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公开(公告)号:CN103276103B
公开(公告)日:2014-09-24
申请号:CN201310153789.X
申请日:2013-04-27
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种检测猪流行性腹泻病毒的RT-LAMP核酸试纸条试剂盒及应用。该试剂盒包含核苷酸序列如SEQ ID NO.1~6所示的引物组和核酸检测试纸条。该试剂盒的使用方法如下:首先配制RT-LAMP反应体系,包含AMV逆转录酶、1倍反应缓冲液、链置换DNA聚合酶、dNTP混合物、甜菜碱、MgSO4、FIP引物、BIP引物、LoopF引物、LoopB引物、F3引物、B3引物以及待测样品RNA;恒温反应所得产物用核酸检测试纸条检测后直接进行判读:阳性结果为出现两条红色条带,一条位于检测区内,另一条位于质控区内。该试剂盒操作简单、成本低廉,反应结果易于观察,特异性好,非常适用于出口检疫、食品卫生以及畜牧养殖场的现场检测,易于大范围推广应用。
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公开(公告)号:CN103695561A
公开(公告)日:2014-04-02
申请号:CN201310628630.9
申请日:2013-11-29
Applicant: 华南农业大学
CPC classification number: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12Q2531/119
Abstract: 本发明公开一种检测日本乙型脑炎病毒的RT-LAMP核酸试纸条试剂盒及应用。该试剂盒包含核苷酸序列如SEQ ID NO.1~6所示的引物组和核酸检测试纸条。该试剂盒的使用方法如下:配制RT-LAMP反应体系,进行恒温反应;恒温反应所得产物用核酸检测试纸条检测后直接进行判读:阳性结果为出现两条红色条带,一条位于检测区内,另一条位于质控区内。该试剂盒操作简单、成本低廉,反应结果易于观察,特异性好,非常适用于出口检疫、食品卫生以及畜牧养殖场的现场检测,易于大范围推广应用。
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公开(公告)号:CN103289986A
公开(公告)日:2013-09-11
申请号:CN201310153715.6
申请日:2013-04-27
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种牛布鲁氏菌重组菌株S19-Δbp26-BL及其制备方法与应用。本发明以牛布鲁氏菌S19基因组DNA为模板,得到bp26基因的上游同源臂,BLS基因、L7/L12基因和bp26基因的下游同源臂;将前述基因片段依次连接,得到片段Δbp26-BL;分别对pRE112和Δbp26-BL双酶切,连接,得到自杀性同源重组质粒;将该质粒导入S19-Δbp26菌株的感受态细胞中,在氯霉素的选择压力下,得到同源重组单交换子,再将同源重组单交换子涂布于选择培养基上培养,获得牛布鲁氏菌重组菌S19-Δbp26-BL。该菌株具有良好的遗传稳定性,生长特性和毒力大小好,可作为一种标记疫苗株用于临床。
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公开(公告)号:CN103276104A
公开(公告)日:2013-09-04
申请号:CN201310154212.0
申请日:2013-04-27
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的RT-LAMP核酸试纸条试剂盒及应用。该试剂盒包含核苷酸序列如SEQ ID NO.1~6所示的引物组和核酸检测试纸条。该试剂盒的使用方法如下:首先配制RT-LAMP反应体系,包含AMV逆转录酶、1倍反应缓冲液、链置换DNA聚合酶、dNTP混合物、甜菜碱、MgSO4、FIP引物、BIP引物、LoopF引物、LoopB引物、F3引物、B3引物以及待测样品RNA;恒温反应所得产物用核酸检测试纸条检测后直接进行判读:阳性结果为出现两条红色条带,一条位于检测区内,另一条位于质控区内。该试剂盒操作简单、成本低廉,反应结果易于观察,特异性好,非常适用于出口检疫、食品卫生以及畜牧养殖场的现场检测,易于大范围推广应用。
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公开(公告)号:CN116218909B
公开(公告)日:2024-08-09
申请号:CN202310104792.6
申请日:2023-02-13
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/866 , C12N5/10 , A61K39/12 , A61K39/245 , A61P31/22 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及表达IBRV‑gD和BVDV‑E2的重组杆状病毒表达系统、构建方法及应用,属于生物技术领域,本发明利用杆状病毒表达系统成功表达重组蛋白gD、rgD、E2和E2BT,并对重组蛋白进行免疫原性分析。结果表明,rgD+E2BT二联亚单位疫苗可以诱导小鼠产生高水平的体液和细胞免疫应答,而且抗原表位的引入,增强了小鼠的体液和细胞免疫应答水平。本研究可为我国IBR和BVD的新型基因工程疫苗的研制提供新策略。
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公开(公告)号:CN118286396A
公开(公告)日:2024-07-05
