一种对人iPSCs进行基因编辑制备神经干细胞的方法

    公开(公告)号:CN116555260A

    公开(公告)日:2023-08-08

    申请号:CN202310452767.7

    申请日:2023-04-24

    Abstract: 本发明提供了一种对人iPSCs进行基因编辑制备神经干细胞的方法、由该方法得到的神经干细胞以及其培养或者维持神经干性方法。通过敲除人iPSCs BCOR的MLLT3binding、ANK repeats、PCGF1‑interacting PUFD结构域编码序列(BCOR‑MAP)及PLSCR1基因,获得一种新型NSCs,命名为2K‑iNSCs。与传统方法相比,2K‑iNSCs诱导和维持不依赖添加小分子化合物或蛋白因子的NSCs培养基,仅在iPSCs培养基中即可持续传代并维持其神经干性。本发明还提供了一种用于敲除iPSCs的BCOR‑MAP、PLSCR1基因的sgRNA、质粒及其应用。

    用于治疗缺血性脑卒中的神经干细胞的制备方法及其应用

    公开(公告)号:CN116396936A

    公开(公告)日:2023-07-07

    申请号:CN202310607399.9

    申请日:2023-05-26

    Abstract: 本发明公开一种用于治疗缺血性脑卒中的神经干细胞的制备方法及其应用,涉及生物医药技术领域,该种用于治疗缺血性脑卒中的神经干细胞的制备方法包括S1、iPSC分化获得RONAs:使用神经外胚层细胞诱导NPC培养基培养iPSC分化以形成神经聚集体RONAs;S2、由RONAs制备神经球:将S1中形成的RONAs使用神经干细胞NSC培养基1制备神经球;S3、神经球扩增、成熟及制备NSC制剂:其通过采用本申请提供的一种治疗缺血性脑卒中的神经干细胞制备方法,通过对诱导多能干细胞实施定向诱导分化,获得神经干细胞,进一步使用此神经干细胞进行缺血性脑卒中的疾病治疗。

    将精原干细胞直接转分化为神经干细胞样细胞的方法

    公开(公告)号:CN116286646A

    公开(公告)日:2023-06-23

    申请号:CN202310326868.X

    申请日:2023-03-29

    Inventor: 吴际 方乾

    Abstract: 本发明提供了一种将精原干细胞(SSCs)直接转分化为神经干细胞样细胞(iNSCs)的方法。所述iNSCs具有增殖活性,可以在体外进行稳定的传代培养,并且具有向其他神经细胞如神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞分化的潜能。本发明的方法具有高效性,可以在相对短的周期内、在体外获得较多的iNSCs,并且可以获得高纯度的iNSCs,其中Nestin和Pax6双阳性率达到95%以上。

    用于分离贴壁细胞的无酶解离液及其制备方法

    公开(公告)号:CN113088486B

    公开(公告)日:2023-06-16

    申请号:CN202110233559.9

    申请日:2021-03-03

    Inventor: 彭特 邓智敏 江涛

    Abstract: 本发明公开了用于分离贴壁细胞的无酶解离液及其制备方法,用于分离贴壁细胞的无酶解离液,包括以下浓度的组分:磷酸氢二钾100~200mg/L、氯化钾200~300mg/L、氯化钠7000~9000mg/L、七水磷酸氢二钠1500~2000mg/L、精氨酸17000~70000mg/L、天冬氨酸钠盐15000~50000mg/L和赖氨酸29000~140000mg/L。本技术方案提出的一种用于分离贴壁细胞的无酶解离液及其制备方法,将天冬氨酸钠盐、赖氨酸和精氨酸进行复配,有利于增强无酶解离液的解离能力,缩短解离时间,且解离后的细胞损伤小,残留物质安全无毒性,以克服现有技术中的不足之处。

