公开(公告)号：CN108728490B

公开(公告)日：2021-03-26

申请号：CN201810534457.9

申请日：2018-05-29

Applicant: 苏州大学

Inventor： 贡成良 ,  曹广力 ,  李坤 ,  刘波 ,  胡小龙 ,  薛仁宇

IPC: C12N15/866 ,  C12N15/38 ,  C12N5/10 ,  C12N15/62 ,  A61K39/245 ,  A61P31/22

Abstract: 本发明涉及一种基于杆状病毒载体的鲤疱疹病毒II型DNA疫苗及其构建方法与应用。将鲤疱疹病毒II型ORF72、ORF66、ORF81和ORF82的1‑186、993‑1197、603‑783、85‑186 nt区域序列的密码子经优化后，化学合成ORF72‑ORF66‑ORF81‑ORF82融合序列，尔后，用启动子控制，克隆进杆状病毒转移载体pFSATBacTMDual构建重组质粒pFSATBacTMDual‑FA‑D4ORF，该质粒转化DH10/Bac感受态细胞后获Bacmid‑FA‑D4ORF，Bacmid‑FA‑D4ORF DNA转染家蚕培养细胞获BmNPV‑FA‑D4ORF，即基于杆状病毒载体的鲤疱疹病毒II型DNA疫苗。该DNA疫苗可以通过注射或口服或浸泡的方法对异育银鲫进行免疫，减少异育银鲫发生鳃出血病。

公开(公告)号：CN104789598B

公开(公告)日：2018-06-19

申请号：CN201510209184.7

申请日：2015-04-28

Applicant: 苏州大学

Inventor： 贡成良 ,  曹广力 ,  薛仁宇 ,  胡小龙 ,  郭睿

IPC: C12N15/88 ,  C12N15/46 ,  C12N7/01 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种表达红色荧光蛋白的重组家蚕质型多角体病毒的构建方法。具体而言，本发明的方法包括下列步骤：1）获得病毒基因组；2）设计并合成引物；3）获得病毒基因组的cDNA；4）对cDNA进行PCR扩增；5）将扩增产物进行酶切，获得重组质粒；6）将重组质粒pT‑S1至pT‑S9进行酶切，体外转录获得对应的RNA；7）构建带有红色荧光蛋白基因的重组质粒pT‑S10‑DsRed并获得S10‑DsRed RNA；以及8）将上述RNA等摩尔混合，包裹并转染宿主，进而获得病毒。利用本发明建立的方法可以在家蚕细胞中表达红色荧光蛋白，进而有可能获得人们所需的重组质型多角体病毒生物杀虫剂。

公开(公告)号：CN106834352A

公开(公告)日：2017-06-13

申请号：CN201710109641.4

申请日：2017-02-27

Applicant: 苏州大学

Inventor： 贡成良 ,  曹广力 ,  胡小龙 ,  薛仁宇 ,  刘波 ,  李坤

IPC: C12N15/866 ,  C12N7/04 ,  A61K39/245 ,  A61P31/22 ,  C12N15/62

Abstract: 本发明涉及抗原蛋白表达技术，具体涉及基于杆状病毒表达系统制备包裹鲤疱疹病毒II型抗原的多角体的方法，通过设计重组家蚕核型多角体病毒BmNPV‑VP3‑cyHV‑polh，ORF72、ORF66、ORF81和ORF82的1‑186、993‑1197、603‑783、85‑186区域序列与家蚕质型多角体病毒结构蛋白VP3基因1‑279区域的编码序列串联融合序列由杆状病毒P10启动子控制；家蚕质型多角体蛋白基因由杆状病毒的多角体蛋白基因启动子控制。用该病毒接种家蚕或家蚕培养细胞，重组病毒表达的鲤疱疹病毒II型的抗原蛋白可包裹进家蚕质型多角体内。形成的多角体可以通过简单的差速离心实现纯化；纯化的多角体在碱性条件下裂解后，可以通过离心使多角体蛋白沉淀，而鲤疱疹病毒II型抗原留存在上清中，从而可以快速、方便地获得鲤疱疹病毒II型抗原。

公开(公告)号：CN104789597A

公开(公告)日：2015-07-22

申请号：CN201510209183.2

申请日：2015-04-28

Applicant: 苏州大学

Inventor： 贡成良 ,  薛仁宇 ,  曹广力 ,  胡小龙 ,  郭睿

IPC: C12N15/88 ,  C12N15/46 ,  C12N7/00 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种家蚕质型多角体病毒的体外构建方法。具体而言，本发明的方法包括下列步骤：1）获得家蚕质型多角体病毒基因组；2）设计并合成引物；3）获得病毒基因组S1至S10片段的cDNA；4）对cDNA进行PCR扩增；5）将扩增产物进行酶切，然后克隆到质粒载体中，获得重组质粒；6）将重组质粒进行酶切、线性化后，经过体外转录，获得RNA；以及7）将RNA等摩尔混合，使用脂质体进行包裹并转染宿主，进而获得体外构建的家蚕质型多角体病毒。本发明的家蚕质型多角体病毒的体外构建方法不但对家蚕质型多角体病毒基因组各片段的功能研究有促进作用，也可以为重组质型多角体病毒生物杀虫剂的研发提供技术支持。

