一种检测水体鸡粪污染的巢式PCR试剂盒及其检测方法

    公开(公告)号:CN104878106A

    公开(公告)日:2015-09-02

    申请号:CN201510300853.1

    申请日:2015-06-05

    Applicant: 南京大学

    CPC classification number: C12Q1/6848 C12Q2531/113 C12Q2549/119 C12Q2565/125

    Abstract: 本发明公开了一种检测水体鸡粪污染的巢式PCR试剂盒及其检测方法,属于水体污染检测领域。一种检测水体中鸡粪污染的巢式PCR试剂盒,包括两对巢式PCR引物、dNTP、PCR buffer、Taq酶、Mg2+溶液和ddH2O,该巢式PCR方法使用两轮PCR扩增,检测方法如下:提取水样DNA,以其为模板进行第一轮PCR扩增,引物为SCF、SCR,反应结束后,以第一轮PCR产物为模板进行第二轮PCR扩增,引物为NCF、NCR,结束后,琼脂糖凝胶电泳检测403bp条带存在表明水体收受到鸡粪污染。该方法通过巢式PCR扩增,大大增加了检测的灵敏度,可以检测到水中存在的微量鸡粪污染,并且具有良好的特异性,可直接应用于水体粪便污染检测及防治工作中。

    一种同时检测水中狗、猪、鸡粪便污染的PCR试剂盒及其检测方法

    公开(公告)号:CN104846113A

    公开(公告)日:2015-08-19

    申请号:CN201510305364.5

    申请日:2015-06-05

    Applicant: 南京大学

    CPC classification number: C12Q1/6876

    Abstract: 本发明公开了一种同时检测水中狗、猪、鸡粪便污染的PCR试剂盒及其检测方法,属于水体粪便污染检测领域。一种同时检测水中猪、狗、鸡粪便污染的试剂盒,包括引物、dNTP、PCR buffer、Mg2+溶液和ddH20,利用该试剂盒检测水体粪便污染方法如下:提取待测水样DNA,以其为DNA为模板,利用试剂盒中提供的引物、dNTP、PCR buffer、Taq酶、Mg2+溶液和ddH20进行PCR扩增,PCR产物通过琼脂糖凝胶电泳后在紫外灯下观察,若出现390bp、490bp、和783bp的条带,则分别对应指示水中存在狗、猪、鸡粪便污染。该试剂盒可准确检测到水中单独存在或随机组合存在的狗、猪、鸡粪便污染,最多可同时检测到以上三种粪便污染,在排查粪便污染源时,可在很大程度上节省检测时间和费用,具有较高的应用前景。

    水样中关键拟/抗雄激素干扰毒物快速鉴别方法

    公开(公告)号:CN103529145B9

    公开(公告)日:2015-05-13

    申请号:CN201310539205.2

    申请日:2013-11-04

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了一种水样中关键拟/抗雄激素干扰毒物快速鉴别方法。其主要包括以下步骤:水样通过固相萃取柱进行富集,萃取柱负压真空干燥;依次用有机溶剂洗脱萃取柱,将洗脱液浓缩,定容,一半用于拟/抗雄激素总毒性测试,并基于标准物质EC50与稀释倍数计算总毒性当量,另一半用于有毒样品的主要致毒物质鉴别;基于常见拟/抗雄激素活性毒物的质谱特征与毒性当量建立毒物质量平衡数据库,进而基于定性分析与定量分析的结果,进行毒性当量与毒性贡献率计算,确定主要致毒物质。本发明样品需求量少,试剂消耗少,成本低,步骤少,却能较快速的鉴别不同污染水平水体中的拟/抗雄激素毒物。

    一种固相萃取耦合固相微萃取的分析方法

    公开(公告)号:CN101782556B

    公开(公告)日:2013-10-16

    申请号:CN200910264231.2

    申请日:2009-12-31

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了一种固相萃取耦合固相微萃取的分析方法,属于分析方法领域。其步骤为:用滤膜过滤水样;活化SPE富集柱,而后对水样进行富集;洗脱SPE富集柱中富集的PBDEs,并收集洗脱液;将收集的洗脱液旋蒸浓缩至近干;将步骤洗脱物质全部转入萃取瓶,氮气吹干;将聚二甲基硅氧烷涂层的光纤放在GC进样口以260~300℃进行活化;在氮气吹干的萃取瓶中,加入甲醇和蒸馏水,超声混匀,形成待测水样,将活化好的光纤浸没在待测水样中萃取;将萃取后的光纤风干后放在进样口,热解析后进行GC-MS分析。本发明将固相萃取与固相微萃取耦合,适用于分析水中超痕量多溴联苯醚,且成本低、工作量小,对PBDEs进行分析的检测限在0.06-1.84pg/L之间。

