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公开(公告)号：CN107815421A
公开(公告)日：2018-03-20
申请号：CN201711293931.5
申请日：2017-12-08
Applicant: 江苏国信协联能源有限公司 , 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种黑曲霉种子培养及其制备柠檬酸的方法，所述方法包括如下步骤：(1)取培养成熟的黑曲霉麸曲孢子，得到分散孢子悬液；(2)培养步骤(1)中的分散孢子悬液，得到发芽孢子；(3)发芽孢子重新分散，种子罐内培养，得到成熟种子液；(5)成熟种子液转至发酵罐内培养发酵，得到柠檬酸发酵液。本发明解决了孢子萌发过程中聚集的问题，提高孢子成球率，增加菌丝球数量，有效控制菌丝球的大小均一性，提高菌体的转化效率，发酵转化率提高，发酵周期缩短。
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公开(公告)号：CN104099253B
公开(公告)日：2016-07-06
申请号：CN201410329652.X
申请日：2014-07-11
Applicant: 江南大学 , 江苏国信协联能源有限公司
Abstract: 一种基于菌丝球分散技术的柠檬酸黑曲霉种子连续培养方法，包括以下步骤：（1）将黑曲霉孢子液接种至种子培养基，培养制备成熟的种子液；（2）成熟的种子液经过分散器处理，得到分散菌丝种子液；（3）将步骤（2）得到的部分分散菌丝种子液以5~15%接种量转接至发酵培养基发酵，当发酵培养基还原糖浓度低于0.5%时发酵结束；（4）将步骤（2）得到的部分分散菌丝种子液以5~15%接种量接种至种子培养基，培养制备得到下一级成熟的种子液，然后回到步骤（2），即实现黑曲霉种子连续培养。本发明提供的黑曲霉种子连续培养方法，能直接减少黑曲霉孢子繁琐的培养过程，同时可以有效缩短成熟种子培养时间，提高原料利用率。
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公开(公告)号：CN105669428A
公开(公告)日：2016-06-15
申请号：CN201610126650.X
申请日：2016-03-07
Applicant: 江苏国信协联能源有限公司 , 江南大学
IPC: C07C51/41 , C07C59/265
CPC classification number: C07C51/412 , C07C59/265
Abstract: 本发明公开了一种柠檬酸氢钙的生产方法，主要通过将部分柠檬酸溶液与三钙初步混合，另外部分柠檬酸溶液分段分时间加入的方法，使得柠檬酸氢钙反应的酸度维持在一个合适的水平，可以充分降低柠檬酸氢钙反应的过饱和度，从而能得到颗粒大且均匀的氢钙晶体，而且杂质不容易包埋。本发明产生的柠檬酸氢钙经过带滤机处理后水分和RCS都比较低，有效地缓解了酸解工段的处理压力，进而提高酸解液的纯度。
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公开(公告)号：CN104109697B
公开(公告)日：2016-06-15
申请号：CN201410321671.8
申请日：2014-07-08
Applicant: 江南大学 , 江苏国信协联能源有限公司
Abstract: 柠檬酸废水回流发酵生产柠檬酸的方法：（1）淀粉质原料与柠檬酸废水混合均匀，加入高温α-淀粉酶；（2）将混合液经两次喷射，经碘试合格得到液化混液；再将液化混液经过板框压滤得到液化清液；（3）将液化清液与液化混液混合，加入柠檬酸废水进行补水得到种子培养基，进行菌种的种子培养；（4）将液化清液与液化混液混合，加入柠檬酸废水进行补水得到发酵营养液，进行发酵培养；（5）发酵结束后经固液分离除去菌体，经氢钙法或色谱法提取得到柠檬酸，产生的废水回到步骤（1）和步骤（3）、（4），如此循环。本方法发酵稳定且与原工艺技术水平相当，节约了工艺用水和蒸汽用量，节省了污水处理成本，具有重要的环境效益、经济效益。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105586366A
公开(公告)日：2016-05-18
申请号：CN201610135591.2
申请日：2016-03-10
Applicant: 江南大学 , 江苏国信协联能源有限公司
