转人神经生长因子基因猪的制备方法

    公开(公告)号:CN111500641A

    公开(公告)日:2020-08-07

    申请号:CN202010402846.3

    申请日:2020-05-13

    Abstract: 本发明公开了一种转人神经生长因子基因猪的制备方法。该方法包括如下步骤:a、构建靶向pNGF基因外显子的CRISPR/Cas9系统表达载体;b、构建提供hNGF基因的同源重组载体;c、将CRISPR/Cas9系统表达载体与hNGF基因的同源重组载体共转染猪耳成纤维细胞;d、转染后的猪耳成纤维细胞经筛选后,获得阳性细胞系,并通过体细胞克隆获得转人神经生长因子的转基因猪。本发明通过定点基因重组的方式,将hNGF基因插入猪pNGF基因位点,从而获得的转人神经生长因子基因猪,可以表达人神经生长因子而不表达猪神经生长因子,避免了在猪唾液中收集人源NGF时,其中还混有猪源NGF的现状,也避免其在用作药物治疗时的免疫原性问题,更加安全和有效。

    胆固醇修饰在dsRNA转染精子及小鼠性别控制上的应用

    公开(公告)号:CN117603976A

    公开(公告)日:2024-02-27

    申请号:CN202311589632.1

    申请日:2023-11-27

    Abstract: 本发明公开了一种胆固醇修饰在dsRNA转染精子及经胆固醇修饰的dsRNA在小鼠性别控制上的应用。本发明通过对dsRNA的3’端添加胆固醇修饰,使其不用其他转染试剂便可进入精子内,且不造成精子活力的降低,也不造成精子的损伤,其为精子转染提供了新的思路和方法。通过对dsRNA‑DR的3’端添加胆固醇修饰,使其不用其他转染试剂便可进入精子内,进而选择性激活X精子内TLR7/8受体,抑制X精子活力,从而实现X/Y精子的分离及对后代性别的控制,这将对家畜性别控制的研究以及具体应用有着重要意义,也为哺乳动物性别控制方法提供了新的思路。

    一种血清外泌体ssc-miR-92b-3p作为母猪早期妊娠诊断分子标志物的应用

    公开(公告)号:CN110804659B

    公开(公告)日:2023-02-03

    申请号:CN201911011796.X

    申请日:2019-10-23

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种血清外泌体ssc‑miR‑92b‑3p作为母猪早期妊娠诊断分子标志物的应用。所述的血清外泌体ssc‑miR‑92b‑3p的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明确定了最早在怀孕的第9天血清中外泌体miRNA的水平变化并确定了在妊娠第9至15天期间ssc‑miR‑92b‑3p表达的水平增加,该miRNA可以作为猪早期妊娠的新的生物标记物。本发明还提供了一种检测上述分子标志物的引物和试剂盒。与现有技术相比,本发明具有早期、方便、快捷、特异和灵敏的特点,从而缩短假孕母猪的空怀期,及早采取复配,有利于生产管理,提高生产效率,为母猪早期妊娠诊断提供了新的途径。

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