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公开(公告)号：CN104846010A
公开(公告)日：2015-08-19
申请号：CN201510253826.3
申请日：2015-05-18
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明提供了一种删除转基因水稻标记基因的方法，属于植物基因工程领域。本发明利用CRISPR/Cas9系统介导的基因组定点编辑技术建立了一个在植株水平上高效率删除转基因水稻标记基因的方法。利用本发明的方法可以有效地删除整段标记基因，并且能够针对性地只删除标记基因的表达框，而不改变转基因水稻中其他成分的表达。因此利用本发明的方法可以高效率培育无筛选标记基因的转基因水稻，从而能完全消除人们对筛选标记基因的安全性疑虑。
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公开(公告)号：CN104762303A
公开(公告)日：2015-07-08
申请号：CN201510164460.2
申请日：2015-04-08
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , C12N5/10 , A01H5/00
Abstract: 本发明提供一种植物镉诱导表达启动子CdS1及其应用，所述植物镉诱导表达启动子CdS1能够驱动目的基因在镉诱导条件下表达。更具体而言，本发明的启动子包含SEQ ID No:1所示的DNA序列或其同源物、衍生物。在应用中，本发明的启动子可以与具有改善植物的耐镉或抗镉性状的基因结合使用，将本发明的启动子与耐镉或抗镉基因相连接导入植物中，并驱动耐镉或抗镉基因在植物的根、茎、叶或其他部位表达，可以提高植物的耐镉或抗镉性能。比如，如果将本发明的启动子与抑制植物镉吸收的基因相连接，诱导该基因在高镉环境下集中表达，可以减少植物对镉的吸收，进而降低食品中的镉含量。因此，从环境安全和食品安全两个角度来讲，本发明的启动子都具有极高的商业价值。
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公开(公告)号：CN104762302A
公开(公告)日：2015-07-08
申请号：CN201510164459.X
申请日：2015-04-08
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , A01H5/00 , C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种段植物基因序列。本发明从日本晴水稻中分离克隆和鉴定了一个镉(Cd)强烈诱导的水稻特异基因的启动子CdS2，并对获得的转基因水稻进行镉(Cd)处理，经过GUS化学染色发现，在处理后转基因植株在各个部位都有明显的染色。且通过RT-qPCR鉴定处理前后的Gus基因表达量分析发现，镉(Cd)处理后，转基因植株中的Gus基因表达量是处理前的887.9倍，达到组成型启动子ACTIN活性的4倍。该启动子能够用于通过其在水稻中的表达量来反应土壤中镉污染的强度，其操作简单、检出限低、微量灵敏且准确度高的特性，对从研究环境关系到改善生态环境，在可持续发展中发挥重要意义，并且可以积极地对形成污染的原理进行分析，进一步为它们避免与可控转化提供宝贵经验。
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公开(公告)号：CN104328124A
公开(公告)日：2015-02-04
申请号：CN201410614223.7
申请日：2014-11-04
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , C12N1/21 , A01H5/00
Abstract: 本发明提供一种能驱动或调节基因在植物雄蕊中表达的启动子，其包含下列中的至少一种：(a)SEQ ID NO1中所示的核苷酸序列；(b)SEQ ID NO2中所示的核苷酸序列；(c)在SEQ ID NO1中所示的核苷酸序列中添加、取代或缺失一个或多个核苷酸后所获得的核苷酸序列；(d)在SEQ ID NO2中所示的核苷酸序列中添加、取代或缺失一个或多个核苷酸后所获得的核苷酸序列；(e)与SEQ ID NO1中所示的核苷酸序列互补的核苷酸序列；(f)与SEQ ID NO2中所示的核苷酸序列互补的核苷酸序列；(g)与SEQ ID NO1具有至少90％同源性的核苷酸序列；或者(h)与SEQ ID NO2具有至少90％同源性的核苷酸序列。本发明的启动子有利于控制目的基因仅在雄蕊中特异表达。
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公开(公告)号：CN104073492A
公开(公告)日：2014-10-01
申请号：CN201410326191.0
申请日：2014-07-09
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , C12N5/10 , A01H5/00
