一种建立昆虫细胞系的方法

    公开(公告)号:CN1673355A

    公开(公告)日:2005-09-28

    申请号:CN200410029730.0

    申请日:2004-03-25

    Abstract: 本发明涉及建立昆虫细胞系的方法,包括:将昆虫浸没在乙醇溶液中,用无菌蒸馏水清洗昆虫,吸干虫体表面;解剖昆虫,取出需要建立细胞系的完整昆虫组织或器官;分别用生理盐水和细胞培养液清洗昆虫组织或器官,放入无光照的细胞培养箱中培养;加入细胞培养液培养;并不断吸出和换入半量的细胞培养液,直至扩展并增殖的细胞充满培养瓶;把含有新增殖出的单个细胞,连同全部的细胞培养液吸出放入新培养瓶中,加入新的细胞培养液,而原含有组织块的培养瓶中再加入同吸出量同样多的新的细胞培养液,两个培养瓶放入培养箱中培养至细胞系建立初步成功。该方法将能在短期内快速、可重复地建立多种昆虫的细胞系,所需的昆虫细胞培养设备简单,可操作性强。

    高产杆状病毒的棉铃虫蛹卵巢细胞系及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN112695010B

    公开(公告)日:2023-01-10

    申请号:CN201911012868.2

    申请日:2019-10-23

    Abstract: 本发明提供了一种高产杆状病毒的棉铃虫蛹卵巢细胞系,该细胞系的名称为IOZCAS‑Ha‑8,其保藏号为CGMCC No.17690。本发明提供了所述高产杆状病毒的棉铃虫蛹卵巢细胞系的构建方法,所述方法包括以下步骤:步骤1)获取棉铃虫雌蛹卵巢组织;步骤2)培养卵巢组织,至增殖的细胞充满培养瓶,其中,所述组织紧贴在细胞培养瓶底;步骤3)取新增殖的单个细胞,继续培养至细胞传代,即得;整个过程都是在无菌条件下进行的。本发明提供的高产杆状病毒的棉铃虫蛹卵巢细胞系可以用来复制杆状病毒,用于杆状病毒或杆状病毒杀虫剂的规模化生产;该细胞系还可应用于构建杆状病毒表达载体系统,表达具有商业或科学价值的蛋白质。

    冬虫夏草菌菌种的分离方法及其应用

    公开(公告)号:CN112772294B

    公开(公告)日:2022-04-01

    申请号:CN202110005981.9

    申请日:2021-01-05

    Abstract: 本发明提供了冬虫夏草菌菌种的分离方法,包括:1)在无菌条件下培养冬虫夏草鲜草并收集弹射的冬虫夏草子囊孢子;2)将步骤1)收集的冬虫夏草子囊孢子在无菌条件下用无菌水洗涤后稀释得到子囊孢子稀释液;3)将适量步骤2)所述子囊孢子稀释液在水琼脂平板上涂布展开、培养并萌发形成菌丝团;4)挑取单个子囊孢子萌发形成的菌丝团转移至液体培养基继续培养,所述菌丝团在所述液体培养基中产生一定数量芽生孢子后,接种至新的液体培养基或者固体培养基扩大培养,得到冬虫夏草菌。本发明还提供了冬虫夏草的人工培植方法和液体培养基在分离培养冬虫夏草菌中的用途。本发明的冬虫夏草菌菌种分离的方法具有分离周期短、效率高等显著优点。

    冬虫夏草菌菌种的分离方法及其应用

    公开(公告)号:CN112772294A

    公开(公告)日:2021-05-11

    申请号:CN202110005981.9

    申请日:2021-01-05

    Abstract: 本发明提供了冬虫夏草菌菌种的分离方法,包括:1)在无菌条件下培养冬虫夏草鲜草并收集弹射的冬虫夏草子囊孢子;2)将步骤1)收集的冬虫夏草子囊孢子在无菌条件下用无菌水洗涤后稀释得到子囊孢子稀释液;3)将适量步骤2)所述子囊孢子稀释液在水琼脂平板上涂布展开、培养并萌发形成菌丝团;4)挑取单个子囊孢子萌发形成的菌丝团转移至液体培养基继续培养,所述菌丝团在所述液体培养基中产生一定数量芽生孢子后,接种至新的液体培养基或者固体培养基扩大培养,得到冬虫夏草菌。本发明还提供了冬虫夏草的人工培植方法和液体培养基在分离培养冬虫夏草菌中的用途。本发明的冬虫夏草菌菌种分离的方法具有分离周期短、效率高等显著优点。

    高产杆状病毒的东方粘虫蛹卵巢细胞系及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN112760277A

    公开(公告)日:2021-05-07

    申请号:CN201910999086.6

    申请日:2019-10-21

    Abstract: 本发明提供了一种高产杆状病毒的东方粘虫蛹卵巢细胞系,该细胞系的名称为IOZCAS‑Myse‑1,其保藏号为CGMCC No.17282。本发明提供了所述高产杆状病毒的东方粘虫蛹卵巢细胞系的构建方法,所述方法包括以下步骤:步骤1)获取东方粘虫卵巢组织;步骤2)培养东方粘虫卵巢组织,至增殖的细胞充满培养瓶,其中,所述组织紧贴在细胞培养瓶底;步骤3)取新增殖的单个细胞,继续培养至细胞传代,即得;整个过程都是在无菌条件下进行的。本发明提供的高产杆状病毒的东方粘虫蛹卵巢细胞系可以用来复制杆状病毒,用于杆状病毒或杆状病毒杀虫剂的规模化生产;该细胞系还可应用于使用构建杆状病毒表达载体系统,表达具有商业或科学价值的蛋白质。

    一种建立昆虫细胞系的方法

    公开(公告)号:CN108588003B

    公开(公告)日:2020-06-26

    申请号:CN201810390678.3

    申请日:2018-04-27

    Abstract: 本发明提供了一种建立昆虫细胞系的方法,所述方法包括以下步骤:1)在昆虫细胞培养液中培养昆虫组织,以获得分散的原代昆虫细胞;2)物理性低氧诱导或化学性低氧诱导步骤1)所获得的原代细胞;3)半量更换昆虫细胞培养液后,对步骤2)的原代细胞进行复氧,直至观察到细胞不断增殖布满整个瓶底;所述复氧条件为:在25‑28℃、复氧诱导10‑30天;4)传代培养步骤3)获得的细胞,获得能够连续传代的细胞,从而建立昆虫细胞系;整个过程都是在无菌条件下进行。与现有技术相比,本发明的方法显著提升了昆虫原代细胞建系成功率以及缩短了昆虫建系前所需的培养时间。

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