公开(公告)号：CN106566895B

公开(公告)日：2020-05-26

申请号：CN201610928347.1

申请日：2016-10-31

Applicant: 国家海洋局第三海洋研究所

Inventor： 陈建明 ,  刘国胜 ,  陈明谅

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种同时检测鲤科疱疹病毒Ι型、Ⅱ型和Ⅲ型的PCR引物、试剂盒及用途。所述引物为CyHV‑F和CyHV‑R，序列如SEQ ID NO:1和2所示。采用本发明的引物进行检测，不与其它病毒发生交叉反应，假阳性率低，可同时快速、准确、简便检测并区分三种类型鲤科疱疹病毒CyHV‑Ⅰ、CyHV‑Ⅱ和CyHV‑Ⅲ。为鲤科疱疹病毒病的早期诊断和预防防治提供分子生物学技术依据。具有广泛适用性和实用性。

公开(公告)号：CN103911394B

公开(公告)日：2018-06-19

申请号：CN201410093680.6

申请日：2014-03-14

Applicant: 国家海洋局第三海洋研究所

Inventor： 王蔚 ,  李芊 ,  杨慧 ,  陈卓 ,  胡彬 ,  陈建明

IPC: C12Q1/533 ,  C12P1/02

Abstract: 本发明公开了一种从海洋微生物发酵液中筛选1‑脱氧木酮糖‑5磷酸消旋酶抑制剂的方法，具体为，1）海洋微生物发酵液样品的制备：接种真菌，发酵，提取代谢产物，浓缩，洗脱；2）以创伤弧菌全基因组为模板，设计引物PCR扩增后，克隆入载体，转化大肠杆菌后诱导目的蛋白表达，目的蛋白经洗脱，透析，超滤，除盐得到His‑DXR；3）将菌悬液、刃天青溶液和1）所得进行反应后测定其荧光值并通过公式计数出抑制率，筛选出抑制率在80%以上的馏分；4）将步骤3）筛选的馏分与步骤2）所得His‑DXR进行反应，计算抑制率；筛选出抑制率≥50%的馏分。本方法简单准确，为发现以Dxr为靶点的新型抗菌药物或先导化合物奠定基础。

公开(公告)号：CN105475236A

公开(公告)日：2016-04-13

申请号：CN201510870822.X

申请日：2015-12-02

Applicant: 国家海洋局第三海洋研究所 ,  中国大洋矿产资源研究开发协会

Inventor： 陈建明 ,  俞江 ,  袁会芳 ,  杨丽容 ,  林鹭红 ,  陈明谅

IPC: A01K67/033 ,  C12N15/85

CPC classification number: A01K67/0339 ,  A01K2227/706 ,  C12N15/8509

Abstract: 本发明涉及一种筛选乙型肝炎病毒聚合酶活性抑制剂的果蝇模型及其构建方法。是由转基因果蝇的处女蝇与ey-Gal4雄蝇杂交得到子一代果蝇，子一代处女蝇与+/Cyo雄蝇杂交，后代挑取大眼、翘翅的处女蝇和雄蝇进行自交，后代即为筛选乙型肝炎病毒聚合酶活性抑制剂的果蝇模型。该模型眼睛中过量表达乙型肝炎病毒Polymerase结构域，从而导致果蝇的眼睛变得大；同时表型易于观察，喂药方式简便，药物筛选工作相对快捷，可以快速地进行大量的药物筛选。在该果蝇模型胚胎期开始饲喂待筛选药物，如果羽化出的果蝇不是大眼睛，则该药物是Polymerase聚合酶活性抑制剂；反之亦然。

公开(公告)号：CN105441579A

公开(公告)日：2016-03-30

申请号：CN201610048116.1

申请日：2016-01-25

Applicant: 国家海洋局第三海洋研究所

Inventor： 林镇跃 ,  陈明谅 ,  陈建明

IPC: C12Q1/68 ,  C12N15/11

CPC classification number: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6851 ,  C12Q2531/113 ,  C12Q2561/101 ,  C12Q2545/113 ,  C12Q2561/113

