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公开(公告)号：CN111926013A
公开(公告)日：2020-11-13
申请号：CN202010829306.3
申请日：2020-08-18
申请人： 湖北大学
IPC分类号： C12N15/113 , C12N9/50 , C12P21/00 , C12P13/02 , C12R1/10
摘要： 本发明涉及基因工程和微生物代谢工程领域，公开了适用于地衣芽胞杆菌的启动子及其在高效表达目的产物中的应用，本发明人工设计了四种适用于地衣芽胞杆菌的启动子（R1-R4）。接着，以绿色荧光蛋白GFP、角蛋白酶KER为目的蛋白，与启动子P43相比，研究发现启动子R2效果最佳，显著提高了GFP、KER的表达水平，其中GFP产量提高63.5倍，KER酶活提高7.8倍。最后，将启动子R2应用于代谢工程中，与对照菌株相比，通过将其应用于代谢途径强化使聚γ-谷氨酸、杆菌肽的产量分别提高了52.09％和20.39％。
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公开(公告)号：CN106434801B
公开(公告)日：2020-09-11
申请号：CN201610753883.2
申请日：2016-08-29
申请人： 湖北大学
摘要： 本发明提供了一种芽胞杆菌高产普切明的发酵工艺，通过特定培养基组成及培养条件的配合来实现普切明的增产，所述培养基：葡萄糖10‑50g/L、酵母粉0.1‑2.0g/L、硫酸铵1‑10g/L、二水合柠檬酸三钠1‑18g/L、磷酸氢二钾0.10‑2.00g/L、硫酸镁0.1‑2.0g/L、氯化铁0.02‑0.30g/L、硫酸锰0.005‑0.50g/L、氯化钙0.1‑1.0g/L、吐温‑80 0.01％‑1％，pH7.0‑7.5；发酵培养条件：培养温度25‑40℃，摇床转速180‑240r/min，发酵时间24‑40h。并使用地衣芽胞杆菌、枯草芽胞杆菌和解淀粉芽胞杆菌进行发酵验证均实现了普切明的增产。本发明工艺具有组成简单、环保、经济、产量高、稳定且适用范围广的特点，具有一定应用前景。
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公开(公告)号：CN106939310B
公开(公告)日：2020-05-08
申请号：CN201710062695.X
申请日：2017-01-24
申请人： 湖北大学
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/75
摘要： 一种基于核糖体结合位点改造的启动子优化方法，S1、具体为将枯草芽胞杆菌中P43启动子的转录起始位点后的核糖体结合位点的序列扩增；S2、再通过引物设计，扩增出带核糖体结合位点序列的P43启动子，以获得具有至少一种结构功能的序列。其优点是：将P43启动子中核糖体结合位点进行本发明的优化方法，使得优化后的启动子与mRNA的结合水平提高，继而提高了目的基因的表达水平。
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公开(公告)号：CN110452863A
公开(公告)日：2019-11-15
申请号：CN201910685439.5
申请日：2019-07-27
申请人： 湖北大学
摘要： 本发明属于基因及生物发酵领域，公开了鸟氨酸环己烷酶在提高解淀粉芽胞杆菌生产伊枯草菌素A产量中的应用。本发明以质粒pHY300PLK为基础，通过构建来源于谷氨酸棒杆菌中的鸟氨酸环己烷酶Ocd的过表达载体pHY-ocd，成功在解淀粉芽胞杆菌LX-12中强化表达了基因ocd，得到了解淀粉芽胞杆菌工程菌LX-12/pHY-ocd。与对照菌LX-12/pHY300相比，工程菌株LX-12/pHY-ocd的IturinA产量至少提高了37%以上。
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公开(公告)号：CN110438055A
公开(公告)日：2019-11-12
申请号：CN201910705699.4
申请日：2019-08-01
申请人： 湖北大学
摘要： 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种含有苯丙酮酸脱羧酶突变体的全细胞催化剂及在生产苯乙醇中的应用。本发明是以苯乙醇耐受菌地衣芽孢杆菌作为表达宿主，通过游离质粒pHY300PLK异源表达来源于乳酸乳球菌的苯丙酮酸脱羧酶突变体和来源于地衣芽孢杆菌自身的醇脱氢酶，得到了苯丙酮酸脱羧酶、醇脱氢酶共表达的重组地衣芽孢杆菌。以L-苯丙氨酸为底物，通过重组菌全细胞催化生产苯乙醇。具有低生产成本、生产条件温和、转化体系中杂质较少、工艺步骤简单、生产操作安全等优点。
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公开(公告)号：CN110305917A
公开(公告)日：2019-10-08
