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公开(公告)号：CN101805770B
公开(公告)日：2012-10-31
申请号：CN201010123134.4
申请日：2010-03-12
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用全细胞生物催化生产环磷酸腺苷的方法，其特征在于以多羟基有机试剂保护酶的活性，以环磷酸腺苷前体物质和磷酸根离子为底物，以葡萄糖为能量供体，加入金属离子，利用有透性的微生物菌株，全细胞催化生产环磷酸腺苷。本发明使用金属离子的组合物调控代谢流量从而提高能量自偶联效率，加入有机试剂对菌体和酶的活性进行保护，利用有透性的微生物菌株来制备环磷酸腺苷，缩短了合成时间，并使得产物积累到胞外，从而可以节省后续分离的成本和简化操作步骤。
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公开(公告)号：CN102154165B
公开(公告)日：2012-06-27
申请号：CN201110000716.8
申请日：2011-01-05
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种高产腺苷的枯草芽孢菌，其分类命名为：枯草芽孢菌(Bacillus subtilis)A409；其遗传标记为：鸟嘌呤营养缺陷型、黄苷酸氨化酶缺失，同时还具有8-氮黄嘌呤抗性；其保藏编号为CGMCC No.4484，保藏日期为2010年12月17日。上述枯草芽孢杆菌菌株腺苷产量能够稳定在25g/L，比出发菌株的腺苷产量提高了5倍多，该菌株经过10代以上传代，生产腺苷的性能保持稳定，而且在5L发酵罐上也能够维持较高水平，具有大规模工业化的潜力。
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公开(公告)号：CN101805769B
公开(公告)日：2012-05-23
申请号：CN201010124103.0
申请日：2010-03-15
Applicant: 南京工业大学 , 南京同凯兆业生物技术有限责任公司
IPC: C12P19/30 , C12R1/01 , C12R1/185 , C12R1/265 , C12R1/645 , C12R1/72 , C12R1/84 , C12R1/865 , C12R1/78
Abstract: 本发明公开了一种生产尿嘧啶核苷酸的新方法，以乳清酸和磷酸根离子为底物，以葡萄糖为能量供体，加入小分子化学效应物质，利用有透性的微生物进行全细胞催化反应合成尿嘧啶核苷酸；当反应液中的葡萄糖浓度降低到0.02～0.08mol/L时，向反应液中流加培养液，维持反应液中的葡萄糖浓度在0.02～0.08mol/L，同时启动超滤装置将含有尿嘧啶核苷酸的反应液分离出去，并控制超滤装置的流出速率与培养液的流加速率相同以保持反应液的体积不变，收集超滤装置分离出来的液体。本发明方法准确、直接、简单，突破了反应平衡的限制，延长了反应周期，提高了尿苷酸的产量，减少了能耗，降低了生产成本，可实现产物的连续化分离生产。
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公开(公告)号：CN102268469A
公开(公告)日：2011-12-07
申请号：CN201010191523.0
申请日：2010-06-04
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明提供一种环磷酸腺苷的制备方法，该方法包括采用节杆菌为生产菌，并且在发酵培养基中添加前体物质、糖酵解途径抑制剂和/或三羧酸循环激活剂，经发酵获得环磷酸腺苷。以及前体物质、糖酵解途径抑制剂和/或三羧酸循环激活剂在采用节杆菌为生产菌经发酵制备环磷酸腺苷中的用途。本发明通过添加前体物质、糖酵解途径抑制剂和/或三羧酸循环激活剂，抑制过量的糖酵解，增强磷酸戊糖途径流量，同时加强三羧酸循环，重新合理地分配中心代谢途径的代谢流，使碳流更有效的流向目的产物-环磷酸腺苷，有效地利用碳源合成环磷酸腺苷。
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公开(公告)号：CN102212538A
公开(公告)日：2011-10-12
申请号：CN201110128741.4
申请日：2011-05-18
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明提供一种腺苷酸环化酶、其编码基因、载体、菌株及应用。本发明提供的用于编码腺苷酸环化酶的DNA序列，其具有如SEQ ID NO.：1所示的碱基序列。此外，本发明还提供了该DNA序列编码的腺苷酸环化酶，包含该DNA序列的重组载体，包含该重组载体的宿主细胞，以及它们在生产腺苷酸环化酶中的应用。本发明的大肠杆菌基因工程菌株可以高效表达腺苷酸环化酶，其诱导酶活可达到为7U/mg或10U/mg。将该菌株应用于生产环磷酸腺苷，具有工艺简单、条件温和、周期短、副产物少等优点。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101367860B