Abstract: 本发明公开了一种鉴定珊瑚共生光合藻类温度敏感型的引物、探针及鉴定方法。所述引物为SEQ ID NO:2-3，探针为SEQ ID NO:4；或引物和探针分别为SEQ ID NO:5-7；或引物和探针分别为SEQ ID NO:8-10；或引物和探针分别为SEQ ID NO:11-13；或引物和探针分别为SEQ ID NO:14-16；或引物和探针分别为SEQ ID NO:17-19；所述探针的5’端、3’端分别用FAM报导荧光染料和TAMRA淬灭基团标记。可进行珊瑚共生光合藻类温度敏感型的定性和定量鉴定。

公开(公告)号：CN103772086B

公开(公告)日：2015-04-29

申请号：CN201410011435.6

申请日：2014-01-10

Applicant: 国家海洋局第三海洋研究所 ,  中国大洋矿产资源研究开发协会

Inventor： 夏金梅 ,  许晨 ,  许建中 ,  廖云莉 ,  王伟毅 ,  林翌 ,  陈建明 ,  邵宗泽 ,  单大鹏

IPC: C07B63/00 ,  B01J20/281

Abstract: 本发明所述一种海洋微生物小分子代谢产物馏分制备的前处理工艺，包括以下步骤：1）用物理方法直接对发酵液进行细胞破壁处理；2）破壁处理后的发酵液用管式离心机进行固液分离；或是破壁处理后的发酵液按比例添加入硫酸铝溶液，一定温度下搅拌后，对发酵液进行絮凝；3）采用碟片式膜过滤器过滤经离心固液分离的发酵液或是经硫酸铝絮凝的发酵液；4）滤过的发酵液用大孔树脂层析柱吸附富集小分子代谢产物；5）待滤过液过完柱后，用纯净水过柱；6）用含水有机溶剂洗脱吸附于大孔树脂载体上的小分子代谢产物。实现海洋微生物发酵液的快速过滤与浓缩，小分子代谢产物富集基本不损失，洗脱获得的小分子代谢产物浓缩后可直接用于色谱分离制备。

公开(公告)号：CN103667258A

公开(公告)日：2014-03-26

申请号：CN201310648321.8

申请日：2013-12-06

Applicant: 国家海洋局第三海洋研究所

Inventor： 陈建明 ,  暨国彪 ,  郭辉革 ,  杨慧

IPC: C12N15/10

Abstract: 本发明公开了一种从钙化组织中提取RNA的方法。其方法步骤为：将钙化组织在液氮中进行研磨直到块状直径小于0.5cm的颗粒时,加入Trizol，再加液氮继续研磨成粉末状，直至直径约1mm或小于1mm为止；再将所得粉末转移到RNase-Free的小管中，加入Trizol消化裂解细胞；将上述小管离心后将上清转移到新的小管；上清加入氯仿处理后离心，将最上层的水相转移到另一新的小管，加入75%乙醇溶液，轻轻混匀沉淀核酸；然后转移到试剂盒的吸附柱上，静置后离心，RNA结合到吸附柱上；用试剂盒溶液洗涤；再进行洗脱即得到钙化组织总RNA。得到的钙化组织总RNA的收率高，纯度高、质量、完整性好。

公开(公告)号：CN103203117A

公开(公告)日：2013-07-17

申请号：CN201310098964.X

申请日：2013-03-26

Applicant: 国家海洋局第三海洋研究所

Inventor： 夏金梅 ,  许晨 ,  许建中 ,  刘芬 ,  王倩 ,  廖云莉 ,  骆祝华 ,  陈建明 ,  邵宗泽

IPC: B01D11/00

Abstract: 本发明公开了一种加压溶剂萃取微生物发酵培养物中物质的方法，依次包括如下步骤：（1）将固体发酵培养物或已将培养基与菌体分离后的液体发酵培养的菌体或已吸附发酵液中物质的载体直接装入萃取釜中；（2）在0.2~15MPa压力和30~200℃温度下，使用单一或混合溶剂对步骤（1）中已装入萃取釜中的微生物发酵培养物进行1次或多次萃取；（3）萃取得到的萃取液进行减压浓缩，冷凝得到的溶剂循环使用；减压浓缩得到的浸膏即为发酵培养物中物质。与现有的溶剂浸提法相比，本发明溶剂消耗量可低至20%，萃取时间可缩短至1/3，同时萃取率可提高40%，并可有效防止培养物中物质氧化变性。