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公开(公告)号：CN102747052B
公开(公告)日：2013-10-30
申请号：CN201210256898.X
申请日：2012-07-24
Applicant: 浙江大学宁波理工学院
Abstract: 本发明公开了一种细胞色素P450BM-3(L148S/Q229R)变体酶及其编码基因和用途，该变体酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，它在细胞色素P450BM-3(F87V/A74G/L188Q)变体酶的基础上增加了两个突变位点，即第148位的亮氨酸(L)突变为丝氨酸(S)，第229位的谷氨酰胺(Q)突变为精氨酸(R)。与父本相比较，本发明变体酶具有与底物更高的亲和力和热稳定性。
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公开(公告)号：CN103182255A
公开(公告)日：2013-07-03
申请号：CN201310088619.8
申请日：2013-03-20
Applicant: 浙江大学宁波理工学院
IPC: B01D71/34 , B01D67/00 , C08J7/12 , C08F212/08
Abstract: 本发明公开了一种聚苯乙烯/聚偏氟乙烯阴离子交换合金膜的制造方法，该方法先将聚偏氟乙烯溶解，再与苯乙烯、交联剂和引发剂组成的单体溶液均匀混合，随后加热共聚，再经过挤出、固化、造粒、干燥、粉碎等步骤，得到聚苯乙烯/聚偏氟乙烯合金粉末；对合金粉末实施氯甲基化反应，得到氯甲基化聚苯乙烯/聚偏氟乙烯粉末，然后制得氯甲基化聚苯乙烯/聚偏氟乙烯预制膜；最后将预制膜与胺化溶液反应；用本发明制备的聚苯乙烯/聚偏氟乙烯阴离子交换合金膜，具有高分子互穿网络结构，消除了传统异相阴离子交换膜中阴离子交换树脂粉与高分子粘结剂之间不相容的结构缺陷，膜电阻因此较低，膜的综合性能接近于均相阴离子交换膜。
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公开(公告)号：CN103031323A
公开(公告)日：2013-04-10
申请号：CN201110297904.1
申请日：2011-09-30
Applicant: 浙江大学宁波理工学院
Abstract: 本发明涉及一种谷氨酸脱羧酶热稳定变体G56P基因，其核苷酸序列在第56位有定点突变。研究发现，此位点突变后得到的变体基因编码的谷氨酸脱羧酶的热稳定性有所增强。本发明通过在编码野生GAD酶基因基础上进行定点突变，提高了其对应变体酶在在60℃和70℃下的热稳定性。随着酶热稳定性的提高，在工业生产过程中可以采用更高的操作温度，以提高反应速率、增加底物溶解度，有利于利用该酶通过生物转化生产GABA。
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公开(公告)号：CN103031322A
公开(公告)日：2013-04-10
申请号：CN201110297156.7
申请日：2011-09-30
Applicant: 浙江大学宁波理工学院
Abstract: 本发明涉及一种谷氨酸脱羧酶热稳定变体G311P基因，其核苷酸序列在第311位有定点突变。研究发现，此位点突变后得到的变体基因编码的谷氨酸脱羧酶的热稳定性有所增强。本发明通过在编码野生GAD酶基因基础上进行定点突变，提高了其对应变体酶在在60℃和70℃下的热稳定性。随着酶热稳定性的提高，在工业生产过程中可以采用更高的操作温度，以提高反应速率、增加底物溶解度，有利于利用该酶通过生物转化生产GABA。
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公开(公告)号：CN102911927A
公开(公告)日：2013-02-06
申请号：CN201210431917.8
申请日：2012-11-02
Applicant: 浙江大学宁波理工学院
IPC: C12N9/88 , C12N15/60 , C12N15/63 , C12N1/21 , C12P13/00 , C12N15/10 , C12N15/70 , C12R1/24 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种谷氨酸脱羧酶及其用途，该谷氨酸脱羧酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还公开了一种编码该谷氨酸脱羧酶的基因及含有该基因的表达单元、重组载体和转化子。本发明又公开该谷氨酸脱羧酶在生产γ-氨基丁酸中的应用。本发明谷氨酸脱羧酶的催化速率是野生型谷氨酸脱羧酶的2.5倍，能高效合成GABA，为利用谷氨酸脱羧酶进行γ-氨基丁酸的生物制备创造了更有利的条件。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101921791B
