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公开(公告)号：CN100587062C
公开(公告)日：2010-02-03
申请号：CN200810023305.9
申请日：2008-04-08
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N5/04
Abstract: 本发明涉及一种梨花粉管中分离和纯化线粒体的方法，属于生物技术领域。包括花粉的采集、培养，线粒体提取液的配制、清洗液的配制、Percoll梯度的配制以及花粉管线粒体分离过程，将培养好的花粉管用细胞筛过滤，添加线粒体提取液研磨，获得细胞质液体，振荡离心后，用Percoll梯度液纯化、清洗获得线粒体。采用本方法获得完整的具有活力的花粉管的线粒体，提高了线粒体分离纯化效率。这种从微量花粉管中分离纯化线粒体技术，适合于作为花粉管的生理生化及细胞遗传等实验材料。对于研究开发花粉管的快速生长、以及不亲和花粉管的生长抑制技术将具有重要意义。
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公开(公告)号：CN101589666A
公开(公告)日：2009-12-02
申请号：CN200910032895.6
申请日：2009-06-05
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明用丙二酸钠解除梨种子休眠促进发芽的方法，属于植物生产技术领域。促进杜梨种子萌发的主要步骤如下：1)种子的采集和清洗；2)清水浸种和种子消毒；3)化学药剂处理，清洗种子；4)播种。应用本发明的丙二酸钠处理的杜梨种子，播种后3天开始萌芽，一星期左右全部萌芽，发芽率高，可以到达85％以上。本发明首次发现杜梨种子不经低温层积处理而用丙二酸钠处理就能解除其种子休眠。应用本研究，能有效的缩短梨育苗时间和杂交育种周期，简化胚胎培养程序。
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公开(公告)号：CN100494405C
公开(公告)日：2009-06-03
申请号：CN200710020086.4
申请日：2007-02-12
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供了李品种自交不亲和性基因型(S基因型)的分子标记鉴定方法，属于生物技术领域。用标记引物扩增不同李品种材料DNA，可扩增出1300bp的扩增片段，标志着花粉SFB基因的存在；再使用Mbo I酶切扩增产物获得扩增产物的酶切谱带；根据不同单元型的花粉SFB基因间表现出不同的酶切谱带，确定各品种的自交不亲和基因型：相同谱带为同一S基因型，反之为不同S基因型。通过本发明提供的李花粉自交不亲和基因型分子标记方法用于不同李自交不亲和性基因型品种的鉴定、指导育种亲本的选择及其授粉品种的配置，可提高自交不亲和基因型的检测效率，缩短育种进程，节约生产成本。
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公开(公告)号：CN101398381A
公开(公告)日：2009-04-01
申请号：CN200810234984.4
申请日：2008-11-12
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供了一种梨花粉和花粉管微丝骨架的荧光标记方法，属于生物技术领域。包括采集成熟花粉，在培养基中分别培养花粉0.5h和2h，用新鲜的花粉培养基配制的200μmol/L MBS(顺丁烯酰胺苯甲酸－N－琥珀酸酯)预固定5－10min后分别用2％多聚甲醛和4％多聚甲醛各固定0.5h，洗涤花粉(管)，用终浓度为5μg/ml[含5％DMSO(二甲基亚砜)]的FITC－ph染色液(异硫氰酸荧光素标记的鬼笔环肽染色液)，在25℃避光下染色0.5－1h，微丝骨架被荧光标记。本发明具有操作简单、快速、标记效果好、对微丝骨架结构破坏小等特点，可用于蔷薇科植物花粉(管)的开发利用，实际应用价值高。
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公开(公告)号：CN101265461A
公开(公告)日：2008-09-17
申请号：CN200810023305.9
申请日：2008-04-08
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N5/04
