花生AhRRS22基因及其在烟草抗青枯病中的应用

    公开(公告)号:CN104498504A

    公开(公告)日:2015-04-08

    申请号:CN201410741527.X

    申请日:2014-12-09

    Abstract: 本发明涉及一种花生青枯病抗性相关基因AhRRS22及其超表达载体的构建及在烟草抗青枯病基因工程中的应用,属于植物基因工程技术领域。本发明的花生抗性基因AhRRS22基因含有如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列。通过构建CaMV 35S启动子驱动AhRRS22基因植物表达载体,转化农杆菌,通过叶盘法将其导入翠碧一号烟草上,对转基因烟草进行青枯菌的接种,进而对其进行抗性鉴定,结果证明提高了该转基因对烟草的抗青枯病性。表明该基因在植物抗青枯病基因工程中具有十分重要的应用价值。

    一种分离调控花生胚发育基因的方法

    公开(公告)号:CN104004753A

    公开(公告)日:2014-08-27

    申请号:CN201410202769.1

    申请日:2014-05-15

    Abstract: 本发明涉及一种分离调控花生胚发育基因的方法,属于功能基因组学领域,所述AhHsfa4A基因序列如SEQIDNO:1所示,将筛选得到受钙诱导引起花生早期胚细胞程序性死亡的密切相关重要基因AhHsfa4A,并通过改良的RACE技术从所构建的全组织全长文库得到了AhHsfa4A基因的全序列。本发明建立了一种高效筛选缺钙诱导的花生早期胚重要基因的方法(SSHaLL)并利用该方法筛选到一个引起花生早期胚细胞程序性死亡的重要基因AhHsfa4A并对其进行了表达鉴定。该发明为高效筛选花生胚发育的重要差异表达基因,从而进一步阐明花生胚发育的分子机理奠定了良好的基础。

    一种诱导转基因花生发状根生物反应器产白藜芦醇的方法

    公开(公告)号:CN105463016B

    公开(公告)日:2020-03-17

    申请号:CN201610025963.6

    申请日:2016-01-15

    Abstract: 本发明涉及一种诱导转基因花生发状根生物反应器产白藜芦醇的方法,属于生物技术领域。利用发根农杆菌介导将烟草根特异启动子NtR12驱动花生白藜芦醇合酶基因AhRESS载体pBI121‑NtR12‑AhRESS遗传转化花生,获得特异表达AhRESS的转基因花生发状根。建立了高产白藜芦醇的优化生产体系,花生发状根培养至第11天,经20mM的醋酸钠处理24h,发状根中白藜芦醇含量可提高0.8倍,是非转基因花生根系的5.34倍,含量达到148.62μg/g(FW),同时培养基中白藜芦醇为80.86μg/100mL,是花生本身根系白藜芦醇含量的7倍多。本发明为利用生物反应器培养花生发状根进而生产白藜芦醇奠定了基础。

    特异启动子NtR2驱动AhRESS在花生发状根系产白藜芦醇的方法

    公开(公告)号:CN105505990B

    公开(公告)日:2019-03-12

    申请号:CN201610025960.2

    申请日:2016-01-15

    Abstract: 本发明涉及特异启动子NtR2驱动AhRESS在花生发状根系产白藜芦醇的方法,属于植物基因工程领域。利用发根农杆菌介导将烟草根特异启动子NTR2驱动花生白藜芦醇合酶基因AhRESS载体pBI121‑NTR2‑AhRESS遗传转化花生,获得特异表达AhRESS的转基因花生发状根。利用有机溶剂浸提法提取转基因花生发状根中白藜芦醇,经高效液相色谱(HPLC)测定,其白藜芦醇含量最高为66.16μg/g(FW),是未转基因发状根中白藜芦醇含量的3倍。本发明为利用烟草根特异启动子驱动花生白藜芦醇合酶基因AhRESS在花生发状根中特异表达,进而生产白藜芦醇提供了良好的基础。

