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公开(公告)号:CN101696453A
公开(公告)日:2010-04-21
申请号:CN200910073126.0
申请日:2009-11-02
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 检测牛病毒性腹泻病毒的方法逆转录环介导等温扩增反应试剂盒的制备及其使用方法,它涉及反应试剂盒的制备及其使用方法。它解决了现有检测牛病毒性腹泻病毒的方法存在成本昂贵,需要专业设备及专业人员参与检测且不适于现阶段中国畜牧业发展状况的问题。方法:首先设计引物,然后配制逆转录环介导等温扩增反应液,即完成。使用方法:取含牛病毒性腹泻病毒样品的RNA提取物,加入反应液,混合后进行逆转录环介导等温扩增反应,再离心检测;或加入10000×SYBR GREEN I,然后置于紫外灯下检测;或进行电泳检测;或采用Real-time PCR仪进行保温反应检测。本发明反应试剂盒的检测方便,无需昂贵仪器,降低成本。
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公开(公告)号:CN101302512A
公开(公告)日:2008-11-12
申请号:CN200810064840.9
申请日:2008-07-02
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 鉴别诊断口蹄疫的表位抗原的基因序列,它涉及了鉴别诊断口蹄疫的抗原的基因序列。本发明解决了现有的口蹄疫鉴别抗原会出现非特异性反应,造成检出假阳性的问题。本发明的鉴别诊断口蹄疫的表位抗原的基因序列长度分别为72bp、177bp、351bp、525bp和699bp。本发明的基因序列表达的蛋白克服了大分子量重组蛋白出现非特异性反应,造成检出假阳性的问题。
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公开(公告)号:CN1861796A
公开(公告)日:2006-11-15
申请号:CN200510009978.5
申请日:2005-05-13
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N15/70 , C12N15/85 , C12N15/21 , C12N15/866 , C12P21/02
Abstract: 本发明涉及制备用于在大肠杆菌和昆虫细胞中表达鸭α-干扰素基因的方法。包括编码鸭α-干扰素的基因的克隆,含鸭α-干扰素基因的原核表达载体和重组昆虫杆状病毒转染载体的构建,用所述含鸭α-干扰素基因的重组原核表达载体转化大肠杆菌和诱导表达,用所述含鸭α-干扰素基因的重组杆状病毒转染昆虫细胞及在昆虫细胞中的表达等。通过本方法制备的产品为研究鸭α-干扰素生物活性及其作用机理提供了基础,也可制备成抗病毒的药物。
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公开(公告)号:CN1817905A
公开(公告)日:2006-08-16
申请号:CN200610009803.9
申请日:2006-03-13
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明提供的是兔抗鸭IgY+IgY(ΔFc)(H+L)辣根过氧化物酶标记抗体及其制备方法。本发明辣根过氧化物酶标记兔抗鸭IgY+IgY(ΔFc)(H+L)抗体是利用盐析、层析等蛋白纯化技术和酶标记技术,在提纯鸭卵黄免疫球蛋白的基础上,免疫家兔制备并纯化兔抗鸭IgY+IgY(ΔFc)(H+L)抗体,再通过改良过碘酸钠法将其与辣根过氧化物酶结合,并采用盐析及Sephodex G200纯化,从而制备辣根过氧化物酶标记兔抗鸭IgY+IgY(ΔFc)(H+L)抗体。应用此酶标记抗体可以建立多种鸭类疫病检测技术,预防鸭类多种传染病。
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公开(公告)号:CN1648665A
公开(公告)日:2005-08-03
申请号:CN200410043811.6
申请日:2004-08-18
Applicant: 东北农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/531 , C12Q1/68 , C07K16/08 , C07K14/005
Abstract: 本发明提供的是一种检测鹅细小病毒抗体的重组原核表达蛋白抗原及其制备方法。本产品制备过程包括:(1)设计扩增GPV-VP3基因的特异性引物;(2)通过PCR扩增获得VP3基因片段;(3)对VP3基因进行克隆、测序鉴定;(4)将VP3基因定向亚克隆至pGEX-6p-1原核表达载体;(5)VP3基因在大肠杆菌的诱导表达;(6)VP3基因表达蛋白的亲合层析纯化。本产品可作为检测鹅细小病毒抗体的间接-ELISA及Dot-ELISA方法的检测抗原,也可作为预防鹅细小病毒感染的基因工程亚单位疫苗。
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公开(公告)号:CN117050191A
公开(公告)日:2023-11-14
申请号:CN202310815201.6
申请日:2023-07-04
Applicant: 东北农业大学