申请号：CN201910685440.8
申请日：2019-07-27
申请人： 湖北大学
摘要： 本发明属于基因工程和微生物技术领域，具体芽胞杆菌rex基因在提高聚γ-谷氨酸产量中的应用。本方法采用分子生物学技术，通过在地衣芽胞杆菌中敲除转录抑制因子基因rex，获得了rex缺失的地衣芽胞杆菌工程菌株WX-02△rex，显著提高了地衣芽胞杆菌甘油代谢的速率。WX-02△rex在不同培养基中的甘油消耗速率比原始菌地衣芽胞杆菌WX-02至少提高了10.55%，最高可达27.94%。利用该菌株在聚γ-谷氨酸发酵培养基中能够显著提高聚γ-谷氨酸的产量，至少提高了35.29%，最高可达50%。说明该基因工程改造方法在提高微生物甘油代谢速率具有重要作用，并提高甘油合成生物基化学品的效率。
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公开(公告)号：CN110295189A
公开(公告)日：2019-10-01
申请号：CN201910685428.7
申请日：2019-07-27
申请人： 湖北大学
摘要： 本发明属于生物技术和发酵领域，具体涉及4-氨基丁酸氨基转移酶在提高伊枯草菌素A发酵产量中的应用。本发明以质粒T2(2)-Ori为基础，通过构建4-氨基丁酸氨基转移酶基因gabT的敲除载体T2-△gabT，成功在解淀粉芽胞杆菌LX-12中敲除了gabT基因，得到了解淀粉芽胞杆菌工程菌LX-12△gabT。与对照菌LX-12相比，工程菌株LX-12△gabT的IturinA产量至少提高了30%以上。
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公开(公告)号：CN105886417B
公开(公告)日：2019-08-06
申请号：CN201410548352.0
申请日：2014-10-14
申请人： 湖北大学
摘要： 本发明涉及微生物领域，具体地，本发明涉及一株具有降烟草特有亚硝胺的解淀粉芽孢杆菌。本发明采用的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)DA9已于2014年6月12日保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCCNO：M2014252。本发明从白肋烟烟叶表面细菌中筛选到一株能显著降低烟草特有亚硝胺的解淀粉芽孢杆菌DA9，该菌株的特点为降亚硝酸盐能力强而降硝酸盐能力弱，通过液体发酵制备菌液，将菌液运用于白肋烟晾晒和陈化过程中，分别比对照低47.08％和47.57％，具有良好的应用价值。
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公开(公告)号：CN106497961B
公开(公告)日：2019-05-21
申请号：CN201610821676.6
申请日：2016-09-14
申请人： 湖北大学
摘要： 一种提高芽胞杆菌生物量的基因工程改造方法，所述的芽胞杆菌为phop基因缺失的缺失株；所述的芽胞杆菌为枯草芽胞杆菌，地衣芽胞杆菌或解淀粉芽胞杆菌。其制备方法如下：1)以芽胞杆菌基因组为模板，扩增phop的上下游片段，然后将该上下游片段连接起来；2)将连接好的phop上下游同源臂插入敲除载体，构建phop基因敲除载体；3)将构建的phop基因敲除载体电转化至芽胞杆菌，通过常规的基因敲除方法，得到phop缺失的芽胞杆菌。通过在相关芽胞杆菌中敲除phop，构建phop缺失重组菌株，可以显著提高芽胞杆菌生物量。其中，在液体发酵条件下，枯草芽胞杆菌、地衣芽胞杆菌和解淀粉芽胞杆菌的生物量分别提高了1.33倍、1.64倍和1.54倍。由此表明，phop的缺失可显著提高芽胞杆菌生物量。
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公开(公告)号：CN105274026B
公开(公告)日：2019-01-29
申请号：CN201510729377.5
申请日：2015-10-30
申请人： 湖北大学
摘要： 本发明提供了一种胶质芽孢杆菌，其保藏号为CCTCC NO：M2015175，命名为胶质芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus)NGW1，解决了现有生物钾肥中微生物解钾效果、促生效果不稳定，定殖能力欠缺的问题。进一步将胶质芽孢杆菌NGW1发酵并与可以促进胶质芽孢杆菌NGW1发挥功效的麦麸载体进行复配得到解钾微生物制剂，施用于作物后增产效果稳定、菌种在土壤中存活能力强、土壤改良效果佳。进一步提供了提高作物产量的肥料施用方法，利用细菌以载体为营养物质进行繁殖来进一步分解矿物，从而促进土壤固结、钾素释放及作物对钾的吸收，该方法可减少化学钾肥的使用，节约资源，改良土壤，提升作物产量、品质。还提供了显著提高作物发芽率的方法，有利于作物育苗。
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