公开(公告)日：2011-01-12
申请号：CN200810156090.8
申请日：2008-09-27
Applicant: 南京工业大学
CPC classification number: Y02C10/08
Abstract: 本发明公开了一种从混合植物甾醇中分离提取β-谷甾醇的方法，将混合植物甾醇溶于有机溶剂中，经金属螯合树脂吸附，使混合物中各组分有选择性的吸附在金属螯合树脂上，金属螯合树脂再经洗脱剂洗脱下β-谷甾醇，实现混合植物甾醇中β-谷甾醇的分离，金属螯合树脂经再生处理后，重复使用。本发明所设计的金属螯合树脂吸附容量大、选择吸附特异性能强，使用本发明方法分离混合植物甾醇中β-谷甾醇，β-谷甾醇的分离纯度能达80％以上，收率能达50％以上，本发明方法简单，易于产业化，且投资成本低，并且金属螯合树脂经再生处理后重复使用率高。
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公开(公告)号：CN101792786A
公开(公告)日：2010-08-04
申请号：CN201010118203.2
申请日：2010-03-04
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12P19/30 , C12R1/01 , C12R1/185 , C12R1/265 , C12R1/645 , C12R1/72 , C12R1/78 , C12R1/84 , C12R1/85
Abstract: 本发明公开了一种定向催化合成胞苷磷酰化合物的方法，以CMP、氯化胆碱和磷酸根离子为底物，以葡萄糖作为能量供体，利用有透性的微生物细胞为酶源，通过改变反应温度为手段，促使反应体系定向生物催化合成胞苷磷酰化合物。本发明可以根据需求生产三种物质的任意之一种，反应体系简单，无毒，生产成本低廉，控制手段简单易行，极大方便了工业化中的生产控制。以CMP做底物时CDP、CTP和CDP-胆碱的得率分别可达到80％、91.8％、93.3％。
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公开(公告)号：CN101613672A
公开(公告)日：2009-12-30
申请号：CN200910183017.4
申请日：2009-08-04
Applicant: 南京工业大学 , 南京同凯兆业生物技术有限责任公司
Abstract: 本发明公开了一种不对称转化制备(S)－4－氯－3－羟基丁酸乙酯的重组大肠杆菌，它是导入羰酰还原酶基因和葡萄糖脱氢酶基因的大肠杆菌。本发明还公开了上述重组大肠杆菌的构建方法。利用上述重组大肠杆菌制备(S)－4－氯－3－羟基丁酸乙酯的方法：以4－氯乙酰乙酸乙酯为底物，以葡萄糖为辅助底物，以氧化型辅酶II为辅因子，由上述重组大肠杆菌进行转化反应得到(S)－4－氯－3－羟基丁酸乙酯。本发明构建的重组大肠杆菌中PsCR酶活为18U/mg，BmGDH酶活为9U/mg，避免了添加昂贵的纯酶GDH和辅酶NADPH，只需添加辅酶NADP便可以使得辅酶NADPH高效再生，大大降低了生产成本。
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公开(公告)号：CN101538598A
公开(公告)日：2009-09-23
申请号：CN200810019854.9
申请日：2008-03-19
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种胞二磷胆碱的制备方法，以氯化胆碱、磷酸根离子和胞苷一磷酸或其前体为底物，以葡萄糖、果糖、蔗糖或麦芽糖为能量供体，加入小分子化学效应物质，利用有透性的酵母细胞全细胞催化制备胞二磷胆碱。本发明通过建立代谢网络模型和代谢流量分析、采用小分子化学效应物质调控代谢流量从而提高能量自耦联及胆碱磷酸化效率的方法，利用有透性的酵母细胞来高效制备胞二磷胆碱，产品浓度大幅提高，底物的利用率也有提高。
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公开(公告)号：CN101229507A
公开(公告)日：2008-07-30
申请号：CN200810020212.0
申请日：2008-02-27
Applicant: 南京工业大学
IPC: B01J20/26 , B01J20/30 , C08F220/06 , C08F220/56 , C08F2/44 , C08K5/45 , C08J9/26 , C10G25/06 , C10G25/12
Abstract: 本发明公开了一种苯并噻吩类化合物分子印迹吸附树脂及其制备方法与应用。该印迹吸附树脂，它的功能单体为甲基丙烯酸或丙烯酰胺，印迹分子为苯并噻吩类化合物。是通过将功能单体、交联剂、苯并噻吩类化合物按1∶2～10∶1/8～1/2的摩尔比发生聚合反应后，再将聚合物中的苯并噻吩类化合物组分去除，形成的包含大量孔穴的吸附树脂，该孔穴能与苯并噻吩类含硫化合物产生空间结构相匹配且具有多重作用位点。本发明的苯并噻吩类化合物分子印迹吸附树脂可对油品中的苯并噻吩类化合物进行吸附脱除并加以回收，其制备方法简单易行，成本低，易于工业化生产。
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