公开(公告)号：CN103500525B

公开(公告)日：2015-04-01

申请号：CN201310503410.3

申请日：2013-10-23

Applicant: 苏州大学

Inventor： 郑小坚 ,  朱越雄 ,  陆叶 ,  潘中华 ,  贡成良 ,  曹广力 ,  薛仁宇

IPC: G09B23/26

Abstract: 本发明公开了一种核糖体合成蛋白质模型教具,包括基座、嵌设在所述基座上表面的搁板、罩设在所述基座上面的第一盖体、罩设在所述第一盖体上方的第二盖体，沿所述搁板长度方向的中心线上均匀设置有第一连接体，搁板上设置有圆形管罩，所述圆形管罩罩住3个所述第一连接体，所述圆形管罩内设置有圆柱形的连接棒，连接棒底部设置有第二连接体，所述连接棒顶部设置有珠串。本发明结构简单、层次分明、拆装灵活、形象生动、生产工艺简单、成本低廉。

公开(公告)号：CN103426349A

公开(公告)日：2013-12-04

申请号：CN201310388644.8

申请日：2013-08-30

Applicant: 苏州大学

Inventor： 郑小坚 ,  朱越雄 ,  曹广力 ,  贡成良 ,  潘中华 ,  薛仁宇

IPC: G09B23/26

Abstract: 本发明公开了一种N型乙酰胆碱受体结构模型教具，包括底座、设置在所述底座上的5个圆柱形本体、套设在所述5个本体外的限位板，所述本体包括外壳、设置在所述外壳内的支架、穿设在所述支架上的4个空心管体、设置在所述管体内的螺旋丝，所述螺旋丝依次穿过4个空心管体，所述螺旋丝两端伸出所述空心管体顶部，所述螺旋丝的一端穿设有4个串珠。本发明直观简洁，拆卸组装灵活方便。

公开(公告)号：CN103409561A

公开(公告)日：2013-11-27

申请号：CN201310368890.7

申请日：2013-08-22

Applicant: 苏州大学

Inventor： 薛仁宇 ,  贡成良 ,  曹广力 ,  魏育红 ,  朱越雄 ,  朱敏 ,  刘波 ,  易俊陶

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明属于基因工程领域，具体涉及一种快速检测鱼Ⅱ型疱疹病毒的方法，通过设计特定引物，对样本DNA进行LAMP反应，检测产物中是否含有扩增产物，从而确定样本中是否带有鱼Ⅱ型疱疹病毒。本发明提供的检测方法操作简便，只需一个恒温装置；检测周期短；检测结果灵敏度、正确度高；检测成本低；不仅可以用于病死鱼的病毒检测，还可用于检疫，具有重要的实施价值。

公开(公告)号：CN103400528A

公开(公告)日：2013-11-20

申请号：CN201310334208.2

申请日：2013-08-02

Applicant: 苏州大学

Inventor： 郑小坚 ,  朱越雄 ,  贡成良 ,  曹广力 ,  薛仁宇 ,  潘中华

IPC: G09B23/28

Abstract: 本发明公开了一种胰岛素结构模型教具，其包括第一珠串、第二珠串、第三珠串，所述第二珠串、第三珠串通过连接部与所述第一珠串连接，所述第二珠串、第三珠串间设置有连接串。本发明结构简单且为拆装结构，不仅能形象生动的展示胰岛素的结构特征，而且可以加深使用者的记忆，有助于教学。

公开(公告)号：CN103310685A

公开(公告)日：2013-09-18

申请号：CN201310277008.8

申请日：2013-07-03

Applicant: 苏州大学

Inventor： 曹广力 ,  贡成良 ,  薛仁宇 ,  郑小坚 ,  朱越雄

IPC: G09B23/00

Abstract: 本发明公开了一种真核细胞染色体模式结构教具，其包括“X”形的盒体，一侧固定连接在所述本体上的盖体，设置在所述盒体内的线状的嵌体。本发明结构简单、能生动形象的表现染色体的模式结构。

公开(公告)号：CN102250935B

公开(公告)日：2013-09-04

申请号：CN201110142537.8

申请日：2011-05-30

Applicant: 苏州大学

Inventor： 贡成良 ,  曹广力 ,  薛仁宇 ,  郑小坚 ,  潘中华

IPC: C12N15/63 ,  C12N15/66 ,  C12N15/866 ,  A01K67/04 ,  A61K38/30 ,  A61P3/10

Abstract: 本发明公开了一种载有人胰岛素样生长因子-Ⅰ基因的重组转基因载体，所述重组转基因载体包括：外源基因人胰岛素样生长因子-Ⅰ、启动子、增强子元件；构建所述重组转基因载体的转座子为piggyBAC转座子；所述启动子为丝素重链蛋白启动子；所述重组转基因载体还包括：丝素重链蛋白启动子下游信号肽相应的DNA序列、家蚕丝素轻链fib-LpolyA信号位点的序列。应用该重组转基因载体制备得到生产IGF-Ⅰ的转基因家蚕，可以提高IGF-Ⅰ的表达水平，并且避免外源基因和杆状病毒的不安全性。