    一种神经干细胞外泌体的制备方法及其在治疗脊髓损伤疾病中的应用

    公开(公告)号:CN116144597A

    公开(公告)日:2023-05-23

    申请号:CN202310220849.9

    申请日:2023-03-09

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明公开了一种神经干细胞外泌体的制备方法及其在治疗脊髓损伤疾病中的应用,外泌体的制备方法:步骤一、神经干细胞的分离、扩增及鉴定;步骤二、神经干细胞外泌体的提取、鉴定及浓度测定;步骤三、神经干细胞外泌体对大鼠脊髓损伤治疗作用的评价,利用脊髓打击器构建大鼠脊柱第十胸椎水平的脊髓损伤模型,进行神经干细胞外泌体对大鼠脊髓损伤治疗作用的评价。神经干细胞外泌体能够在治疗脊髓损伤疾病中进行应用;有益效果:苏木精‑伊红染色可见外泌体治疗后脊髓组织病理形态有不同程度的改善;尼氏染色证实外泌体治疗后神经元结构及数目均有明显好转,证实神经干细胞外泌体治疗能够有效减轻脊髓损伤。

    基于3D培养的人鼻黏膜间充质干细胞批量诱导分化为神经干细胞的方法

    公开(公告)号:CN115975930A

    公开(公告)日:2023-04-18

    申请号:CN202310223188.5

    申请日:2023-03-09

    Inventor: 陈田 杨鑫 牛丕业

    Abstract: 本发明涉及了基于3D培养的人鼻黏膜间充质干细胞批量诱导分化为神经干细胞的方法,该方法包括以下步骤:(1)将人鼻息肉作为组织来源获得人鼻黏膜间充质干细胞;(2)将所述的人鼻黏膜间充质干细胞进行3D培养,批量诱导分化为神经干细胞。本发明由人鼻黏膜间充质干细胞向神经干细胞的诱导分化方法,并基于3D培养的方式实现批量生产。因而本发明为治疗帕金森病等因神经元缺失导致的神经退行性疾病提供了细胞制备方法。

    一种角膜缘干细胞的体外扩增方法

    公开(公告)号:CN112126625B

    公开(公告)日:2023-04-14

    申请号:CN202011059056.6

    申请日:2020-09-30

    Abstract: 本发明提供一种角膜缘干细胞的体外扩增方法,包括如下步骤:(1)将LSCs干细胞组织块剪碎,冲洗,并将90~95%质量的LSCs干细胞组织加入30~50倍体积消化液消化,冲洗,加入8~10倍体积LSCs干细胞培养基;(2)加入0.1~0.5倍体积组织保护剂,离心,弃上清;(3)采用Hank液冲洗,重悬,并与5~10%未消化的角膜缘干细胞组织混合种植至有孔培养板中培养,得到角膜缘干细胞;本发明可有效保护酶解分离过程的离散角膜缘干细胞的作用,保持细胞增殖活力,使在分离过程中保持细胞稳定的增殖活性,实现角膜缘干细胞的整体高效稳定的体外扩增培养。

    一种角膜缘干细胞培养基及培养方法

    公开(公告)号:CN112126626B

    公开(公告)日:2023-04-07

    申请号:CN202011064612.9

    申请日:2020-09-30

    Abstract: 本发明提供一种角膜缘干细胞培养基及培养方法,该培养基中,包括如下组分:8~10%胎牛血清,10~15ug/ml羟基积雪草苷,0.3~0.8ug/ml卵泡抑素相关蛋白,10~20mg/ml运铁蛋白,0.3~0.5mg/ml谷氨酸胺,2~3ml 100×青链霉素混合液,5~8ug/ml胰岛素,0.2~0.5ug/ml氢化可的松,10~15ng/ml霍乱毒素,3~5ng/ml血小板衍生因子,余量为DMEM/F12(1:1);本发明角膜缘干细胞基础培养基可更好地促进LSCs干细胞的生长,上调细胞活力,提高细胞增值活性且稳定性好,充分延缓扩增能力耗竭及抑制其分化,维持LSCs干细胞特性。

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