公开(公告)号：CN108796022B

公开(公告)日：2022-01-07

申请号：CN201710292662.4

申请日：2017-04-28

Applicant: 上海中医药大学

Inventor： 王强利 ,  赵亮 ,  王莹 ,  王亚辉 ,  国海东 ,  唐少旗

IPC: C12P33/00 ,  A61K31/56 ,  A61P35/00

Abstract: 本发明属于医药领域，具体为酶水解柴胡皂苷制备柴胡皂苷元A和柴胡皂苷元D的工艺。柴胡皂苷元A和D的具体制备步骤包括：(1)柴胡总皂苷溶液中加入复合植物水解酶，在pH＝4.5～6的条件下，40～60℃反应15～30小时；(2)柴胡皂苷酶解液用有机溶剂萃取，合并萃取液并浓缩干燥，取固体；(3)固体溶解于醇，制备液相色谱法分离，得到柴胡皂苷元A和柴胡皂苷元D。该方法工艺稳定，产率提高；酶水解转化率高，产物纯度可达98％以上。柴胡皂苷元A和D对四种亚型的人乳腺癌细胞系均有抑制作用，可用于制备治疗乳腺癌的药物。

公开(公告)号：CN109136263A

公开(公告)日：2019-01-04

申请号：CN201811011004.4

申请日：2018-08-31

Applicant: 上海中医药大学

Inventor： 王莹 ,  赵亮 ,  徐冉驰 ,  王强利 ,  王亚辉 ,  李英 ,  国海东 ,  蔡昊 ,  付云飞 ,  吴心语

IPC: C12N15/85 ,  C12N5/10 ,  C12N15/66 ,  C12Q1/02

CPC classification number: C12N15/85 ,  C12N5/0625 ,  C12N5/0686 ,  C12N15/66 ,  C12N2510/02 ,  G01N33/5008 ,  G01N2800/324

Abstract: 本发明涉及生物技术领域，具体为一种重组载体以及含有这种重组载体的稳转细胞株，可用于筛选促干细胞归巢药物。这种重组载体含有CXCR4启动子序列和luc2荧光素酶报告基因；且luc2荧光素酶报告基因位于CXCR4启动子序列下游。含有上述的重组载体以及内参荧光酶载体的稳转细胞株可以用于检测CXCR4基因的表达活性水平，进而用于高通量筛选促进干细胞归巢的药物。因此，上述稳转细胞株，加入候选药物进行刺激，通过luc2相对荧光强度，可评价该候选药物促进CXCR4启动子表达的活性，从而筛选干细胞归巢的药物或者筛选治疗或辅助治疗心肌梗死的药物，有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN108796022A

公开(公告)日：2018-11-13

申请号：CN201710292662.4

申请日：2017-04-28

Applicant: 上海中医药大学

Inventor： 王强利 ,  赵亮 ,  王莹 ,  王亚辉 ,  国海东 ,  唐少旗

IPC: C12P33/00 ,  A61K31/56 ,  A61P35/00

CPC classification number: C12P33/00 ,  A61K31/56

Abstract: 本发明属于医药领域，具体为酶水解柴胡皂苷制备柴胡皂苷元A和柴胡皂苷元D的工艺。柴胡皂苷元A和D的具体制备步骤包括：(1)柴胡总皂苷溶液中加入复合植物水解酶，在pH＝4.5～6的条件下，40～60℃反应15～30小时；(2)柴胡皂苷酶解液用有机溶剂萃取，合并萃取液并浓缩干燥，取固体；(3)固体溶解于醇，制备液相色谱法分离，得到柴胡皂苷元A和柴胡皂苷元D。该方法工艺稳定，产率提高；酶水解转化率高，产物纯度可达98％以上。柴胡皂苷元A和D对四种亚型的人乳腺癌细胞系均有抑制作用，可用于制备治疗乳腺癌的药物。