一种可拆分的紧凑型CRISPR/Cas基因编辑系统

    公开(公告)号:CN117683805A

    公开(公告)日:2024-03-12

    申请号:CN202311681903.6

    申请日:2023-12-08

    Abstract: 本发明提供一种可以拆分的紧凑型CRISPR/Cas系统。所述系统包括依次连接的以下单元:(a)Cas12j2‑STU.v4‑N:依次设置的玉米Ubi启动子、nCas12j2的N端、内含肽的N端、连接序列(SGGS linker)、核定位信号(BpNLS);和(b)Cas12j2‑STU.v4‑C:依次设置的玉米Ubi启动子、内含肽的的C端、nCas12j2的C端、连接序列(SGGS linker)、核定位信号(BpNLS)、PolyA、Cas12j2的pre‑crRNA变体、间隔区Spacer、Cas12j2的crRNA变体、豌豆rbcS‑E9终止子(E9ter)。Cas12j2系统相比于常见的Cas9和Cas12a,体积小、结构简单且特异性较强,在细胞间递送效率上更有优势,有更广泛的适用场景。本方案在高效Cas12j2系统的基础上,选择Cas12j2蛋白上的关键氨基酸残基对Cas12j2基因编辑工具进行进一步拆分,在尽量不影响其效率的基础上缩小系统的整体体积,拓宽系统的递送方式。

    抗褐飞虱基因Bph33及其分子标记方法

    公开(公告)号:CN108456680B

    公开(公告)日:2022-04-08

    申请号:CN201810236721.0

    申请日:2018-03-21

    Abstract: 本发明公开一种抗褐飞虱基因Bph33,位于水稻第4染色体长臂上,还公开基因Bph33的分子标记方法,用分子标记P58引物或者用分子标记W82引物或者用分子标记W18引物扩增水稻品种W41123或育种材料DNA,如果用分子标记P58引物能够扩增出122bp的扩增片段,或用分子标记W82引物能够扩增出99bp的扩增片段,或用分子标记W18引物能够扩增出157bp的扩增片段,则标志着水稻品种抗褐飞虱基因Bph33的存在。本发明所述基因Bph33或其标记方法可预测水稻植株的褐飞虱抗性,加快抗褐飞虱水稻的选择进度,专用于水稻抗褐飞虱品种的选育与种质资源的利用。

    水稻抗白背飞虱基因qWBPH3.2的分子标记及其应用

    公开(公告)号:CN109593880A

    公开(公告)日:2019-04-09

    申请号:CN201910117975.5

    申请日:2019-02-15

    Abstract: 本发明涉及水稻品种抗白背飞虱基因qWBPH3.2的分子标记方法,用分子标记C3-2122引物:SEQ ID NO.1/SEQ ID NO.2或者用分子标记C3-2233引物:SEQ ID NO.3/SEQ ID NO.4或者用分子标记C3-W2引物:SEQ ID NO.5/SEQ ID NO.6或者用分子标记C3-W4引物:SEQ ID NO.7/SEQ ID NO.8扩增水稻或育种材料DNA,如果用分子标记C3-2122引物能够扩增出202bp的扩增片段,或用分子标记C3-2233引物能够扩增出229bp的扩增片段,或分子标记C3-W2引物扩增的866bp片段能够被限制性内切酶Hap Ⅱ酶切成268bp和598bp两个片段,或分子标记C3-W4引物扩增的954bp片段能够被限制性内切酶HindⅢ酶切成264bp和690bp两个片段,则标志着水稻品种抗白背飞虱qWBPH3.2基因的存在。本发明所述方法可预测水稻对白背飞虱的抗性水平,大大提高育种中抗白背飞虱品系的选择效率。

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