Abstract: 本发明提供一种作物糊粉层特异表达启动子PosAL1及其应用。本发明还提供了含有该启动子的表达盒、作物表达载体、宿主菌和转化子。具体而言，本发明将上述启动子应用在作物基因工程中。本发明提供的启动子可以特异地驱动外源基因在作物颖果糊粉层中表达，从而可有效用于种子品质和萌发特性的基因工程改良。用于改善作物颖果糊粉层的性状。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104073490A
公开(公告)日：2014-10-01
申请号：CN201410320654.2
申请日：2014-07-07
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , C12N5/10 , A01H5/00
Abstract: 本发明提供一种水稻干旱胁迫诱导表达启动子PosDro3，该植物干旱胁迫诱导表达启动子PosDro3包含序列表SEQ ID No.1所示的核苷酸序列。本发明还提供了含有该启动子的表达盒、植物表达载体和转化子。具体而言，本发明将上述启动子应用在植物基因工程中。本发明提供的启动子可以在干旱胁迫下特异的启动基因在植物中表达，因此可以用于提高和改善植物在干旱胁迫下的生长特性和环境适应性，从而有效改良水稻农艺性状。
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公开(公告)号：CN104004782A
公开(公告)日：2014-08-27
申请号：CN201410209121.7
申请日：2014-05-16
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明涉及一种延长水稻生育期的育种方法，包含以下步骤：在水稻生育期决定基因Ehd3外显子区选取靶标片段并构建植物CRISPR/Cas9打靶重组载体，导入水稻细胞并再生成苗；利用载体中的表达框实现对水稻细胞中Ehd3外显子区DNA的剪切，从而引起水稻细胞的自我修复；通过对再生株系基因组目标片段的测序，获取携带两个等位Ehd3基因同时发生功能缺失突变的株系，经过表型鉴定，确认再生植株生育期的延长。实验表明，本方法可快速获得生育期延长的水稻材料。
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公开(公告)号：CN103993039A
公开(公告)日：2014-08-20
申请号：CN201410245505.4
申请日：2014-06-04
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明提供一种利用PMI(phosphomannose isomerase，磷酸甘露糖异构酶)筛选标记将外源基因导入闭颖授粉粳稻的方法。具体而言，本发明通过含有pCAMBIA1381-PMI载体的农杆菌菌株EHA105介导，以甘露糖为筛选剂，将外源基因导入到闭颖授粉的粳稻品种8m30中。通过PCR检测鉴定，表明外源基因已导入8m30中。该方法成功实现了闭颖授粉的粳稻品种的遗传转化，且无需使用抗生素或除草剂筛选，在加快性状改良过程同时，避免花粉外传导致的基因漂移，提高了环境友好程度。
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公开(公告)号：CN103993038A
公开(公告)日：2014-08-20
申请号：CN201410245313.3
申请日：2014-06-04
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明提供一种利用PMI(phosphomannose isomerase，磷酸甘露糖异构酶)筛选标记将外源基因导入闭颖授粉籼稻的方法。具体而言，本发明通过含有pCAMBIA1381-PMI载体的农杆菌菌株EHA105介导，以甘露糖为筛选剂，将外源基因导入到闭颖授粉的籼稻品种9m90中。导入结束后，通过PCR检测鉴定，证实外源基因已导入9m90中。该方法成功实现了闭颖授粉的籼稻品种的遗传转化，且无需使用抗生素或除草剂筛选，在加快性状改良过程同时，避免花粉外传导致的基因漂移，提高了环境友好程度。
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公开(公告)号：CN103981215A
公开(公告)日：2014-08-13
申请号：CN201410225911.4
申请日：2014-05-23
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明公开了一种用于基因工程的骨干质粒载体，所述骨干质粒载体中，向导RNA表达框和Cas9核酸酶表达框位于同一双元载体中，向导RNA表达框由水稻U6启动子，壮观霉素抗性基因、人工合成的sgRNA骨架序列和Poly-T终止子依次构成；Cas9核酸酶表达框由ZmUBI启动子，水稻偏好密码子改造后的Cas9编码序列和35s终止子依次构成。本发明还提供了利用所述质粒载体构建的含有靶标序列的重组载体，及其在水稻基因打靶中的应用。
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