日：2025-02-07

申请号：CN202411565649.8

申请日：2024-11-04

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 周鹏 ,  安渊 ,  苏连泰 ,  刘默洋 ,  文武武 ,  高鲤

IPC: C12N15/55 ,  C12N15/113 ,  C12N15/82 ,  G01N21/64 ,  A01H5/12 ,  A01H5/06 ,  A01H6/54 ,  A01H6/82

Abstract: 本发明公开了一种基因编辑系统及构建和评估方法，涉及生物技术领域。采用紫花苜蓿中编码EF1‑α延伸因子的基因启动子驱动Cas9表达，根据紫花苜蓿中编码氨基酸的密码子偏好优化Cas9基因序列，得到了改良的CRISPR_2.0系统，并构建得到载体CRISPR_2.0‑1×MsEF1‑αP::Opt‑Cas9；高表达基因的EF1‑α延伸因子的启动子序列如SEQ ID NO：1所示，优化后的CAS9基因的编码序列如SEQ ID NO：2所示。该基因编辑系统的基因编辑有效性的评估方法为在烟草叶片中共表达该系统和依靠紫花苜蓿转基因毛状根建立该基因编辑评估体系。本发明提高了编辑精度，降低基因组突变风险。