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公开(公告)号:CN111500770B
公开(公告)日:2021-07-20
申请号:CN202010266277.4
申请日:2020-04-07
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于生物检测技术领域,具体涉及一种用于同时检测多种猫肠道病原体的mPCR引物组合物及其试剂盒,为建立一种猫肠道相关病原体的mPCR检测方法,本发明提供一种用于检测猫肠道病原体的mPCR引物组合物,包括FCoV‑F、FCoV‑R、FeAstV‑F、FeAstV‑R、FeKoV‑F、FeKoV‑R;并根据该mPCR引物组合物建立一种用于同时检测多种猫肠道病原体的mPCR方法,检测过程使用Taq酶,使检测更加方便,减少了加样过程中的污染机会;检测时直接加入酶、ddH2O、预混引物、模板即可启动mPCR,优于其他mPCR检测方法,从而为猫肠道病原体提供了一种高效、灵敏、特异、低成本的检测工具。
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公开(公告)号:CN109022580A
公开(公告)日:2018-12-18
申请号:CN201810858765.7
申请日:2018-07-31
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/6886 , C12N15/11
CPC classification number: C12Q1/6886 , C12Q2600/158 , C12Q2600/178
Abstract: 本发明公开了一种犬环状RNA基因,所述犬环状RNA基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。该犬环状RNA基因的检测引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2~3所示。本发明得到了一个新的犬环状RNA基因,该基因在犬乳腺肿瘤组织和癌旁组织中差异表达,在犬乳腺肿瘤组织中的表达量显著低于癌旁组织,可以作为一种犬乳腺肿瘤的诊断标志物。该犬环状RNA基因的检测引物检测效果准确,可以用于犬乳腺肿瘤的诊断检测,在犬乳腺肿瘤的防控方面具有很好的应用前景。
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公开(公告)号:CN104911150B
公开(公告)日:2018-05-01
申请号:CN201510279054.0
申请日:2015-05-27
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/569 , A61K39/42 , A61P31/16 , C12R1/91
Abstract: 本发明涉及细胞工程技术领域,公开了一种H3N2犬流感病毒的单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及其单克隆抗体的制备与应用。所述杂交瘤细胞株于2015年5月13日保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC C201555;其分泌的单克隆抗体与H3N2亚型犬流感病毒血凝素特异性结合,亲和力高,纯化后效价为1:320,000,它与CDV、CPV、CPIV、CAV‑Ⅱ、CRV及H7N9、H10N8、H9N2亚型流感病毒均不发生反应。通过注射本发明所述单克隆抗体用于预防和控制流感病毒的感染,与传统的疫苗接种手段相比,特异性更强,风险更低,安全性更高。具有实际的应用价值。
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公开(公告)号:CN104865380B
公开(公告)日:2016-09-28
申请号:CN201510273815.1
申请日:2015-05-26
Applicant: 华南农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/531
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体公开了一种检测马红球菌病的试剂盒,所述试剂盒包括作为免疫原的马红球菌致病基因VapA重组蛋白MBP‑VapA,其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示,所使用MBP‑VapA蛋白更接近马红球菌致病基因VapA的性质。用该试剂盒进行检测,灵敏度高、特异性强、重复性和稳定性都很好,具有实际的临床应用意义。
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公开(公告)号:CN104017080B
公开(公告)日:2016-09-28
申请号:CN201410263525.4
申请日:2014-06-13
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,具体公开了一种犬源单链抗体及其构建方法和应用。本发明通过设计犬抗体可变区简并引物,成功扩增出犬的重链可变区VH和轻链可变区VL基因。在此基础上利用噬菌体展示技术,成功构建犬源单链抗体scFv文库。所构建的scFv单链抗体库具有多样性和足够大的库容量。本发明通过Dot‑ELISA方法用犬DEA1.1血型抗原从scFv单链抗体库中筛选到3株能够与犬DEA1.1血型抗原相结合的单链抗体。其中Clone16具有较强的结合特性。根据Clone16基因构建了pET‑32a‑Clone16重组蛋白进行原核表达,纯化得到的抗体具有结合活性。为制备犬DEA1.1血型鉴定试剂提供了坚实的基础。
