一种宿主米曲霉敲除系统及其构建方法与应用

    公开(公告)号:CN110747221A

    公开(公告)日:2020-02-04

    申请号:CN201911214673.6

    申请日:2019-12-02

    Abstract: 本发明涉及一种宿主米曲霉表达系统及其构建方法与应用。所述宿主米曲霉表达系统的构建方法,步骤如下:(i)将重组质粒pBluescript-hph-rfp的多克隆位点上通过酶切连接的方法构建上敲除同源臂;(ii)将活化后的曲霉菌丝加入到细胞壁裂解酶溶液中,制得感受态原生质体;然后加入含有敲除同源臂的重组质粒,制得转化原生质体;(iii)将转化原生质体进行筛选培养,选取转化子,制得宿主米曲霉表达系统。本发明首次将RFP红色荧光蛋白应用到米曲霉基因敲除的过程当中,可以快速有效的排除掉大量假阳性的转化子。

    一种宿主米曲霉敲除系统及其构建方法与应用

    公开(公告)号:CN110747221B

    公开(公告)日:2021-08-20

    申请号:CN201911214673.6

    申请日:2019-12-02

    Abstract: 本发明涉及一种宿主米曲霉表达系统及其构建方法与应用。所述宿主米曲霉表达系统的构建方法,步骤如下:(i)将重组质粒pBluescript‑hph‑rfp的多克隆位点上通过酶切连接的方法构建上敲除同源臂;(ii)将活化后的曲霉菌丝加入到细胞壁裂解酶溶液中,制得感受态原生质体;然后加入含有敲除同源臂的重组质粒,制得转化原生质体;(iii)将转化原生质体进行筛选培养,选取转化子,制得宿主米曲霉表达系统。本发明首次将RFP红色荧光蛋白应用到米曲霉基因敲除的过程当中,可以快速有效的排除掉大量假阳性的转化子。

    一株产漆酶的露湿漆斑菌及其应用

    公开(公告)号:CN111733087A

    公开(公告)日:2020-10-02

    申请号:CN202010827939.0

    申请日:2020-08-17

    Inventor: 王莹 楚杰

    Abstract: 本发明公开了一株产漆酶的露湿漆斑菌及其应用,所述露湿漆斑菌(Myrothecium roridum)菌株,命名为Mr-SWS1,该菌株已于2020年6月23日保存在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC),地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,保藏编号为CGMCC NO.20210;该菌株发酵液上清漆酶活性较高,能够与ABTS、愈创木酚等底物反应;通过发酵条件优化,使用水稻秸秆为唯一碳源进行发酵,经摇瓶方式所产漆酶活性可达64100U/L,并且该漆酶温度稳定性强,具有广泛的pH活性;本发明菌株对秸秆木质素有一定的降解能力,有利于农作物秸秆的可持续利用。

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