一种用于基因工程的骨干质粒载体及应用

    公开(公告)号:CN106755059A

    公开(公告)日:2017-05-31

    申请号:CN201610997402.2

    申请日:2016-11-08

    Abstract: 本发明公开了一种用于基因工程的骨干质粒载体,所述骨干质粒载体包含crRNA表达框和Cpf1核酸酶表达框,crRNA表达框和Cpf1核酸酶表达框位于同一双元载体中,crRNA表达框由水稻U3启动子,壮观霉素抗性基因和Poly‑T终止子依次构成;LbCpf1核酸酶表达框由ZmUBI启动子,水稻偏好密码子改造后的LbCpf1编码序列和35s终止子依次构成。本发明还提供了利用所述质粒载体构建的含有靶标序列的重组载体,及其在水稻基因打靶中的应用。本发明的骨干质粒载体能够用于进行有效地目标片段的基因打靶,获得带有目的基因中靶标片段上的随机插入和/或随机缺失的水稻植株。

    一种获取植物雄蕊表达启动子STA3的方法及相应启动子

    公开(公告)号:CN104357449B

    公开(公告)日:2017-02-15

    申请号:CN201410614236.4

    申请日:2014-11-04

    Abstract: 本发明提供了一种获取植物雄蕊表达启动子STA3的方法,所述方法包括如下步骤:制备正、反向引物;以水稻品种日本晴的DNA序列为模板,利用所述正向引物和所述反向引物,对日本晴的DNA序列中的一目的片段进行PCR扩增;对所述目的片段进行加A并连接PGEM-T-Easy载体;将目的片段转入到激活的感受态细胞中;挑取单克隆摇菌液提质粒;回收所述目的片段。本发明的分离方法能够从日本晴水稻中有效地分离出能够驱动雄蕊中的外源基因表达的启动子。本发明的方法简单易行,能够为人们提供现有技术中尚未发现的STA3启动子。该启动子STA3能够调控外源基因在植株的雄蕊中集中表达,具有显著的研究和商业价值。

    一种适于杂交水稻混播制种所用恢复系的培育方法

    公开(公告)号:CN106258933A

    公开(公告)日:2017-01-04

    申请号:CN201610635019.2

    申请日:2016-07-28

    CPC classification number: A01H1/02

    Abstract: 本发明公开了一种适于杂交水稻混播制种所用恢复系的培育方法,将含有除草剂敏感(致死)基因的恢复系与褐壳稃色基因的恢复系杂交,获得杂交种F1;种植杂交种F1后,获得分离群体F2,自F2代起,逐代喷施苯达松,筛选对除草剂敏感,同时具有褐壳稃色基因的单株;利用三系或两系不育系进行测交,种植测交F1和相应的敏感恢复系,观察F1的经济性状和父本的敏感程度;至F6代获得相对稳定的聚合有除草剂敏感(致死)基因与褐壳稃色基因的恢复系,用此恢复系与其他自选的普通恢复系杂交,通过回交育种和系谱法选育,将这两种基因同时导入,获得所需恢复系。本发明实现了杂交水稻混播制种,充分去除恢复系。

    一种杂交水稻小区用种的制种方法

    公开(公告)号:CN106258931A

    公开(公告)日:2017-01-04

    申请号:CN201610590378.0

    申请日:2016-07-15

    CPC classification number: A01H1/02

    Abstract: 本发明公开了一种杂交水稻小区用种的制种方法,包括如下步骤:将播始历期长的父本播2期,播始历期短的母本播3期,每期播种相差10天时间,以确保父母本花期能够相遇;将播始历期长的父本分2期进行小区移栽,每期栽2行,每行10株,两行父本间距18寸,株距5寸;待父本抽穗后再选同期抽穗的母本整枝剪颖后栽在2行父本中间,株行距5×6寸;抽穗期在小区周围用140cm长的竹杆支撑,竹秆插入泥土20cm,用隔离网将整个小区罩上,隔离账下沿接触水面,并将隔离网下口用回形针别好稻根上,同时标明父母本名称,留待下一步授粉;盛花期用竹杆在隔离帐的外围振动父本部分,抖落父本花粉于母本穗部,即可实现授粉。

    一种分离出的胚乳不表达启动子SAFES6及其应用

    公开(公告)号:CN106148346A

    公开(公告)日:2016-11-23

    申请号:CN201610560043.4

    申请日:2016-07-15

    Abstract: 本发明涉及一种分离出的胚乳不表达启动子SAFES6及其应用。具体地,本发明提供了能够在植物组织中而不在胚乳中转录异源核酸序列的启动子SAFES6及制备和使用该启动子的方法。本发明还涉及含有该启动子的表达盒、重组表达载体和获得相应转基因植物的方法。本发明所提供的水稻启动子SAFES6能够调控基因在植株中非胚乳部位集中表达,而在胚乳中不表达,本发明利用该启动子在不改变植物胚乳性状情况下改良植物生长特性,改善水稻的生长性能,同时降低了水稻的食用安全风险,进而可以获得理想的转基因植株,有助转基因水稻的商业推广。

    一种穗部颖壳白化的杂交水稻两系不育系的选育方法

    公开(公告)号:CN106035069A

    公开(公告)日:2016-10-26

    申请号:CN201610464247.8

    申请日:2016-06-21

    CPC classification number: A01H1/02 A01H1/04

    Abstract: 本发明公开了一种穗部颖壳白化的杂交水稻两系不育系的选育方法,属于杂交水稻的选育领域。本发明的选育方法以白穗稻为父本,以两系不育系水稻为母本,通过杂交、自交、回交等方式进行选育,获得了一种仅在穗部白化的杂交水稻两系不育系。本申请的发明人在进行水稻选育的研究过程中,意外获得了一种新的穗部颖壳白化的突变体,并且,申请人发现该穗部颖壳白化的突变体与目前所发现的现有白化突变体都有显著的不同。本发明利用该突变体进行了两系不育系的选育,本发明选育获得的不育系白化性状只在颖壳特异表达,着色均匀,不影响水稻的农艺性状,可大大减轻田间种子生产除杂去劣的工作量,高效鉴定纯度。

    改良高直链淀粉含量水稻胶稠度的方法

    公开(公告)号:CN105875400A

    公开(公告)日:2016-08-24

    申请号:CN201610278305.8

    申请日:2016-04-29

    CPC classification number: A01H1/02 C12Q1/6895 C12Q2600/13 C12Q2600/156

    Abstract: 本发明公开了一种改良高直链淀粉含量水稻胶稠度的方法。该方法以直链淀粉含量大于24%、胶稠度大于70mm,且携带Wxg3基因的水稻品系为父本,以直链淀粉含量大于24%、胶稠度小于40mm的水稻品系为母本,通过杂交、回交和分子标记辅助选择,获得胶稠度较母本水稻品系有显著延长的水稻品系。本发明通过分子标记辅助选择水稻Wxg3等位基因对高直链淀粉含量水稻硬胶稠度性状进行改良,可克服常规育种中表型选择难、周期长、效率低、结果可靠性差的缺点。培育成的水稻新品种与原水稻品种相比,胶稠度得到明显改良,其它诸如直链淀粉含量、生育期、农艺性状、产量、抗性和适应性均十分相似,它们为一对近等基因系,可以在原水稻推广地区直接应用。

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