羊贾第虫与隐孢子虫双重PCR检测试剂盒及其方法

    公开(公告)号:CN108796105A

    公开(公告)日:2018-11-13

    申请号:CN201810693079.9

    申请日:2018-06-29

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明公开一种羊贾第虫与隐孢子虫双重PCR检测试剂盒及其方法,根据十二指肠贾第虫TPI基因、微小隐孢子虫18S rRNA基因部分保守序列设计引物,建立双重PCR检测方法,并且通过优化PCR反应的退火温度等反应条件来提高其灵敏性和准确性,扩增产物经1.0%琼脂糖凝胶电泳后观察结果方便、快捷。不同目的片段的区分是双重PCR检测方法建立的关键之一,本发明扩增的两种目的片段在琼脂糖凝胶电泳中大小差异显著,易于区分,且敏感性可达到5×102/g粪便,高于两种寄生虫已报导的镜检法与常规PCR检测方法,适合于临床实践中样本的检测。本发明检测方法可以同时快速检测羊的十二指肠贾第虫与微小隐孢子虫,具有操作简单、灵敏度高、特异性强等特点。同时为实验用实羊的质量标准提供技术支持。

    犬恶丝虫ELISA检测试剂盒及制备方法

    公开(公告)号:CN102798716B

    公开(公告)日:2014-10-29

    申请号:CN201110419523.6

    申请日:2011-12-15

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明提供了用于犬的犬恶丝虫ELISA检测试剂盒及制备方法,利用从犬恶丝虫成虫cDNA表达文库中筛选出的与编码马来丝虫肌球蛋白尾家族蛋白的同源基因命名为MTFP(同源性88%),在大肠杆菌E.coliBL21(DE3)表达的MTFP蛋白作为抗原,建立了检测犬的犬恶丝虫感染的间接ELISA方法。该检测特异性高、灵敏度高、准确性高、稳定性好。具有操作简单、检测快速,易于判断等优点,适合于临床的快速诊断和基层、农村等流行病学调查大规模应用。

    鸡球虫ADF重组卡介苗及制备方法

    公开(公告)号:CN102552893A

    公开(公告)日:2012-07-11

    申请号:CN201110439688.X

    申请日:2011-12-26

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明提供了一种鸡球虫ADF重组卡介苗,同时还提供了该疫苗的制备方法,获得鸡柔嫩艾美耳球虫卵囊,提取RNA,反转录成cDNA,根据已克隆的柔嫩艾美耳球虫ADF基因序列的开放阅读框设计引物进行PCR,与PMD-18T载体连接进行克隆,测序鉴定正确后,酶切回收目的片段,再分别与用同种酶进行酶切反应的大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达载体PMV261和整合表达载体PMV361相连,连接正确的重组质粒转化到BCG中,经抗性筛选和PCR鉴定,获得阳性鸡柔嫩艾美耳球虫重组卡介苗。该活载体疫苗稳定性好,运输和保存较为容易,易于生产,产品不需纯化,可直接用于免疫保护试验.免去了蛋白质后处理的复杂工序,从而大大降低了成本,适宜于广大农村。

    一种新的犬新孢子虫速殖子的体外培养和染色方法

    公开(公告)号:CN102533556A

    公开(公告)日:2012-07-04

    申请号:CN201010593980.2

    申请日:2010-12-17

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明涉及了一种新的犬新孢子虫速殖子的体外培养和染色方法,其特征在于培养的具体步骤为:首先常规培养MCF-7乳腺癌细胞,当其长成细胞单层后,按104/ml接种1ml犬新孢子虫;之后用含2%胎牛血清的RPIM-1640培养基进行培养,每天利用倒置显微镜观察胞外新孢子虫速殖子的数目;染色的具体步骤为:新孢子虫速殖子经多聚甲醛固定,吖啶橙染色后经普通荧光显微镜照相观察;该培养方法简单实用,可快速培养新孢子虫速殖子,并且经吖啶橙染色后利用普通荧光显微镜即可快速、直观、清晰的观察到胞内寄生虫。

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