    NtRLK2基因在烟草抗青枯病中的应用

    公开(公告)号:CN106867979A

    公开(公告)日:2017-06-20

    申请号:CN201710029165.5

    申请日:2017-01-16

    Abstract: 本发明涉及烟草青枯病抗性相关LRR类受体蛋白激酶类基因NtRLK2的序列和功能上的应用,属于分子生物学技术领域,本发明通过基因芯片分析,获得了一个受青枯菌诱导表达上调2倍的LRR类受体蛋白激酶类基因NtRLK2部分片段,经RACE技术获得其全长cDNA序列,从烟草高抗青枯病品种系3中克隆了该基因并用于构建超表达和RNAi表达载体,转入烟草中感青枯病品种翠碧一号,接种鉴定表明该基因的RNAi干扰明显增强烟草植株对青枯菌的抗病性,初步预测该基因可能是内源抗病基因的互作基因,抑制了抗病基因的表达。这将为烟草青枯病抗病遗传育种奠定了基础。

    一种花生高油酸隐性突变系Ahfad2a-1植株的选育方法

    公开(公告)号:CN105519432A

    公开(公告)日:2016-04-27

    申请号:CN201610025964.0

    申请日:2016-01-15

    CPC classification number: A01H1/04 A01H1/02 A01H1/06 C12Q1/6895 C12Q2600/156

    Abstract: 本发明公开了一种花生高油酸隐性突变系Ahfad2a-1植株的选育方法,属于植物育种方法,(1)选择花生种子;(2)进行γ射线诱变处理,(3)将处理后的M0代种子种植于大田。(4)对诱变处理后代进行油酸含量的定向选择,连续5代正向选育,利用近红外无伤检测技术进行单粒检测,获得O/L高于3.0的株系进行鉴定。(5)提取M5代种子筛选出的油酸/亚油酸比值大于3.0的株系叶片DNA,以Ahfad2a基因特异引物进行PCR,对PCR产物进行测序分析,筛选Ahfad2a-1突变体。(6)用Ahfad2a-1突变体做父本,以高产、优质、抗逆性强、综合性状好的优良品种为母本进行杂交,获得高油酸高产优质花生品种。

    特异启动子NtR2驱动AhRESS在花生发状根系产白藜芦醇的方法

    公开(公告)号:CN105505990A

    公开(公告)日:2016-04-20

    申请号:CN201610025960.2

    申请日:2016-01-15

    CPC classification number: C12N15/8205 C12N15/8243

    Abstract: 本发明涉及特异启动子NtR2驱动AhRESS在花生发状根系产白藜芦醇的方法,属于植物基因工程领域。利用发根农杆菌介导将烟草根特异启动子NTR2驱动花生白藜芦醇合酶基因AhRESS载体pBI121-NTR2-AhRESS遗传转化花生,获得特异表达AhRESS的转基因花生发状根。利用有机溶剂浸提法提取转基因花生发状根中白藜芦醇,经高效液相色谱(HPLC)测定,其白藜芦醇含量最高为66.16μg/g(FW),是未转基因发状根中白藜芦醇含量的3倍。本发明为利用烟草根特异启动子驱动花生白藜芦醇合酶基因AhRESS在花生发状根中特异表达,进而生产白藜芦醇提供了良好的基础。

    一种诱导转基因花生发状根生物反应器产白藜芦醇的方法

    公开(公告)号:CN105463016A

    公开(公告)日:2016-04-06

    申请号:CN201610025963.6

    申请日:2016-01-15

    Abstract: 本发明涉及一种诱导转基因花生发状根生物反应器产白藜芦醇的方法,属于生物技术领域。利用发根农杆菌介导将烟草根特异启动子NtR12驱动花生白藜芦醇合酶基因AhRESS载体pBI121-NtR12-AhRESS遗传转化花生,获得特异表达AhRESS的转基因花生发状根。建立了高产白藜芦醇的优化生产体系,花生发状根培养至第11天,经20mM的醋酸钠处理24h,发状根中白藜芦醇含量可提高0.8倍,是非转基因花生根系的5.34倍,含量达到148.62μg/g(FW),同时培养基中白藜芦醇为80.86μg/100mL,是花生本身根系白藜芦醇含量的7倍多。本发明为利用生物反应器培养花生发状根进而生产白藜芦醇奠定了基础。

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