Abstract: 本发明公开一种基于控制菌丝体结构改善柠檬酸发酵性能的方法，包括：将培养成熟的黑曲霉孢子配制成孢子悬液，接种至种子培养基进行种子培养；在种子培养过程中，提高搅拌转速扰动孢子萌发与菌丝缠绕过程，获得成熟种子液；将上述成熟种子液接种至发酵培养基进行发酵培养，结束发酵；所述提高搅拌速度扰动的工艺是在所述种子培养进行6~20h启动的。本发明可获得有利于柠檬酸合成的特定结构菌丝体形态，改善发酵性能，提高柠檬酸产量，同时可降低孢子使用量，降低生产成本，简单易行，具有重要的经济效益和广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN105543112A
公开(公告)日：2016-05-04
申请号：CN201610122783.X
申请日：2016-03-04
Applicant: 江苏国信协联能源有限公司 , 江南大学
Abstract: 本发明提供了一种黑曲霉种子培养方法，通过在培养过程中对产酸速率、耗葡萄糖速率或糖化酶活力中的监控来选择移种的时机；并具体公开了产酸速率、耗葡萄糖速率或糖化酶活力中的测定方法和披露了溶氧浓度对培养过程的影响，解决了现有培养方法中主要依靠观察黑曲霉菌球大小、形态来判断种子的生长状态的不足。本发明的方法培养的种子发酵结果标准差更小，批次间更稳定，发酵转化率提高，发酵周期明显缩短。
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公开(公告)号：CN103352007B
公开(公告)日：2016-03-23
申请号：CN201310225029.5
申请日：2013-06-05
Applicant: 江南大学 , 宜兴协联生物化学有限公司
Abstract: 本发明公开了一种分两阶段溶氧控制技术提高发酵生产柠檬酸产量的方法，属于发酵过程优化领域。在发酵的第一阶段（28-32h）控制溶氧在45-55%，在发酵的第二阶段（37-50h）控制溶氧在35-45%，用此两阶段溶氧控制工艺，柠檬酸产量得到显著提高，其糖酸转化率最高为99%，而对照实施例的糖酸转化率为86%。本发明所提供的两阶段溶氧控制发酵工艺简单、高效，有着重要的工业应用价值，同时对其它有机酸的发酵法生产就有一定的指导和启迪意义。
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公开(公告)号：CN104087624A
公开(公告)日：2014-10-08
申请号：CN201410329786.1
申请日：2014-07-11
Applicant: 江南大学 , 宜兴协联生物化学有限公司
Abstract: 一种黑曲霉连续发酵生产柠檬酸的方法，包括以下步骤：（1）黑曲霉经过逐级扩大培养，获得成熟的孢子；（2）孢子液接种至种子培养基，培养成为成熟的种子液；（3）成熟的种子液转接至发酵培养基F1；（4）发酵培养后，分割发酵液为两部分；其中一部分发酵液继续发酵完毕，获得柠檬酸；（5）分割出的另一部分发酵液经分散器分散处理，获得分散菌丝的发酵液；（6）将分散菌丝发酵液接入发酵培养基F2；发酵培养后，回到步骤（4），如此重复实现连续发酵。本发明显著降低生产成本与运行成本，显著缩短生产周期，提高生产效率；同时提高设备利用率，降低劳动强度，过程简便易操作，可以广泛应用于柠檬酸的生产。
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公开(公告)号：CN102586128B
公开(公告)日：2014-04-09
申请号：CN201210066444.6
申请日：2012-03-14
Applicant: 江南大学 , 宜兴协联生物化学有限公司
Abstract: 本发明公开了一种通过强化丙酮酸羧化途径促进α-酮戊二酸积累的方法，将来源于米根霉(Rhizopus oryzae)中编码丙酮酸羧化酶的基因RoPYC2过量表达于发酵法生产α-酮戊二酸的菌株Yarrowia lipolytica WSH-Z06中，获得了一株丙酮酸羧化酶活性提高的重组菌，其丙酮酸羧化酶活性提高了10.2倍(达到0.87U/mg protein)；以甘油为唯一碳源，发酵144h后，α-酮戊二酸产量达到47.2g/L，是出发菌株的1.3倍；丙酮酸产量降低到10.4g/L，是出发菌株的49.0％。本发明通过调控三羧酸循环的回补途径，成功实现了碳代谢流从丙酮酸节点流向α-酮戊二酸节点，在提高α-酮戊二酸产量的同时，减少了副产物-丙酮酸的生成。为今后利用代谢工程手段改造菌株促进目标产物过量积累提供了一定的借鉴意义。
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