一种提高转移载体中IRES序列介导筛选基因表达效率的方法

    公开(公告)号:CN116875621A

    公开(公告)日:2023-10-13

    申请号:CN202310880571.8

    申请日:2023-07-18

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种提高转移载体中IRES序列介导筛选基因表达效率的方法,属于分子生物学技术领域,将转移载体转染靶细胞后,用病毒进行感作。本发明中利用伪狂犬病病毒的gE基因为插入位点,插入的外源基因为猪圆环病毒2型Cap基因或猪流感病毒HA1基因,外源基因下游连接IRES序列介导的EGFP筛选基因,将转移载体转染靶细胞后,用病毒进行感作,感作所用的病毒为伪狂犬病病毒,病毒感作后可提高筛选基因表达效率,避免IRES序列介导筛选基因表达信号弱甚至“假阴性”情况的发生,有利于转移载体的有效性判定,避免因转移载体无效而导致病毒重组失败情况的发生。

    一种用于传染性支气管炎病毒中和抗体检测的ELISA试剂盒及应用

    公开(公告)号:CN116298278A

    公开(公告)日:2023-06-23

    申请号:CN202310418909.8

    申请日:2023-04-18

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种用于传染性支气管炎病毒中和抗体检测的ELISA试剂盒及其应用,属于生物技术领域。所述试剂盒包括:由S1蛋白中和抗原表位融合蛋白包被的酶联反应板,所述融合蛋白包括传染性支气管炎病毒编码的S1蛋白中的四个中和抗原表位,其氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1‑4所示。本发明利用筛选鉴定的4个具有中和活性的抗原表位,将其进行串联融合表达出蛋白,作为检测抗原,建立一种简便、特异的中和抗体ELISA方法。该检测抗原对流行毒株具有通用性,能够在实际生产中快速检测鸡群血清样本中是否含有中和抗体,为准确判断鸡群免疫是否有效提供依据,为传染性支气管炎疫病的有效防控提供参考。

    一种逐级利用水体的立体养殖大鲵方法

    公开(公告)号:CN112772556A

    公开(公告)日:2021-05-11

    申请号:CN202011631637.2

    申请日:2020-12-31

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 一种逐级利用水体的立体养殖大鲵方法,大鲵养殖池分上层养殖池和下层养殖池。上层养殖池设有进水管和用于排水至下层养殖池的下水口,所述下水口位于下层养殖池的上方,下层养殖池在侧壁底部设有排水管。养殖用水的水质无污染、清澈透明。上层养殖池用于饲养稚鲵,下层养殖池用于饲养幼鲵。养殖用水通过进水管进入上层养殖池,经稚鲵养殖后的用水通过底部下水口直接进入下层养殖池,作为幼鲵养殖用水。幼鲵养殖后的用水经排水管排出。本发明可在保证大鲵产量的情况下,节约水资源,实现水资源的充分利用,降低养殖用水成本,提高大鲵养殖经济效益,有利于大鲵养殖产业的绿色、健康、可持续发展。

    一种基于吊养的青蟹膏蟹冬季暂养方法

    公开(公告)号:CN111771787A

    公开(公告)日:2020-10-16

    申请号:CN202010458896.3

    申请日:2020-05-27

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明涉及一种基于吊养的青蟹膏蟹冬季暂养方法,基于青蟹养殖池进行暂养,青蟹养殖池的底部离池壁3-6米挖设有环沟,环沟作为排泄物及饵料残余物聚集地;冬季暂养方法包括以下步骤:S1、挑选附肢健全、活力好的青蟹膏蟹;S2、采用绑扎带的第一端将单只青蟹膏蟹的两只螯足捆绑结实,绑扎带的第二端固定在青蟹养殖池的外围平台上;青蟹膏蟹沿青蟹养殖池四周分布的环沟摆放以进行暂养;当冬季降温时,青蟹膏蟹自行向环沟的深处迁移。本发明利用青蟹养殖池的环沟,环沟底部离水面最深,其水温随天气温度影响小;由于绑扎带只束缚螯足,降温时让青蟹膏蟹自行往环沟深处迁移,避免寒潮冻伤或冻死青蟹;在回捕时,只需将绑扎带回收,收捕方便。

