小麦禾谷孢囊线虫特异性SCAR标记及其快速PCR检测方法

    公开(公告)号:CN102559669B

    公开(公告)日:2013-03-27

    申请号:CN201210032018.0

    申请日:2012-02-13

    Abstract: 本发明为“小麦禾谷孢囊线虫特异性SCAR标记及其快速PCR检测方法”,属生物技术领域。小麦禾谷孢囊线虫特异性SCAR标记的DNA片段,其特征在于该DNA片段具有如SEQ ID NO 1所示的核苷酸序列。根据小麦禾谷孢囊线虫特异性SCAR标记的DNA片段设计的特异性引物HaF1和HaR1,在PCR快速检测小麦禾谷孢囊线虫的方法中,可扩增出1010bp的特异性片段。本发明提高了分子检测灵敏度并且快速准确,在小麦禾谷孢囊线虫检测和小麦孢囊线虫病的早期诊断方面,具有很高的应用价值。

    菲利普孢囊线虫特异性SCAR标记及其快速PCR检测方法

    公开(公告)号:CN102329793A

    公开(公告)日:2012-01-25

    申请号:CN201110338657.5

    申请日:2011-10-31

    Abstract: 本发明为“菲利普孢囊线虫特异性SCAR标记及其快速PCR检测方法”,属生物技术领域。菲利普孢囊线虫特异性SCAR标记的DNA片段,其特征在于该DNA片段具有如SEQ ID NO1所示的核苷酸序列。根据菲利普孢囊线虫特异性SCAR标记的DNA片段设计的引物HfF1和HfR1,在PCR快速检测菲利普孢囊线虫的方法中,可扩增出313bp的片段,同时还可以在PCR反应体系中加入通用引物TW81和AB28作为内标,能同时扩增出1000bp的片段。本发明提高了分子检测灵敏度并且快速准确,在菲利普孢囊线虫检测和菲利普孢囊线虫病的早期诊断方面,具有很高的应用价值。

    一种植物组织内植物寄生线虫的快速富集分离方法

    公开(公告)号:CN116803257A

    公开(公告)日:2023-09-26

    申请号:CN202310998375.0

    申请日:2023-08-09

    Abstract: 本发明公开了一种植物组织内植物寄生线虫的快速富集分离方法,属于生物技术领域,该方法用纤维素酶和果胶酶裂解植物组织,裂解后的植物组织研磨,并进行梯度冲洗过滤,获得不同龄期的植物寄生线虫。本发明经反复筛选和实验验证发现,采用特定的纤维素酶和果胶酶能够高效、充分裂解植物的细胞壁,利用橡皮塞轻轻磨破植物组织,从而使得寄生在植物根系内的线虫释放出来;将裂解的植物组织通过不同孔径大小的筛网,获得不同龄期的植物线虫,再通过蔗糖溶液离心,即可分离富集出不同龄期植物线虫;本发明操作简单,安全且成本低,可以迅速地从植物组织内获得大量的植物线虫,为获取不同龄期植物线虫及其研究提供了一种有效方法。

    一种快速检测菲利普孢囊线虫的RPA引物和探针、试剂盒及应用

    公开(公告)号:CN114507743B

    公开(公告)日:2022-11-25

    申请号:CN202210106161.3

    申请日:2022-01-28

    Abstract: 本发明公开了一种快速检测菲利普孢囊线虫的RPA引物和探针、试剂盒及应用,属于植物寄生线虫的检测领域。所述RPA引物如SEQIDNO:1‑2所示和探针如SEQID NO:3所示。本发明利用RPA引物和探针建立了RPA检测菲利普孢囊线虫的方法,该方法灵敏度高,特异性非常强,检测阈值为10‑3个二龄幼虫DNA,10‑4个单孢囊DNA和0.01ng基因组DNA,灵敏度是普通PCR检测的100倍;与常见的密切相关的植物寄生线虫之间没有交叉反应。RPA整个检测过程可以在1小时内完成。该检测方法特异性强、灵敏度高、结果可视化、快速、准确,在菲利普孢囊线虫病的早期诊断和田间检测预警等方面具有很高的应用价值。

    一种快速检测菲利普孢囊线虫的RPA引物和探针、试剂盒及应用

    公开(公告)号:CN114507743A

    公开(公告)日:2022-05-17

    申请号:CN202210106161.3

    申请日:2022-01-28

    Abstract: 本发明公开了一种快速检测菲利普孢囊线虫的RPA引物和探针、试剂盒及应用,属于植物寄生线虫的检测领域。所述RPA引物如SEQIDNO:1‑2所示和探针如SEQID NO:3所示。本发明利用RPA引物和探针建立了RPA检测菲利普孢囊线虫的方法,该方法灵敏度高,特异性非常强,检测阈值为10‑3个二龄幼虫DNA,10‑4个单孢囊DNA和0.01ng基因组DNA,灵敏度是普通PCR检测的100倍;与常见的密切相关的植物寄生线虫之间没有交叉反应。RPA整个检测过程可以在1小时内完成。该检测方法特异性强、灵敏度高、结果可视化、快速、准确,在菲利普孢囊线虫病的早期诊断和田间检测预警等方面具有很高的应用价值。

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