小麦抗白粉病基因Pm68特异性分子标记及其用途

    公开(公告)号:CN115747374A

    公开(公告)日:2023-03-07

    申请号:CN202211625611.6

    申请日:2022-12-16

    Applicant: 江苏大学

    Abstract: 本发明涉及一种小麦抗白粉病基因Pm68特异性分子标记及其用途,属于分子生物学和遗传育种科学技术领域。本发明所提供的分子标记记为Pm68‑M1,所述分子标记的扩增引物为SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示,所述分子标记的PCR扩增特异性产物大小为156 bp。本发明的分子标记Pm68‑M1具有稳定扩增的多态性条带、重复性好、分辨率高等优点,且在不含有Pm68基因的小麦材料中没有非特异性扩增产物,本发明公布的分子标记Pm68‑M1在小麦抗白粉病基因Pm68的转育中具有重要的实用价值。

    拟斯卑尔脱山羊草Pm6SS-1基因及其分子标记和应用

    公开(公告)号:CN110511940B

    公开(公告)日:2022-07-22

    申请号:CN201910732287.X

    申请日:2019-08-09

    Applicant: 江苏大学

    Abstract: 本发明涉及一种拟斯卑尔脱山羊草基因Pm6SS‑1及其分子标记和应用,属于基因工程领域;本发明所述的基因Pm6SS‑1,来自于拟斯卑尔脱山羊草,其编码区序列为SEQ ID NO.1,cDNA序列为SEQ ID NO.2,编码的氨基酸序列为SEQ ID NO.3;本发明通过实验验证了拟斯卑尔脱山羊草Pm6SS‑1基因及其编码的蛋白质在小麦抗白粉病育种中具有重要应用价值;本发明根据Pm6SS‑1基因的启动子序列(SEQ ID NO.4)开发了一个诊断性分子标记MBH2,通过实验证实MBH2可在小麦群体中有效追踪Pm6SS‑1基因,并能区分Pm6SS‑1基因和Pm21基因,在分子标记辅助育种中具有实用价值。

    一种镇痛活性多肽的筛选方法

    公开(公告)号:CN104975058B

    公开(公告)日:2019-04-02

    申请号:CN201510352228.1

    申请日:2015-06-24

    Applicant: 江苏大学

    Abstract: 本发明涉及一种具镇痛活性多肽的筛选方法,属于基因工程领域;具体筛选方法操作如下:首先根据ω‑MⅦA类knottin成员GsGUR、MdPOI的氨基酸序列,推导其编码基因序列,并优化GsGUR、MdPOI基因的密码子;合成优化的相关基因后,连接到原核表达载体,将得到的重组质粒分别导入大肠杆菌Origami(DE3)菌株,将得到的基因工程菌株分别接种于含氨苄青霉素的LB培养基,震荡培养,经IPTG诱导后,产生可溶性重组蛋白;分离纯化后,得到重组活性多肽GsGUR、MdPOI;并通过小鼠醋酸扭体法首次证实重组GsGUR、MdPOI具有镇痛活性,本发明拓展了镇痛多肽的来源,为镇痛多肽的筛选提供了新的思路和技术手段;有望从相关植物和昆虫中工业化提取天然的镇痛多肽,满足药物研发及临床需求。

    一种植物DNA的简便、快速提取方法

    公开(公告)号:CN107201363A

    公开(公告)日:2017-09-26

    申请号:CN201710605160.2

    申请日:2017-07-24

    Applicant: 江苏大学

    CPC classification number: C12N15/1003 C12Q1/6806

    Abstract: 本发明公开了一种植物DNA的简便、快速提取方法,属于分子生物学领域。该方法为:剪取少量叶片,经快速研磨至匀浆,加入提取液[20~50 mM Tris(三羟甲基氨基甲烷),13~25 mM EDTA(乙二胺四乙酸),pH 8.0],70~90℃加热10~15分钟,高速离心1分钟,即得到可直接用于PCR的DNA提取物。该方法与现有DNA提取方法相比,具有简便、快速、成本低、稳定性高、安全无污染、可实现高通量操作、适用性广等优点。本发明的植物DNA的简便提取方法,在大规模遗传作图、分子标记辅助育种、作物品种鉴定等过程中具有极高的适用性和实用性。