    鱼类NKEF‑A重组蛋白对适应性体液免疫的活化效应及其应用

    公开(公告)号:CN104587463B

    公开(公告)日:2017-07-28

    申请号:CN201410830137.X

    申请日:2014-12-27

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种鱼类NKEF‑A重组蛋白对适应性体液免疫的活化效应及其应用,所述的应用为用于制备能够促进鱼类体液免疫能力的免疫增强剂,所述鱼类NKEF‑A重组蛋白的氨基酸序列为SEQID NO:1所示;本发明提供的NKEF‑A重组蛋白作为适应性体液免疫增强剂,其优点在于:(1)使用剂量小,效率高;以1:100(NKEF‑A蛋白:抗原)的NKEF‑A重组蛋白剂量即可发挥显著的免疫促进作用;(2)易于制备免疫混合液:NKEF‑A重组蛋白是可溶性蛋白,容易与抗原混合,克服了传统矿物油乳剂类制剂不易乳化抗原的缺点;(3)安全性高;与细菌毒素或化合物制剂不同,NKEF‑A是宿主自身的蛋白,不存在外源物质导入产生的潜在毒副作用。

    Prx蛋白在制备非Cys依赖性的过氧化氢酶中的应用

    公开(公告)号:CN104745546A

    公开(公告)日:2015-07-01

    申请号:CN201310751741.9

    申请日:2013-12-30

    Applicant: 浙江大学

    CPC classification number: C12N9/0065 C12Y111/01015

    Abstract: 本发明提供了Prx蛋白在制备非Cys依赖性的过氧化氢酶中的应用。本发明提供了Prx I分解H2O2的一种新的功能机制,该机制与Cys残基的氧化还原反应无关,且不需要其他蛋白或NADPH提供还原力。本发明发现了Prx I蛋白及其突变体蛋白在真核细胞(HEK293)和原核细胞(E.coli)中具有显著增强细胞抗H2O2氧化胁迫和重金属(Cd)胁迫的能力以及在动物(斑马鱼)中具有显著增强机体抵抗重金属(Cd)诱导的氧化胁迫和毒害损伤能力。该功能具有广泛的应用价值,如可应用于防止工程菌发酵生产中因氧化胁迫而导致的细胞生长抑制和死亡,提高产量;提高机体抵抗重金属污染等诱导的氧化胁迫毒害能力,保障机体健康。

    猪伪狂犬病毒基因分型探针引物组及分型试剂盒和分型方法

    公开(公告)号:CN118957149A

    公开(公告)日:2024-11-15

    申请号:CN202411044675.6

    申请日:2024-07-31

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明提供了猪伪狂犬病毒基因分型探针引物组及分型试剂盒和分型方法,属于基因检测技术领域。本发明提供了一套猪伪狂犬病毒基因分型探针引物组,包括一对通用引物和基因分型TaqMan探针。本发明所述基因分型探针引物组在稀释度(101copies/μL~106copies/μL)范围内线性关系良好,最低检测限度均为101copies/μL,具有良好的灵敏性;与其他病毒不存在交叉反应,特异性良好;组内和组间各稀释度的变异系数均小于3%,重复性良好,因此,本发明所述基因分型探针引物组能够稳定地鉴定PRV基因型。

    一种无毒Ⅱ型伪狂犬病毒毒株及其应用

    公开(公告)号:CN116024182B

    公开(公告)日:2024-04-05

    申请号:CN202310096073.4

    申请日:2023-01-18

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种无毒II型伪狂犬病毒毒株及其应用。本发明无毒II型伪狂犬病毒毒株由II型伪狂犬病毒野毒株的基因组中带有使RR1蛋白发生K759R突变的突变基因序列。本发明无毒II型伪狂犬病毒由新分离的II型伪狂犬病毒毒株PRV‑DX经过基因组突变,使UL39基因编码的蛋白RR1带有K759R点突变而获得,本发明无毒II型伪狂犬病毒致病力减弱,免疫原性强,用该无毒II型伪狂犬病毒制备活疫苗可对小鼠和猪等伪狂犬病毒易感动物提供有效免疫。

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