一种以效应为导向的目标/非目标雄激素干扰物鉴别方法

    公开(公告)号:CN105891365B

    公开(公告)日:2018-07-03

    申请号:CN201610252354.4

    申请日:2016-04-21

    Applicant: 南京大学

    Inventor: 史薇 郭婧 于红霞

    Abstract: 本发明公开了一种以效应为导向复杂环境样品中目标/非目标雄激素干扰物鉴别方法,其步骤为:样品前处理及初步分离;雄激素活性测试;致毒物质的高通量分离与制备;基于高效液相色谱–飞行时间质谱的活性组分扫描;雄激素干扰物目标性筛选;结合质谱、色谱和毒性特征的雄激素干扰物非目标性鉴别与毒物确认。本发明利用SPE柱和制备分离相串联的方法进行分离,将DMSO作保护剂优化高通量分离浓缩方法,利用目标数据库实现关键毒物目标性鉴别,基于高效液相色谱–飞行时间质谱谱库进行质谱特征鉴别、基于保留时间与化合物物化性质进行色谱特征鉴别、基于分子动力学模拟技术进行毒性特征鉴别,进而实现关键雄激素干扰物的非目标性识别与毒物确认。

    一种检测污染水体中猪粪的PCR试剂盒及其检测方法

    公开(公告)号:CN104152563B

    公开(公告)日:2016-04-06

    申请号:CN201410407997.2

    申请日:2014-08-18

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了一种检测污染水体中猪粪的PCR试剂盒及其检测方法,属于水体污染检测领域。一种检测污染水体中猪粪的PCR试剂盒,包括4种巢式PCR引物、dNTP、PCR buffer、Mg2+溶液和ddH2O,使用两轮PCR扩增,巢式PCR引物SPF1、SPR1的检测阈值为0.254ng/ul猪粪DNA,巢式PCR引物NPF1、NPR1的检测阈值为0.008ng/ul猪粪DNA,在第一轮PCR扩增后未检测出污染时,可以进行第二轮PCR扩增。通过PCR手段检测水体猪线粒体DNA来判断粪便污染,具有良好的特异性,降低了对检测样本的误判,可以实现快速、准确地检测水体中的微量猪粪污染。

    一种检测污染水体中人粪的PCR试剂盒及其检测方法

    公开(公告)号:CN104152562B

    公开(公告)日:2016-04-06

    申请号:CN201410407827.4

    申请日:2014-08-18

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了一种检测污染水体中人粪的PCR试剂盒及其检测方法,属于水体污染检测领域。一种检测污染水体中人粪的PCR试剂盒,包括4种巢式PCR引物、dNTP、PCR buffer、Mg2+和ddH2O,使用两轮PCR扩增,巢式PCR引物SHF1、SHR1的检测阈值为0.916pg/ul人粪DNA,巢式PCR引物NHF1、NHR1的检测阈值为0.057pg/ul人粪DNA,在第一轮PCR扩增后未检测出污染时,可以进行第二轮PCR扩增。通过PCR手段检测水体人线粒体DNA来判断粪便污染,具有良好的特异性,降低了对检测样本的误判,可以实现快速、准确地检测水体中的微量人粪污染。

    一种定量检测水样中全氟辛烷磺酸同分异构体的方法

    公开(公告)号:CN102866225B

    公开(公告)日:2015-04-01

    申请号:CN201210368897.4

    申请日:2012-09-27

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本方法提供一种定量检测水样中全氟辛烷磺酸同分异构体的方法,属于全氟辛烷磺酸监测领域。其步骤包括:(1)固相萃取:量取水样,用固相萃取柱萃取;萃取后,进行离心除去萃取柱中水分,然后用缓冲溶液和甲醇净化干燥后的萃取柱,再用碱性甲醇洗脱净化后的萃取柱,收集洗脱液;(2)萃取液化学处理:将洗脱液氮吹至干,加入衍生化试剂氢氧化四丁基铵溶液和甲基叔丁基醚后混匀,并再次将溶液氮吹至干,加入甲基叔丁基醚混匀定容;(3)气相色谱-质谱检测。本发明成功地实现PFOS同分异构体的有效分离,达到对PFOS同分异构体的准确定量检测。与已有的测试技术相比,本发明实现了样品中PFOS同分异构体的定量分析检测,解决了PFOS定量误差的问题。

    一种用于有机污染物毒性测试的显微注射系统及显微注射方法和应用

    公开(公告)号:CN102994371B

    公开(公告)日:2014-12-10

    申请号:CN201210589394.X

    申请日:2012-12-31

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了一种用于有机污染物毒性测试的显微注射系统及显微注射方法和应用,属于显微注射领域。本发明包括显微注射主机、注射臂、显微注射毛细管、N2钢瓶、真空泵、体视显微镜、琼脂板和镜台测微尺。其显微注射方法为:(1)配制有机污染物溶液;(2)制备显微注射毛细管和琼脂板,显微注射毛细管的内径为0.7mm,外径为1mm;(3)将待注射的有机污染物液体吸入显微注射毛细管;(4)有机污染物液体呈液滴状挂在显微注射毛细管的针尖端,并控制注射液滴的体积达到预定值;(5)控制注射臂,将有机污染物液滴注射到被注射体内。本发明实现了准确精细的无伤害微量注射,为评价污染物排放、有效控制和管理提供了技术支撑。

