一种基于过渡态分子开关的CRISPR系统降低DNA芯片背景荧光的方法

    公开(公告)号:CN119351525A

    公开(公告)日:2025-01-24

    申请号:CN202410796097.5

    申请日:2024-06-19

    Applicant: 济南大学

    Abstract: 本专利公开了一种基于过渡态分子开关的CRISPR系统降低DNA芯片背景荧光的方法。该方法集成了微流控技术、过渡态纳米结构制备和CRISPR/Cas12a技术,降低了DNA芯片检测的荧光背景。该方法的主要特征包括:使用高度集成的过渡态分子开关简化核酸筛选步骤,产生的活性Taq DNA聚合酶用于保护信号分子,CRISPR/Cas12a识别双链DNA后同时进行信号的产生与背景的降低,降低了芯片上的荧光检测背景。过渡态分子开关和CRISPR/Cas12a的特异性识别避免了芯片上非特异性吸附的影响,增强了分析的特异性。同时,该方法具有简易可编程的特点。本发明已成功用于检测多种样本,为特异性低背景检测提供了可靠的平台。

    一种基于适配体的DNA三棱柱纳米探针用于细胞两阶段识别及动态成像生物标志物的方法

    公开(公告)号:CN114736905A

    公开(公告)日:2022-07-12

    申请号:CN202210465601.4

    申请日:2022-04-29

    Applicant: 济南大学

    Abstract: 本专利公开了一种基于适配体的DNA三棱柱纳米探针用于细胞两阶段识别及动态成像生物标志物的方法,涉及生物标志检测和成像领域。纳米探针是由DNA三棱柱主体,识别模块1,识别模块2和报告模块组成的核酸纳米结构,通过识别模块1中的适配体与目标生物标志物结合释放其互补链与报告模块中含有荧光的互补序列结合并释放被猝灭的荧光信号完成第一阶段对细胞膜上生物标志物的识别及成像,再通过细胞内吞作用进入细胞质,识别模块2的适配体识别细胞质生物标志物释放互补链并与报告模块的另一互补序列结合并释放另一荧光信号的方法实现了对细胞内外两种生物标志物的分阶段识别,检测及动态成像的目的。避免了传统方法的繁琐复杂的操作步骤和对细胞,组织产生的毒性,安全,有效的实现了对活细胞中不同部位的分阶段动态的检测和成像,对癌症的发现和诊断具有极大的应用价值。

    一种利用整合式装置检测食物中的鼠伤寒沙门氏菌的方法

    公开(公告)号:CN110220951B

    公开(公告)日:2020-12-11

    申请号:CN201910595394.2

    申请日:2019-07-03

    Applicant: 济南大学

    Abstract: 本专利公开了一种利用整合式装置检测食物中的鼠伤寒沙门氏菌的方法,涉及核酸检测领域。整合式装置是由磁板、纸电极芯片和粘贴膜构成的多层板状结构,通过滑动中间磁板的方式实现样本、纯化缓冲液和扩增试剂的连续引入,嵌入磁板中的FTA卡用来从细菌中提取核酸并作为后续等温反应的反应室。该方法利用这个整合式装置完成鼠伤寒沙门氏菌核酸提取、等温扩增和电化学检测的核酸检测步骤,避免了传统方法的繁琐复杂的操作步骤和对精密仪器的需求,快速、灵敏的实现了对蛋清、饮用水和牛奶样品中的鼠伤寒沙门氏菌的检测,具有快速、便捷、低成本、高效灵敏等分析性能,对食品安全安全分析具有潜在的应用价值。

    一种无酶标记DNA逻辑体系检测miRNA的方法

    公开(公告)号:CN107727621B

    公开(公告)日:2020-04-17

    申请号:CN201710910583.5

    申请日:2017-09-29

    Applicant: 济南大学

    Abstract: 本专利公开了一种无酶标记DNA逻辑体系检测miRNA的方法,涉及荧光检测miRNA领域。通过设计互补探针,无需加入相应的标记和特异性酶,达到目标物的特异性识别。利用原卟啉和G‑四链体结合后荧光增强的特性实现光信号增大的表征,达到检测目标物的目的。使用互补的自发进行链置换反应探针破坏上述结合,实现NOT门输出。本方法检测成本低、灵敏度高。

