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公开(公告)号：CN103898137B
公开(公告)日：2019-09-06
申请号：CN201410075529.X
申请日：2014-03-04
Applicant: 上海中医药大学附属市中医医院 , 上海中医药大学附属曙光医院
Abstract: 本发明涉及一种含有MALAT1基因3’UTR序列和双荧光素酶报告基因的质粒及其应用。具体地，根据生物信息学数据库预测has‑mir‑619‑5p与MALAT1基因3’UTR区结合的位点，将其中包含该结合位点的序列扩增出来，插入双荧光素酶报告基因质粒pmirGLO vector，成功构建了MALAT1基因3’UTR区双荧光素酶报告基因质粒。该质粒可作为简单易行的工具，用于检测调控MALAT1表达的microRNA的表达量、筛选调控MALAT1表达的microRNA，以及评估microRNA对MALAT1表达的调控作用，为通过检测microRNA表达情况了解肿瘤的发生发展提供了重要手段。
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公开(公告)号：CN103898158A
公开(公告)日：2014-07-02
申请号：CN201410075547.8
申请日：2014-03-04
Applicant: 上海中医药大学附属曙光医院 , 上海中医药大学附属市中医医院
Abstract: 本发明涉及一种含有MALAT1启动子序列和报告基因的载体及其构建方法和用途。具体地，将MALAT1的启动子序列（1100bp）插入pGL3-Basic载体，构建获得含MALAT1启动子和报告基因luc+的重组质粒pGL3-Basic-MALAT1-promoter。该重组质粒与海肾萤光素酶报告基因载体pRL-SV40共转染肿瘤细胞，添加候选抗肿瘤药物作用细胞，然后通过检测双荧光素酶活性可以反映各药物对MALAT1基因启动子转录活性的影响，从而应用于靶向MALAT1基因的抗肿瘤药物筛选。该方法特别适合大规模针对MALAT1基因的抗肿瘤药物的筛选，方法简单，直观和快速，靶向性强，无放射性。
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公开(公告)号：CN103898158B
公开(公告)日：2019-10-29
申请号：CN201410075547.8
申请日：2014-03-04
Applicant: 上海中医药大学附属曙光医院 , 上海中医药大学附属市中医医院
IPC: C12N15/85 , C12N15/66 , C12Q1/6886 , C12Q1/02 , C12N5/10
Abstract: 本发明涉及一种含有MALAT1启动子序列和报告基因的载体及其构建方法和用途。具体地，将MALAT1的启动子序列（1100bp）插入pGL3‑Basic载体，构建获得含MALAT1启动子和报告基因luc+的重组质粒pGL3‑Basic‑MALAT1‑promoter。该重组质粒与海肾萤光素酶报告基因载体pRL‑SV40共转染肿瘤细胞，添加候选抗肿瘤药物作用细胞，然后通过检测双荧光素酶活性可以反映各药物对MALAT1基因启动子转录活性的影响，从而应用于靶向MALAT1基因的抗肿瘤药物筛选。该方法特别适合大规模针对MALAT1基因的抗肿瘤药物的筛选，方法简单，直观和快速，靶向性强，无放射性。
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公开(公告)号：CN103898137A
公开(公告)日：2014-07-02
申请号：CN201410075529.X
申请日：2014-03-04
Applicant: 上海中医药大学附属市中医医院 , 上海中医药大学附属曙光医院
Abstract: 本发明涉及一种含有MALAT1基因3’UTR序列和双荧光素酶报告基因的质粒及其应用。具体地，根据生物信息学数据库预测has-mir-619-5p与MALAT1基因3’UTR区结合的位点，将其中包含该结合位点的序列扩增出来，插入双荧光素酶报告基因质粒pmirGLOvector，成功构建了MALAT1基因3’UTR区双荧光素酶报告基因质粒。该质粒可作为简单易行的工具，用于检测调控MALAT1表达的microRNA的表达量、筛选调控MALAT1表达的microRNA，以及评估microRNA对MALAT1表达的调控作用，为通过检测microRNA表达情况了解肿瘤的发生发展提供了重要手段。
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