申请号:CN202410499509.9
申请日:2024-04-24
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明涉及生物医药技术领域,特别涉及一种TFEB蛋白及其编码基因在制备调控口蹄疫病毒复制产品中的应用。本发明将TFEB基因构建至pCAGGS‑flag‑N真核表达载体中获得TFEB‑flag质粒,该质粒转染进PK‑15细胞中成功表达TFEB蛋白。本发明发现过表达宿主TFEB基因,能显著降低口蹄疫病毒在PK‑15细胞中的复制水平,以TFEB为靶标的siRNA序列,通过靶向干扰TFEB基因,使得PK‑15细胞中FMDV的蛋白表达量和病毒滴度与对照组相比有所升高,表明TFEB蛋白具有抑制口蹄疫病毒复制的作用。
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公开(公告)号:CN118165988A
公开(公告)日:2024-06-11
申请号:CN202410422468.3
申请日:2024-04-09
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/867 , C12N15/66 , C12N7/01 , C12N5/10 , A61K31/713 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及一种shRNA,特别涉及一种抑制HK2基因表达的shRNA及在制备抑制FMDV复制产品中的应用。本发明以HK2作为靶点,成功构建了猪源shHK2慢病毒干扰重组表达载体,并将其包装进HEK‑293T细胞,且稳转进PK‑15细胞,进而成功构建PK‑15shHK2稳转细胞系,本发明进一步发现干扰HK2表达后,可下调HK2基因表达,显著降低FMDV感染PK‑15细胞后的病毒滴度以及病毒蛋白表达水平,表明HK2干扰慢病毒具有抑制FMDV复制的作用,可用于制备抗FMDV病毒感染的药物,用于抑制FMDV病毒的增殖。
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公开(公告)号:CN114277191B
公开(公告)日:2023-09-19
申请号:CN202111670783.0
申请日:2021-12-31
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12N15/11 , C12Q1/6844
Abstract: 本发明公开了一种检测非洲猪瘟病毒和猪瘟病毒的引物组合物及应用。所述引物组合物含有核苷酸序列如SEQ ID NO:1~4所示的引物;所述应用为核苷酸序列如SEQ ID NO:1~4所示的引物在制备检测非洲猪瘟和/或猪瘟的试剂盒中的应用。本发明提供了检测非洲猪瘟病毒和猪瘟病毒的引物,并建立了非洲猪瘟病毒、猪瘟病毒双重RAA琼脂糖凝胶电泳法的检测方法。通过使用本发明提供的引物对待测样本的基因组DNA和/或cDNA进行重组酶介导的等温扩增,再进行琼脂糖凝胶电泳检测,可快速、准确地检测出是否存在非洲猪瘟病毒和/或猪瘟病毒,具有操作简便、检测效率高等优点,对防控非洲猪瘟和猪瘟以及促进养猪业的发展具有重要的应用价值。
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公开(公告)号:CN110029116B
公开(公告)日:2022-09-13
申请号:CN201910185932.0
申请日:2019-03-12
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/40 , C07K14/18 , C12N15/866 , C12N7/01 , A61K39/187 , A61P31/14 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种分泌表达多抗原表位猪瘟病毒E2基因的重组病毒及制备方法与应用。本发明根据密码子的偏爱性,人工设计合成了含多个抗原表位的重组CSFV C株的免疫原性基因E2并构建了含有上述E2基因的重组杆状病毒,提高了E2基因在杆状病毒中表达水平和免疫原性。利用本发明的重组杆状病毒所表达rE2蛋白制备亚单位疫苗,免疫日猪后,可诱导机体产生特异性免疫反应,并免受CSFV石门株的攻击;同时所述亚单位疫苗免疫动物后,还可用于鉴别诊断区分疫苗免疫和野毒感染动物,具有较大的应用前景。
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公开(公告)号:CN110029116A
公开(公告)日:2019-07-19
申请号:CN201910185932.0
申请日:2019-03-12
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/40 , C07K14/18 , C12N15/866 , C12N7/01 , A61K39/187 , A61P31/14 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种分泌表达多抗原表位猪瘟病毒E2基因的重组病毒及制备方法与应用。本发明根据密码子的偏爱性,人工设计合成了含多个抗原表位的重组CSFV C株的免疫原性基因E2并构建了含有上述E2基因的重组杆状病毒,提高了E2基因在杆状病毒中表达水平和免疫原性。利用本发明的重组杆状病毒所表达rE2蛋白制备亚单位疫苗,免疫日猪后,可诱导机体产生特异性免疫反应,并免受CSFV石门株的攻击;同时所述亚单位疫苗免疫动物后,还可用于鉴别诊断区分疫苗免疫和野毒感染动物,具有较大的应用前景。
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