公开(公告)号：CN102399750A

公开(公告)日：2012-04-04

申请号：CN201110151701.1

申请日：2011-06-08

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 李玉峰 ,  张长莹 ,  姜平

IPC: C12N5/20 ,  C07K16/12 ,  G01N33/577

Abstract: 本发明公开了重组MSG1蛋白单克隆抗体及检测猪嗜血支原体特异性抗体的阻断ELISA方法。分泌猪嗜血支原体重组MSG1蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株1A7，保藏号为CGMCC No.4860，保藏日为2011年5月13日。猪嗜血支原体重组MSG1蛋白的单克隆抗体，该单克隆抗体由保藏号为CGMCC No.4860的杂交瘤细胞株1A7分泌。该单克隆抗体与猪嗜血支原体MSG1重组蛋白和病原蛋白都具有良好的反应特异性。本发明将该单克隆抗体应用于检测猪嗜血支原体特异性抗体的阻断ELISA法，通过大量实验优化了检测条件，使该方法具备良好的重复性、敏感性和特异性。

公开(公告)号：CN1242065C

公开(公告)日：2006-02-15

申请号：CN200310112770.7

申请日：2003-12-26

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 姜平 ,  李玉峰

IPC: C12N15/861 ,  C12N7/08 ,  C12N15/09 ,  C12N15/33 ,  C12N15/85 ,  A61K39/235 ,  A61K48/00

Abstract: 本发明猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)重组腺病毒和疫苗属于高新生物技术领域。通过RT-PCR技术扩增PRRSV GP5全基因序列，并把该基因序列克隆入腺病毒载体系统的穿梭载体pShuttle-CMV中，与腺病毒载体系统的骨架载体pAdEasy-1共转化大肠杆菌BJ5183菌株获得重组质粒，重组质粒转染HEK293-A细胞获得了重组腺病毒并成功的进行了噬斑纯化，通过RT-PCR和间接免疫荧光技术证明构建成功表达了PRRSV GP5蛋白的重组腺病毒rAd-GP5。在该重组毒中可以使PRRSV的GP5蛋白表达提前和表达量提高，能更有效的刺激机体的免疫保护反应。这种重组腺病毒疫苗具有亚单位疫苗的安全性和弱毒疫苗的抗原增殖能力，能够刺激机体全方位的免疫应答，从而具有广泛的开发和应用前景。