    一种比率型双光子荧光探针对硫化氢快速灵敏检测的应用

    公开(公告)号:CN110658172A

    公开(公告)日:2020-01-07

    申请号:CN201911177434.8

    申请日:2019-11-27

    Applicant: 济南大学

    Abstract: 本发明公开了一种对肿瘤细胞中的硫化氢快速响应以及高选择性检测的比率型双光子荧光探针的制备方法和应用。该探针基于分子内电荷转移的荧光染料4-羟基-1,8-萘二甲酰亚胺作为比率型双光子荧光团,引入硫化氢特异性识别的亲电子氰基单元(RO-CN)构成。利用硫化氢与氰酸酯基团反应形成硫代氨基甲酸酯,随后水解生成羟基染料,导致荧光发射信号比例性的变化。优势在于,探针的斯托克斯位移大,吸收双光子能力强,可以超快速,高选择,无损伤的对活细胞中硫化氢进行检测与成像。为临床用于检测活体内硫化氢异常表达相关的疾病诊断提供了潜在工具。

    一种高灵敏的无酶电化学免疫传感器的制备方法及应用

    公开(公告)号:CN106324058B

    公开(公告)日:2018-09-14

    申请号:CN201610643673.8

    申请日:2016-08-09

    Applicant: 济南大学

    Abstract: 本发明公开了一种高灵敏的无酶电化学免疫传感器的制备方法及应用研究。利用简单的水热法合成由氮掺杂的石墨烯及核壳结构的银和二氧化铈组成的复合纳米催化剂,其对过氧化氢具有良好的电催化还原能力,将其标记信号抗体,作为模拟酶信号标签,实现分析信号的放大;通过简单的水热法在修饰有金纳米粒子的氧化铟锡导电电极表面生长三维放射状的氧化锌,其可以负载大量的捕获抗体,进一步提高检测的灵敏度。本发明构建的免疫传感器表现出线性范围宽、检测限低、重现性好、稳定性高等优良性能,在临床分析肿瘤标志物方面具有良好的应用前景。

    一种合金纳米粒子修饰的电致发光细胞传感纸芯片的制备

    公开(公告)号:CN104865241B

    公开(公告)日:2017-12-12

    申请号:CN201510246434.4

    申请日:2015-05-15

    Applicant: 济南大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于合金纳米粒子修饰的电化学发光细胞传感纸芯片的制备方法。该传感纸芯片的制作方法包括以下步骤:制备Au@Pd修饰的纸芯片工作电极;制备多孔PtNi合金纳米材料;制备高性能量子点碳点(CDs)与PtNi@CDs发光标记复合物;利用电极修饰技术,将适配体和细胞以及发光标记复合物修饰到传感纸芯片的Au@Pd工作电极表面。一种基于多金属纳米粒子修饰的电化学发光细胞传感纸芯片的检测方法包括如下步骤:将修饰好的传感纸芯片连接到电化学工作站,配合化学发光仪,对待测液进行检测。本发明的电极特异性强;灵敏度高;完成一个检测过程时间短;成本低。电极检测肿瘤细胞的方法,操作简单快速,反应及结果均由仪器自动完成和记录。

    一种基于三螺旋DNA结构检测microRNA的方法

    公开(公告)号:CN107354208A

    公开(公告)日:2017-11-17

    申请号:CN201710564738.4

    申请日:2017-07-12

    Applicant: 济南大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于三螺旋DNA结构检测microRNA的方法,涉及荧光microRNA检测技术领域。通过三种探针之间在微流控纸芯片表面的杂交反应形成了一种新的三螺旋DNA结构,在内切酶和外切酶的作用下将三螺旋DNA结构剪切成两部分,一部分能循环参与反应中实现信号放大,另一部分和目标microRNA反应生成DNA-RNA双链,将形成的DNA-RNA双链转移到另一个修饰MnO2纳米片的纸芯片表面并加入DSN对microRNA检测。本方法较传统方法有更高的灵敏度、操作简单、耗时少,大大促进了一个简单,快速的检测系统的发展,有助于我们对microRNA进行定量分析以及生物体的生理病理机制的理解,并最终为疾病的诊断和治疗提供新的思路和理论基础。

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