Abstract: 本发明涉及一种梨花粉管中分离和纯化线粒体的方法，属于生物技术领域。包括花粉的采集、培养，线粒体提取液的配制、清洗液的配制、Percoll梯度的配制以及花粉管线粒体分离过程，将培养好的花粉管用细胞筛过滤，添加线粒体提取液研磨，获得细胞质液体，振荡离心后，用Percoll梯度液纯化、清洗获得线粒体。采用本方法获得完整的具有活力的花粉管的线粒体，提高了线粒体分离纯化效率。这种从微量花粉管中分离纯化线粒体技术，适合于作为花粉管的生理生化及细胞遗传等实验材料。对于研究开发花粉管的快速生长、以及不亲和花粉管的生长抑制技术将具有重要意义。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101012480A
公开(公告)日：2007-08-08
申请号：CN200710020086.4
申请日：2007-02-12
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供了李品种自交不亲和性基因型(S基因型)的分子标记鉴定方法，属于生物技术领域。用标记引物扩增不同李品种材料DNA，可扩增出1300bp的扩增片段，标志着花粉SFB基因的存在；再使用Mbo I酶切扩增产物获得扩增产物的酶切谱带；根据不同单元型的花粉SFB基因间表现出不同的酶切谱带，确定各品种的自交不亲和基因型：相同谱带为同一S基因型，反之为不同S基因型。通过本发明提供的李花粉自交不亲和基因型分子标记方法用于不同李自交不亲和性基因型品种的鉴定、指导育种亲本的选择及其授粉品种的配置，可提高自交不亲和基因型的检测效率，缩短育种进程，节约生产成本。
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公开(公告)号：CN1818057A
公开(公告)日：2006-08-16
申请号：CN200510134904.4
申请日：2005-12-30
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N5/04
Abstract: 本发明梨花粉和花粉管原生质体的提取方法，涉及植物体细胞壁的破除和原生质体获取的方法，是属于生物化学及食品科学领域；本发明的主要是依据植物花粉细胞壁的特性来获取完整的花粉或花粉管原生质体，而且保持原有的活力。采用两步法获取花粉及花粉管原生质体，步骤主要包括采集成熟花粉，在花粉培养基中培养3～3.5h后，进行酶解反应50min后、离心，就能获得完整的具有活力的花粉粒(管)的原生质体，而且该原生质体仍然保持原有活性，适合于作为花粉及花粉管的生理生化及细胞信号转导特性研究的实验材料。
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公开(公告)号：CN1799399A
公开(公告)日：2006-07-12
申请号：CN200610037844.9
申请日：2006-01-17
Applicant: 南京农业大学
IPC: A23L1/076
Abstract: 本发明梨花粉和花粉管原生质体的提取方法，涉及植物体细胞壁的破除和原生质体获取的方法，是属于生物化学及食品科学领域；本发明主要是依据植物花粉细胞壁的特性来获取完整的花粉或花粉管原生质体，而且保持原有的活力。利用柠檬酸去除花粉壁的方法，该方法是将干燥的花粉放入2－3mol/L柠檬酸液中，经过约30分钟左右的培养，可看到花粉的原生质体逐渐从萌芽口处出来，通过离心能够获得脱壁的花粉原生质体，该方法获得了原生质，能够保持原有的营养价值，没有污染，方法简单，成本低，非常适合于在食品科学领域的应用。
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公开(公告)号：CN116254365B
公开(公告)日：2024-05-31
申请号：CN202310283766.4
申请日：2023-03-22
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/29 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及梨果实硬度育种领域，尤其涉及与梨果实硬度紧密相关的基因、分子标记及其应用。本发明以155份梨自然群体为材料，采用200KAXIOMPyrSNP基因芯片进行分型，共获得29，269个高质量的SNPs，并用于全基因组关联分析(GWAS)。通过GWAS分析和候选基因的分子验证，发现了控制梨果实硬度的基因PbTIC55，并开发了12bpindel特异分子标记，分子标记的正向引物序列见SEQ ID NO.2，反向引物序列见SEQ ID NO.3。该分子标记可用于梨果实硬度的分子辅助育种选择，为培育稳定遗传的具有更好的商业品质的梨新品种提供新的分子标记。
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