一种基于CRISPR/Cas12a系统检测沙门氏菌的生物传感器

    公开(公告)号:CN114441488A

    公开(公告)日:2022-05-06

    申请号:CN202111469520.3

    申请日:2021-12-03

    Applicant: 济南大学

    Abstract: 本发明属于传感器技术领域,提供了一种基于CRISPR/Cas12a系统检测沙门氏菌的生物传感器,包括:a)核苷酸序列如SEQ ID NO:1‑5所述的适配体Apt、互补链T、发夹H、模板探针TP、连接探针LP共5条oligo DNA,核苷酸序列如SEQ ID NO:6所示的crRNA,报告探针FQ,和b)CRISPR/Cas12a,T4连接酶,phi29 DNA聚合酶,Zn2+;所述模板探针TP的5’端磷酸化;所述发夹H为仅第23位碱基连接核糖;所述报告探针FQ的核苷酸序列为TTATT,其5’端和3’端分别连接报告基团和猝灭基团。该传感器具有操作简便,检测速度快,检测效率高,灵敏度高,检测限低,特异性高等优点,可以弥补沙门氏菌现有检测方法的缺陷与不足,实现对其快速,准确的定量检测。

    一种基于CRISPR-Cas系统的检测外泌体的荧光生物传感器

    公开(公告)号:CN113552103A

    公开(公告)日:2021-10-26

    申请号:CN202110818406.0

    申请日:2021-07-20

    Applicant: 济南大学

    Abstract: 本发明属于生物传感器技术领域,涉及一种基于CRISPR‑Cas系统的检测外泌体的荧光生物传感器。当目标物存在时,PTK‑7 Apt和CD63 Apt与其特异性结合,从而释放Trigger,而trigger与linker链结合,fuel链进一步与linker链结合,被置换下来的trigger链重新进入循环,从而触发HCR反应,极大提高了其检测的灵敏度;利用Cas12a的“附属切割”活性切割体系中的荧光报告基团,产生可定量的信号。该传感器的构建简单,具有操作简单、反应速度快、性能稳定等优势;检测原理的主要过程均是在均相中实现的,提高了反应速度,降低了操作的复杂程度,实现了目标物的快速,简单,灵敏的检测。适用于肿瘤外泌体的检测和生物传感器产业化的实际应用。

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