公开(公告)号：CN105838692A

公开(公告)日：2016-08-10

申请号：CN201610300086.9

申请日：2016-05-06

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 赵林果 ,  李琦 ,  裴建军 ,  吴涛 ,  翟华敏 ,  曹云峰

IPC: C12N9/24 ,  C12N15/56

CPC classification number: C12N9/2482 ,  C12Y302/01008

Abstract: 来源于黑曲霉NL?1木聚糖酶的多位点突变体及其应用，所述多位点突变体含有如下8个突变位点中的至少6个，其中N28突变为H，N29突变为D，Y45突变为M，N47突变为L，S58突变为H，D76突变为R，G116突变为C，Y135突变为C。突变体使得黑曲霉NL?1木聚糖酶的耐热耐碱性能得到显著提升。

公开(公告)号：CN117187216B

公开(公告)日：2025-04-08

申请号：CN202311263540.4

申请日：2023-09-27

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 赵林果 ,  李琦 ,  张珊珊 ,  张洋洋 ,  王振中 ,  王小宇 ,  刘栋

IPC: C12N9/24 ,  C12N15/56 ,  C12P19/60

Abstract: 本发明公开了一种耐热α‑L‑鼠李糖苷酶及其耐糖突变体和应用，属于基因工程及酶工程技术领域。本发明从Dictyoglomus thermophilum DSM 3960基因组中克隆得到一种耐热α‑L‑鼠李糖苷酶基因，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，与现有技术相比，本发明所提供的α‑L‑鼠李糖苷酶DthRha具有优良的耐热性能，对耐热的α‑L‑鼠李糖苷酶DthRha进行耐糖关键位点突变，获得的新型α‑L‑鼠李糖苷酶DthRha耐糖突变体，其耐糖系数提高了2.3倍以上，该突变体能够特异性水解淫羊藿苷的R2位上通过α‑1糖苷键连接的鼠李糖，能够利用突变体高效转化淫羊藿苷生成淫羊藿次苷I。

公开(公告)号：CN111117988B

公开(公告)日：2022-10-14

申请号：CN202010059242.3

申请日：2020-01-18

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 赵林果 ,  李琦 ,  李冬冬 ,  童欣怡 ,  蒋玉洁

IPC: C12N9/42 ,  C12N15/56 ,  C12P33/20

Abstract: 嗜热木糖苷酶的氨基酸突变体及其应用。本发明突变了来源于嗜热网球菌（Dictyoglomus thermophilum）DSM 3960 GH 39家族的β‑木糖苷酶，并利用β‑木糖苷酶多位点突变体特异性水解三七皂苷R1生成人参皂苷Rg1。所述多位点突变体含有2个突变位点，其中HIS284分别突变为ASP和ALA，突变体使得该β‑木糖苷酶耐糖率分别提高了1.35和1.09倍，其Ki系数分别达到了4.6 mol/L和3.7 mol/L；CYS202突变为LEU和PHE，其酶活分别提高了3.28和2.97倍。

公开(公告)号：CN105838692B

公开(公告)日：2019-05-07

申请号：CN201610300086.9

申请日：2016-05-06

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 赵林果 ,  李琦 ,  裴建军 ,  吴涛 ,  翟华敏 ,  曹云峰

IPC: C12N9/24 ,  C12N15/56

Abstract: 来源于黑曲霉NL‑1木聚糖酶的多位点突变体及其应用，所述多位点突变体含有如下8个突变位点中的至少6个，其中N28突变为H，N29突变为D，Y45突变为M，N47突变为L，S58突变为H，D76突变为R，G116突变为C，Y135突变为C。突变体使得黑曲霉NL‑1木聚糖酶的耐热耐碱性能得到显著提升。

公开(公告)号：CN107354143A

公开(公告)日：2017-11-17

申请号：CN201710689763.5

申请日：2017-08-11

Applicant: 南京林业大学 ,  江苏康缘药业股份有限公司

Inventor： 赵林果 ,  石学佳 ,  萧伟 ,  王振中 ,  李琦

IPC: C12N11/08 ,  C12P19/14

CPC classification number: Y02P20/588 ,  C12N11/08 ,  C12N9/2445 ,  C12P19/14 ,  C12Y302/01021

Abstract: 一种固定化β-葡萄糖苷酶及其制备方法和应用，步骤为（1）大孔树脂预处理；（2）大孔吸附树脂NKA-9聚醚酰亚胺表面改性；（3）大孔树脂吸附β-葡萄糖苷酶；（4）戊二醛交联反应修饰。本发明首次利用金属离子Zn2+作为利用大孔吸附树脂固定化β-葡萄糖苷酶的激活剂、热稳定剂。Zn2+的参与使β-葡萄糖苷酶的催化效率提高了20%以上；使固定化酶NKA-9II的催化效率提高了92%以上。相对于起始酶活，Zn2+的参与，在85℃条件下，温育7 h，固定化酶NKA-9II的酶活还保持在80%以上；90℃条件下温育7 h，固定化酶NKA-9II的酶活还保持在54%以上。

公开(公告)号：CN105695553A

公开(公告)日：2016-06-22

申请号：CN201610219176.5

申请日：2016-04-08

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 赵林果 ,  赵东霞 ,  解静聪 ,  裴建军 ,  李琦 ,  房仙颖

IPC: C12P33/20 ,  C12P33/06 ,  C12N9/42 ,  C12N9/24 ,  C12N15/70 ,  C12N15/66

CPC classification number: C12P33/20 ,  C12N9/2402 ,  C12N9/2445 ,  C12P33/06 ,  C12Y302/01021 ,  C12Y302/01055

Abstract: 一种酶法制备稀有人参皂苷20(S)-Rg3的方法，利用来源于Thermotoga petrophila的β-葡萄糖苷酶和Thermotoga thermarum DSM 5069的阿拉伯呋喃糖苷酶，降解人参皂苷Rb1、Rb2和Rc生产20(S)-Rg3。本发明可以提高资源利用率和降低人参皂苷原料的提取成本，本发明中所述的β-葡萄糖苷酶和阿拉伯呋喃糖苷酶能在1h内几乎将人参皂苷Rb1、Rb2和Rc完全转化为20(S)-Rg3。

公开(公告)号：CN104726504A

公开(公告)日：2015-06-24

申请号：CN201510142163.8

申请日：2015-03-27

Applicant: 南京理工大学 ,  南京林业大学

Inventor： 谢慧芳 ,  赵林果 ,  李琦 ,  惠娟 ,  沈锦优

IPC: C12P7/26

CPC classification number: C12P7/26

Abstract: 本发明公开了一种5,5’-去氢二香草乙酮的漆酶催化合成方法。包括如下步骤：将香草乙酮溶解于水或pH为3.5~6.0的缓冲溶液中，配制成溶液，控制温度在20~60°C，加入重组漆酶，于摇床中反应；反应结束后静置沉淀，洗涤沉淀物，于不高于50℃下干燥，得到产品5,5’-去氢二香草乙酮。本发明的反应原料和重组漆酶本身均为天然产物，无毒，反应过程中利用空气中的氧，不需要添加其他氧化剂；本发明反应条件温和，室温下即可进行，产物单一，易于纯化，纯化步骤中不涉及酸碱等化学药剂，产品纯度高。