    一种检测污染水体中猪粪的PCR试剂盒及其检测方法

    公开(公告)号:CN104152563A

    公开(公告)日:2014-11-19

    申请号:CN201410407997.2

    申请日:2014-08-18

    Applicant: 南京大学

    CPC classification number: C12Q1/6848 C12Q2531/113 C12Q2549/119

    Abstract: 本发明公开了一种检测污染水体中猪粪的PCR试剂盒及其检测方法,属于水体污染检测领域。一种检测污染水体中猪粪的PCR试剂盒,包括4种巢式PCR引物、dNTP、PCR buffer、Mg2+溶液和ddH2O,使用两轮PCR扩增,巢式PCR引物SPF1、SPR1的检测阈值为0.254ng/ul猪粪DNA,巢式PCR引物NPF1、NPR1的检测阈值为0.008ng/ul猪粪DNA,在第一轮PCR扩增后未检测出污染时,可以进行第二轮PCR扩增。通过PCR手段检测水体猪线粒体DNA来判断粪便污染,具有良好的特异性,降低了对检测样本的误判,可以实现快速、准确地检测水体中的微量猪粪污染。

    一种同时快速筛查鉴定水样中抗组胺类药物的高效液相色谱-飞行时间质谱联用方法

    公开(公告)号:CN103308642B

    公开(公告)日:2014-07-09

    申请号:CN201310268337.6

    申请日:2013-06-28

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了一种同时快速筛查鉴定水样中抗组胺类药物的高效液相色谱-飞行时间质谱联用方法,属于分析化学领域。其步骤为:(A)滤膜过滤;(B)固相小柱萃取:利用固相萃取小柱对水样中所含的抗组胺类药物进行富集;(C)溶剂洗脱:利用有机溶剂将目标物从固相萃取柱上洗脱下来;(D)浓缩与定容;(E)上机检测:通过高效液相色谱-飞行时间谱联用仪对样品进行筛查和鉴定。本发明对水样实现了大规模的筛选排查,通过不同物质的一级和二级质谱谱图的提取分析并与现有的物质库进行比对,再通过软件给出的打分值判定某种物质的存在概率,定性评价综合全面,可以实现传统仪器不能达到的全面筛选非目标性的污染物这一功能。

    水样中关键拟/抗雄激素干扰毒物快速鉴别方法

    公开(公告)号:CN103529145A

    公开(公告)日:2014-01-22

    申请号:CN201310539205.2

    申请日:2013-11-04

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了一种水样中关键拟/抗雄激素干扰毒物快速鉴别方法。其主要包括以下步骤:水样通过固相萃取柱进行富集,萃取柱负压真空干燥;依次用有机溶剂洗脱萃取柱,将洗脱液浓缩,定容,一半用于拟/抗雄激素总毒性测试,并基于标准物质EC50与稀释倍数计算总毒性当量,另一半用于有毒样品的主要致毒物质鉴别;基于常见拟/抗雄激素活性毒物的质谱特征与毒性当量建立毒物质量平衡数据库,进而基于定性分析与定量分析的结果,进行毒性当量与毒性贡献率计算,确定主要致毒物质。本发明样品需求量少,试剂消耗少,成本低,步骤少,却能较快速的鉴别不同污染水平水体中的拟/抗雄激素毒物。

    一种基于活细胞矩阵技术的物质毒性的确定方法

    公开(公告)号:CN102925532A

    公开(公告)日:2013-02-13

    申请号:CN201210372540.3

    申请日:2012-09-29

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 一种基于活细胞矩阵技术的物质毒性的确定方法,属于物质毒性的确定方法。其步骤为:首先,测试环境毒物对大肠杆菌的生长抑制作用,求算环境毒物对细菌生长抑制的EC20;取出冻存有大肠杆菌的培养管或微孔板,融化,迅速转移复制入一块装有新鲜培养基的培养管或微孔板,培养细菌3个小时,将其分装入多孔微孔板;选择一个或多个测试浓度,在培养管或微孔板内快速加入受试环境毒物;将加过受试化合物的培养管或微孔板放入酶标仪,记录报告基因信号在此后随时间变化的情况。本发明可以提供高品质的基因表达数据;同时更快捷、简便,无需复杂的前处理过程;并且,具有很高的可重复性;成本低,可以最大程度的避免人为操作误差或干扰。

    一种定量检测水样中全氟辛烷磺酸同分异构体的方法

    公开(公告)号:CN102866225A

    公开(公告)日:2013-01-09

    申请号:CN201210368897.4

    申请日:2012-09-27

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本方法提供一种定量检测水样中全氟辛烷磺酸同分异构体的方法,属于全氟辛烷磺酸监测领域。其步骤包括:(1)固相萃取:量取水样,用固相萃取柱萃取;萃取后,进行离心除去萃取柱中水分,然后用缓冲溶液和甲醇净化干燥后的萃取柱,再用碱性甲醇洗脱净化后的萃取柱,收集洗脱液;(2)萃取液化学处理:将洗脱液氮吹至干,加入衍生化试剂氢氧化四丁基铵溶液和甲基叔丁基醚后混匀,并再次将溶液氮吹至干,加入甲基叔丁基醚混匀定容;(3)气相色谱-质谱检测。本发明成功地实现PFOS同分异构体的有效分离,达到对PFOS同分异构体的准确定量检测。与已有的测试技术相比,本发明实现了样品中PFOS同分异构体的定量分析检测,解决了PFOS定量误差的问题。

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