重组表达载体及其构建方法、重组病毒毒株及其应用、重组蛋白及亚单位疫苗

    公开(公告)号:CN105039405A

    公开(公告)日:2015-11-11

    申请号:CN201510257530.9

    申请日:2015-05-20

    发明人: 李秋菊

    摘要: 本发明涉及动物病毒学和基因工程学技术领域,特别涉及重组表达载体及其构建方法、重组病毒毒株及其应用、重组蛋白及亚单位疫苗。本发明成功PCR扩增PRRSV-GP5基因和PCV2-Cap基因及构建高效重组表达质粒BacSC-Dual-GP5-Cap。此外,本发明重组毒株所表达的重组蛋白,其产物表达产量很高。用研制的BacSC-Dual-GP5-Cap亚单位疫苗制品对本动物是安全的。疫苗免疫效力试验结果表明,利用基因工程方法研制的PRRSV和PCV2具有良好的免疫原性,该亚单位疫苗在猪蓝耳病和猪圆环病的防制方面将具有很广泛的应用前景。

    一种狂犬病灭活疫苗的制备方法

    公开(公告)号:CN103948919A

    公开(公告)日:2014-07-30

    申请号:CN201410168670.4

    申请日:2014-04-23

    摘要: 本发明公开了一种狂犬病灭活疫苗的制备方法,其包括以下步骤:对仓鼠肾细胞系进行细胞的复苏、传代与培养的步骤;然后对处理后的仓鼠肾细胞进行毒种繁殖、毒液繁殖的步骤;制备疫苗佐剂,然后按照毒液总量0.025%的比例加入B-丙内酯,在4℃条件下灭活24小时,然后在37℃条件下水解2小时,然后按照水解后细胞毒液与疫苗佐剂9:1的比例进行定量分装,得到狂犬病灭活疫苗。使其具有操作简单、工艺稳定、疫苗病毒含量高、质量易控等优点,可显著提高疫苗产量和质量,并且采用本发明制备方法制得的疫苗安全性好、免疫力高、制造成本低。

    一种猪伪狂犬病活疫苗的制备方法

    公开(公告)号:CN103948920A

    公开(公告)日:2014-07-30

    申请号:CN201410168664.9

    申请日:2014-04-23

    IPC分类号: A61K39/245 C12N7/02 A61P31/22

    摘要: 本发明公开了一种猪伪狂犬病活疫苗的制备方法,其包括以下步骤:对猪睾丸细胞系或仓鼠肾细胞系进行细胞的复苏、传代与培养的步骤;然后在处理后的猪睾丸细胞系或仓鼠肾细胞系进行毒种繁殖、毒液繁殖的步骤;制备疫苗稳定剂,然后按照细胞毒液与疫苗稳定剂7:1的比例进行定量分装,每头份病毒含量不低于106TCID50,分装后迅速进行冷冻真空干燥,得到猪伪狂犬病活疫苗。用细胞系代替鸡胚成纤维细胞生产猪伪狂犬病活疫苗,可以从源头控制外源污染,保证了生产猪伪狂犬病活疫苗的安全性,实现了制备出的猪伪狂犬病活疫苗质量均一、成本低廉,且疫苗安全性好、免疫效力高。