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公开(公告)号:CN105463021A
公开(公告)日:2016-04-06
申请号:CN201510988157.4
申请日:2015-12-25
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/861 , C12N15/66 , C12N15/44
CPC classification number: C12N15/861 , C07K14/005 , C12N2760/16134
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,具体公开了一种表达H3N2犬流感HA蛋白的重组犬腺病毒疫苗载体的构建方法。本发明将犬流感HA基因依次插入pMD18-T、pEGFP-C1、pVAX-E3质粒后,成功将HA基因进行修饰后,再将修饰后的HA基因片段重组到pPoly2-CAV2-△E3载体中,成功构建及病毒包装后在MDCK细胞中获得稳定遗传的pPoly2-CAV2-HA疫苗载体,扩大了犬流感疫苗的研发市场,为后期犬流感疫苗的研制及相关的基础研究提供支持。
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公开(公告)号:CN104965083A
公开(公告)日:2015-10-07
申请号:CN201510279068.2
申请日:2015-05-27
Applicant: 华南农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/577
CPC classification number: G01N33/56983 , G01N33/577 , G01N2333/11
Abstract: 本发明涉及免疫学技术领域,具体公开了一种检测H3N2亚型犬流感病毒的试剂盒,所述试剂盒包含杂交瘤细胞株H3N2-CIV-HA-2C5产生的单克隆抗体,所述杂交瘤细胞株于2015年5月13日保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO: C201555;用该试剂盒进行检测,灵敏度高,特异性强,重复性和稳定性都很好,检测临床样本,检出率为大大高于常规检测,具有实际的临床应用意义。
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公开(公告)号:CN104911150A
公开(公告)日:2015-09-16
申请号:CN201510279054.0
申请日:2015-05-27
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/569 , A61K39/42 , A61P31/16 , C12R1/91
Abstract: 本发明涉及细胞工程技术领域,公开了一种H3N2犬流感病毒的单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及其单克隆抗体的制备与应用。所述杂交瘤细胞株于2015年5月13日保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC C201555;其分泌的单克隆抗体与H3N2亚型犬流感病毒血凝素特异性结合,亲和力高,纯化后效价为1:320,000,它与CDV、CPV、CPIV、CAV-Ⅱ、CRV及H7N9、H10N8、H9N2亚型流感病毒均不发生反应。通过注射本发明所述单克隆抗体用于预防和控制流感病毒的感染,与传统的疫苗接种手段相比,特异性更强,风险更低,安全性更高。具有实际的应用价值。
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公开(公告)号:CN104865380A
公开(公告)日:2015-08-26
申请号:CN201510273815.1
申请日:2015-05-26
Applicant: 华南农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/531
CPC classification number: G01N33/56911 , G01N33/531
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体公开了一种检测马红球菌病的试剂盒,所述试剂盒包括作为免疫原的马红球菌致病基因VapA重组蛋白MBP-VapA,其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示,所使用MBP-VapA蛋白更接近马红球菌致病基因VapA的性质。用该试剂盒进行检测,灵敏度高、特异性强、重复性和稳定性都很好,具有实际的临床应用意义。
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公开(公告)号:CN104862331A
公开(公告)日:2015-08-26
申请号:CN201510273219.3
申请日:2015-05-26
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体公开了一种可溶性表达马红球菌致病基因VapA蛋白的方法,是将VapA基因克隆到PMAL-C5x载体上,构建表达载体PMAL-VapA,并将PMAL-VapA转化至原核表达菌,通过IPTG在20℃下诱导获得;以上述方法获得的重组蛋白几乎全部以可溶表达的形式存在。将该重组蛋白纯化后,浓度可达2mg/mL,该重组蛋白具有良好的免疫原性,更适于临床治疗用高免血清抗体和疫苗的制备、临床诊断试剂的开发和应用以及马红球菌致病机理的研究。
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