IPC: C07K19/00 , A61K39/155 , A61K39/245 , A61P31/16 , A61P31/22 , C12N15/62 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种具有抑制BPIV3以及BoHV‑1感染作用的抗病毒融合肽及其应用。所述的抗病毒融合肽是由TAT穿膜肽与牛Viperin(BoViperin)蛋白融合后得到。本发明证实在牛源细胞内过表达BoViperin蛋白可以抑制BPIV3和BoHV‑1复制;TAT穿膜肽介导BoViperin蛋白可转导进入牛源细胞和小鼠肺中,可以抑制BPIV3和BoHV‑1的复制,表明在细胞水平和动物水平上BoViperin蛋白可迅速建立抗病毒感染状态。本发明证实,TAT穿膜肽与BoViperin融合得到的抗病毒融合肽,具有制备简单、投递便捷等优势,可为开发高效、广谱牛抗病毒药物奠定基础。
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公开(公告)号:CN117024600A
公开(公告)日:2023-11-10
申请号:CN202310826724.0
申请日:2023-07-06
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了细胞膜穿透肽与牛SOCS3的融合肽及其在促进BPIV3增殖中的应用。所述的融合肽是由TAT穿膜肽与牛SOCS3融合后得到。本发明通过小鼠肺部感染模型和细胞试验证明TAT介导的SOCS3蛋白可以通过抑制STAT1和STAT3蛋白的磷酸化阻碍干扰素信号的传递,并引起Mx1抗病毒基因的表达下调,从而促进BPIV3的增殖。本发明为生物大分子进入细胞制备了跨膜递送系统,为递送治疗性药物提供了技术手段。此外,利用SOCS3能促进病毒增殖,协助病毒感染宿主细胞等特征为建立急性感染模型提供研究基础,使不易感的病毒及组织器官病变程度不易揭示的受感染动物表现出具有临床感染特征的病理学现象,有利于治疗性药物对受病毒感染宿主的转归和评价。
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公开(公告)号:CN114107230B
公开(公告)日:2023-08-11
申请号:CN202111446165.8
申请日:2021-11-29
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N7/01 , C12N15/38 , C12N15/85 , A61K39/265 , A61P31/22
Abstract: 本发明提供了一种牛疱疹病毒1型UL41缺失毒株及其获取方法,属于基因工程技术与生物制品制备技术领域。提供一种牛疱疹病毒1型UL41缺失毒株和提高BHV‑1毒株编辑效率。本发明提供了一种牛疱疹病毒(Bovine herpes virus type Ⅰ)1型UL41缺失毒株,所述牛疱疹病毒1型UL41缺失毒株是以通过敲除亲本病毒中UL41基因得到的毒株,本发明所构建的牛疱疹病毒1型缺失毒株在病毒生物学特性上与亲本毒株表现出一定的差异性,即缺失毒株的复制起始时间要早于亲本毒株约12小时,且相较于亲本毒株,缺失毒株对酸性环境和温度变化表现出更强的敏感性,而对碱性环境的敏感程度与亲本毒株相近。
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公开(公告)号:CN113462653B
公开(公告)日:2022-10-04
申请号:CN202110756919.3
申请日:2021-07-05
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/18 , G01N33/68 , G01N33/577 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种抗猪Gasdermin D蛋白单克隆抗体、分泌该单克隆抗体杂交瘤细胞株及其应用。本发明所述的一种抗猪Gasdermin D蛋白单克隆抗体,由保藏编号为CGMCC No.22321的杂交瘤细胞株分泌产生。实验证明,所述的单克隆抗体对猪Gasdermin D蛋白具有反应特异性,所述的单克隆抗体不仅能够检测猪GSDMD全蛋白,还能够检测活化切割后的猪GSDMD蛋白羧基端节段。本发明的提出对猪GSDMD生物学功能的研究具有重要意义。
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公开(公告)号:CN113462653A
公开(公告)日:2021-10-01
申请号:CN202110756919.3
申请日:2021-07-05
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/18 , G01N33/68 , G01N33/577 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种抗猪Gasdermin D蛋白单克隆抗体、分泌该单克隆抗体杂交瘤细胞株及其应用。本发明所述的一种抗猪Gasdermin D蛋白单克隆抗体,由保藏编号为CGMCC No.22321的杂交瘤细胞株分泌产生。实验证明,所述的单克隆抗体对猪Gasdermin D蛋白具有反应特异性,所述的单克隆抗体不仅能够检测猪GSDMD全蛋白,还能够检测活化切割后的猪GSDMD蛋白羧基端节段。本发明的提出对猪GSDMD生物学功能的研究具有重要意义。
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