    一种镇痛活性多肽的筛选方法

    公开(公告)号:CN104975058A

    公开(公告)日:2015-10-14

    申请号:CN201510352228.1

    申请日:2015-06-24

    Applicant: 江苏大学

    Abstract: 本发明涉及一种具镇痛活性多肽的筛选方法,属于基因工程领域;具体筛选方法操作如下:首先根据ω-MⅦA类knottin成员GsGUR、MdPOI的氨基酸序列,推导其编码基因序列,并优化GsGUR、MdPOI基因的密码子;合成优化的相关基因后,连接到原核表达载体,将得到的重组质粒分别导入大肠杆菌Origami(DE3)菌株,将得到的基因工程菌株分别接种于含氨苄青霉素的LB培养基,震荡培养,经IPTG诱导后,产生可溶性重组蛋白;分离纯化后,得到重组活性多肽GsGUR、MdPOI;并通过小鼠醋酸扭体法首次证实重组GsGUR、MdPOI具有镇痛活性,本发明拓展了镇痛多肽的来源,为镇痛多肽的筛选提供了新的思路和技术手段;有望从相关植物和昆虫中工业化提取天然的镇痛多肽,满足药物研发及临床需求。

    一种逆流超声处理谷朊蛋白酶解的方法

    公开(公告)号:CN104774893A

    公开(公告)日:2015-07-15

    申请号:CN201510138570.1

    申请日:2015-03-27

    Applicant: 江苏大学

    Abstract: 本发明一种逆流超声处理谷朊蛋白酶解的方法,涉及生物工程领域。更具体地,涉及一种超声促进谷朊蛋白酶解制备活性肽的方法。此方法中采用在酶解过程中施加超声辅助处理,避免了超声预处理时产生的谷朊蛋白粉聚集和吸附问题,简化了生产工艺,降低了成本,同时通过超声有效地促进谷朊蛋白的酶解,提高的多肽产物的活性。

    一种基于EGFP的T载体的制备方法

    公开(公告)号:CN102409061A

    公开(公告)日:2012-04-11

    申请号:CN201110070698.0

    申请日:2011-03-23

    Applicant: 江苏大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于EGFP的T载体及制备方法,涉及基因工程领域。本发明制备的T载体,采用组成型强启动子介导增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的表达,外源DNA的插入可阻断EGFP的表达,使阳性菌落呈现白色,载体自连产生的假阳性菌落在日光下即可呈现绿色荧光。本发明设计的T载体应用于T-A克隆时,由于T-A克隆时不需要使用X-Gal和IPTG,本发明既可节约实验成本,又可避免X-Gal和IPTG失活或涂布不匀导致的假阳性。

    小伞山羊草抗白粉病基因PmAeu1及其分子标记和应用

    公开(公告)号:CN118834884A

    公开(公告)日:2024-10-25

    申请号:CN202411075569.4

    申请日:2024-08-07

    Applicant: 江苏大学

    Abstract: 本发明涉及一种来源于小伞山羊草的抗白粉病基因PmAeu1及其分子标记和应用,属于基因工程领域;本发明利用抗白粉病的小伞山羊草品系AE 1617和感白粉病的小伞山羊草品系AE 538构建作图群体,通过BSR‑Seq、精细遗传定位、第三代基因组测序以及转基因验证等方法,克隆到一个新的抗白粉病基因PmAeu1,本发明通过转基因小麦研究证实,PmAeu1基因能够显著提高小麦对白粉病的抗性,所述小伞山羊草的抗白粉病基因PmAeu1可应用于遗传改良小麦品种以提高小麦的白粉病抗性;本发明还针对PmAeu1基因开发了分子标记XAeuNLR1‑2,能用于特异性检测权利要求所述的基因PmAeu1,并应用于PmAeu1基因的分子标记辅助育种。

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