公开(公告)号：CN102296069B

公开(公告)日：2012-10-10

申请号：CN201110255463.9

申请日：2011-08-31

Applicant: 扬州大学

Inventor： 孙怀昌 ,  夏冰 ,  宋红芹 ,  陈阳 ,  张鑫宇 ,  夏晓莉

IPC: C12N15/113

Abstract: 本发明涉及的有效抑制不同毒株猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）复制的非翻译区特异人工微小RNA（miRNA）属于基因工程和生物制品研究领域，所述微小RNA序列如SEQ ID NO：1-4之一所示。本发明还公开了包括基于RNA聚合酶II的人工miRNA表达载体构建、miRRNAi设计、双链寡核苷酸合成与克隆、miRNA表达检测及其对不同毒株PRRSV复制的抑制作用。与针对其它PRRSV基因的siRNA相比，本发明筛选的人工miRNA针对病毒RNA基因组的非翻译区保守序列，既能抑制同源毒株复制，也能抑制异源毒株复制，既可用于抗PRRSV感染制剂开发，也可用于转基因猪抗病品系培育。

公开(公告)号：CN101921878A

公开(公告)日：2010-12-22

申请号：CN201010288475.7

申请日：2010-09-21

Applicant: 扬州大学

Inventor： 孙怀昌 ,  张鑫宇 ,  田瑞鹏 ,  夏晓莉

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明涉及一种非洲猪瘟病毒核酸扩增引物、检测方法和试剂盒。所说的引物对和特异性核酸探针选自SEQIDNO：1-12。其检测方法包括步骤：（a）利用PCR引物扩增待测样本中核酸；（b）将烷巯基标记的检测探针标记至纳米金颗粒上；（c）将生物素标记的捕捉探针和步骤（b）纳米金标记的检测探针与变性的PCR产物杂交；（d）将步骤（c）的杂交体系加入包被链亲素的酶标板，捕捉杂交复合物；（e）银染增强捕捉的纳米金；（f）终止银染增强反应，肉眼观察灰度判定结果。本发明具有检测敏感性高、检测特异性强以及检测成本低的特点，可有效排除PCR方法检测非洲猪瘟病毒出现的假阳性或假阴性，快速检测出非洲猪瘟病毒核酸。

公开(公告)号：CN101100678A

公开(公告)日：2008-01-09

申请号：CN200710023145.3

申请日：2007-06-04

Applicant: 扬州大学

Inventor： 孙怀昌 ,  王安平 ,  房浩霞 ,  高波 ,  张鑫宇

IPC: C12N15/861 ,  C12N15/12

Abstract: 一种重组禽腺联病毒载体介导的鸡输卵管生物反应器制备方法，属于基因工程和生物制药领域。包括鸡输卵管特异表达调控元件的改造、含鸡输卵管特异表达调控元件和外源基因转移载体的构建、重组禽腺联病毒的制备、产蛋鸡的重组病毒注射。与现有的同类技术相比，该发明不仅具有非手术、简单、实用等优点，而且目的基因的表达水平高、维持时间长、表达产物活性完全。表达在鸡蛋清中的重组蛋白达到可纯化水平，纯化产物可作为防治人、畜疾病的药物或疫苗。

公开(公告)号：CN1858234A

公开(公告)日：2006-11-08

申请号：CN200610038812.0

申请日：2006-03-14

Applicant: 扬州大学

Inventor： 孙怀昌 ,  仇华磊 ,  钱科 ,  张鑫宇

IPC: C12Q1/04

Abstract: 一种致奶牛乳房炎葡萄球菌培养液的配制方法及其用途，属于动物疫病诊断和防治技术领域。先将10g蛋白胨、5g酵母粉、10g丙酮酸钠、12g甘氨酸、5g氯化锂完全溶解于980ml水中，再用氢氧化钠溶液调pH至7.3，然后，于121℃下灭菌，冷却至50℃±10℃时加入无菌1％亚碲酸钾溶液10ml和7ml吐温80，4℃保存，制成的培养液可用于快速鉴别致奶牛乳房炎葡萄球菌和乳房炎葡萄球菌的药敏试验。