    一种废水在线生物监测方法和装置

    公开(公告)号:CN102207485A

    公开(公告)日:2011-10-05

    申请号:CN201110069399.5

    申请日:2011-03-22

    Abstract: 本发明公开了一种废水在线生物监测方法和装置,属于废水在线监测领域。本发明装置由循环泵(3)、储液室(2)、流通室(1)、感应电极(4)和万用表(5)组成,循环泵放置在储液室远离流通室的侧面底部,通过塑料管与流通室相接,流通室侧壁与储液室侧面等高处相连,实现全程的流动暴露。流通室内侧放置两对带螺母的铜电极,其中一对作为电信号输入端,另一对电极与万用表相连组成电信号输出端。受试生物大型蚤游动将影响流通室内电场的分布,具体表现为输出电流或电压的变化。本发明可以直观反映所排放水质是否安全;同时将会给环保监测部门污染事故监测、纠纷仲裁监测提供“电子眼睛”。本发明装置结构简单,可移动性强,室内外均可使用。

    一种酚类化合物的同步净化提取方法

    公开(公告)号:CN101221102B

    公开(公告)日:2010-08-04

    申请号:CN200810019214.8

    申请日:2008-01-16

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了一种酚类化合物的同步净化提取方法,属于化合物分析的前处理领域。其步骤为:水样过滤后,加入表面活性剂,混匀后,再加入硫酸钠,水浴超声后再将上述水样离心;表面活性剂相与水相分离并漂浮在上层,除去水后用丙酮冲洗瓶壁,使表面活性剂汇集到瓶底,然后加入甲醇稀释;收集中水相,重复上述过程,将提取液合并后定容,待测。本发明具有操作简单、低成本、低毒性的优点,克服了液液萃取、索氏提取、超声提取等经典技术有机溶剂消耗多、耗时长的不足,且避免了加速溶剂提取法、超临界流体萃取、亚临界流体萃取等成本高、推广难的问题。其加标回收率在70%以上,检测最低限为0.34ng/mL,在常规检测范围内均为线性变化(0.6-1000ng/mL)。

    环境介质有机提取物同步纯化并逐级分离的方法

    公开(公告)号:CN101706484A

    公开(公告)日:2010-05-12

    申请号:CN200910232273.8

    申请日:2009-12-10

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了环境介质有机提取物同步纯化并逐级分离的方法,属于环境分析领域。其步骤为:水样通过滤膜的悬浮物保存,将固体样品冷冻干燥后研磨或粉碎并过筛,得到固相样品;过滤后的水样进行富集,萃取完毕后,真空干燥,有机溶剂洗脱固相萃取柱,洗脱液浓缩;过筛后的非生物样品的固相样品进行索氏提取,提取液浓缩定容;生物样品,用有机提取物先富集,再利用GPC除大分子有机物及色素,最后富集;取弗罗里硅土干燥,将步骤(2)浓缩得到的样品溶液加入弗罗里硅土柱分离,有机溶剂连续洗脱,将流出液收集并浓缩,分别用于化学分析与毒性测试。本发明采用原理相同的提取、纯化方法应用于不同的环境介质,能有效的进行混合体系有机提取物浓度及毒性的比照。

    一种改进的固相微萃取方法

    公开(公告)号:CN100348289C

    公开(公告)日:2007-11-14

    申请号:CN200510095733.9

    申请日:2005-11-18

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明及一种应用于有机物分析的改进的固相微萃取方法。本方法包括以下步骤:将PDMS纤维置于待测溶液A中2h以上;配制由极性溶剂和非极性溶剂组成的溶液B;将吸附后的PDMS纤维从A溶液中取出,晾干后置于溶液B中解吸1h以上;用氮气将溶液B吹脱定容后进行GC-ECD分析。本发明提供了一种测定水体中有机氯农药的经济、简单、有效的固相微萃取方法,省却了传统方法中把纤维插入GC进行热解析的步骤,方法简单易操作,适应于大规模样品的检测。传统的方法成本需要50美元,而本方法的成本不到10元人民币。本发明检测限可达0.5-45ng/l,回收率达到80-103%,且可检测的有机氯农药的种类广。

    一种基于作用模式的人类发育毒性预测的方法

    公开(公告)号:CN113409899B

    公开(公告)日:2024-02-09

    申请号:CN202110677549.4

    申请日:2021-06-18

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于作用模式的人类发育毒性预测的方法,属于化学品的人类发育毒性虚拟筛选与活性预测领域。包括构建化合物活性数据集,基于人类发育毒性作用模式,选取了有害结局路径,收集了有害结局路径信号通路上的研究事件及其活性数据;并基于所述数据集构建第一预测模型;然后利用若干种具有体内实验数据的化合物,以及利用所述第一预测模型对具有体内实验数据的化合物进行预测的预测结果,利用朴素贝叶斯算法训练得到第二预测模型;将待测化合物输入到所述第一预测模型中进行定性预测,并将定性预测结果输入所述第二预测模型,完成对化学品的人类发育毒性进行预测。本发明可以对潜在基于作用模式的人类发育毒性化学品进行高通量筛查。

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