公开(公告)日：2012-05-09
申请号：CN201010268769.3
申请日：2010-09-01
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种谷氨酸脱羧酶的变体基因，其碱基序列如SEQ IDNO.1所示。本发明变体基因通过在编码野生GAD酶基因基础上进行定点突变，提高了GAD在中性pH值环境的催化活力，使对应变体酶在pH 6.0条件下催化谷氨酸生成GABA的达到野生型酶的4.8倍，拓宽了酶的最适pH值范围，为利用该酶通过生物转化生产GABA创造了条件。
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公开(公告)号：CN102080090A
公开(公告)日：2011-06-01
申请号：CN201010567447.9
申请日：2010-11-17
Applicant: 浙江大学宁波理工学院
Abstract: 本发明公开一种短乳杆菌谷氨酸脱羧酶基因的克隆、表达及应用。该基因来自短乳杆菌Lactobacillus brevis CGMCC NO.1306，全长1407bp，通过PCR从短乳杆菌基因组DNA中扩增获得。在该基因两端分别加上BamH I和EcoRI限制酶识别序列，与经相同限制酶消化的pET-28a(+)连接并转化大肠杆菌表达宿主菌BL21(DE3)，实现了在大肠杆菌中的重组表达，表达产物谷氨酸脱羧酶分子量为53538.6Da。该重组谷氨酸脱羧酶或表达该重组酶的工程菌可将L-谷氨酸或其盐脱羧转化为γ-氨基丁酸，具有转化效率高、产物纯度高，生产效率高的优点。
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公开(公告)号：CN101921791A
公开(公告)日：2010-12-22
申请号：CN201010268769.3
申请日：2010-09-01
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种谷氨酸脱羧酶的变体基因，其碱基序列如SEQ IDNO.1所示。本发明变体基因通过在编码野生GAD酶基因基础上进行定点突变，提高了GAD在中性pH值环境的催化活力，使对应变体酶在pH 6.0条件下催化谷氨酸生成GABA的达到野生型酶的4.8倍，拓宽了酶的最适pH值范围，为利用该酶通过生物转化生产GABA创造了条件。
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公开(公告)号：CN100439501C
公开(公告)日：2008-12-03
申请号：CN200610052585.7
申请日：2006-07-21
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种能催化吲哚生成靛蓝的P450BM-3Asp168His变体基因，利用饱和突变定向进化技术介导的随机突变，筛选获得，其碱基序列如序列表中SEQ ID NO.1所示，原P450BM-3(F87V/A74G/L188Q)基因中的第168位的天冬氨酸的密码子突变为组氨酸的密码子。所得到的变体基因表达的变体酶通过酶动力学曲线的测定，与现有技术相比较，催化效率显著提高，为生物合成染料靛蓝提供了更加具有应用价值的新酶，同时为染料靛蓝的生物生产提供了更加广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN1900285A
公开(公告)日：2007-01-24
申请号：CN200610052585.7
申请日：2006-07-21
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种能催化吲哚生成靛蓝的P450BM－3Asp168His变体基因，利用饱和突变定向进化技术介导的随机突变，筛选获得，其碱基序列如序列表中SEQ ID NO.1所示，原P450BM－3(F87V/A74G/L188Q)基因中的第168位的天冬氨酸的密码子突变为组氨酸的密码子。所得到的变体基因表达的变体酶通过酶动力学曲线的测定，与现有技术相比较，催化效率显著提高，为生物合成染料靛蓝提供了更加具有应用价值的新酶，同时为染料靛蓝的生物生产提供了更加广阔的应用前景。
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