猪繁殖与呼吸综合征病毒RT-LAMP检测试剂盒及其检测方法

    公开(公告)号:CN101575650B

    公开(公告)日:2012-03-28

    申请号:CN200910087099.2

    申请日:2009-06-24

    Abstract: 本发明涉及一种猪繁殖与呼吸综合征病毒RT-LAMP检测试剂盒及其检测方法。根据GenBank公布的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRSSV)序列,设计了PRSSV RT-LAMP反应系统所需引物;采用本发明人设计并配制的病毒RNA提取试剂(LBB II-RNA)提取PRSSV病毒RNA,使用本发明建立的PRSSV RT-LAMP反应体系进行检测,反应结束后加入显色剂判定结果,结果显示在63℃45min,PRSSV病毒RNA获得了高效的特异性扩增;再利用SpuI酶切进行猪繁殖与呼吸综合征病毒美洲型经典株和NSP2变异株(高致病性蓝耳病毒株)的快速检测。相较现有技术,本发明具有检测速度快,灵敏度强并能区分检测美洲型经典毒株和NSP2变异株(高致病性蓝耳病毒株),而且反应成本低、操作便捷,适合多层次检测需求。

    猪圆环病毒2型LAMP检测试剂盒及其检测方法

    公开(公告)号:CN101586169B

    公开(公告)日:2012-02-08

    申请号:CN200910087562.3

    申请日:2009-06-30

    Abstract: 本发明涉及一种猪圆环病毒2型(PCV2)LAMP检测试剂盒及其检测方法。根据GenBank公布的PCV2基因序列,在其序列保守区域设计了PCV2 LAMP引物4条;以PCV2 HuB株、PCV2LN株病毒DNA为模板,使用本研究建立的PCV2 LAMP反应体系进行LAMP反应。利用LA-320LAMP Tubidimeter仪分析反应过程和反应结束后加入SYBRgreenI显色剂判定结果,结果显示在LA-320 LAMP Tubidimeter仪中63℃30min,PCV2DNA获得了高效的特异性扩增,加入SYBRgreenI显色判定与仪器分析显示结果一致。通过敏感性试验证明:本方法可对50ngPCV2的DNA模板进行10-7稀释后仍可高效扩增,显示出本方法高度的敏感性;通过特异性试验和临床样品的PCV2核酸的LAMP检测,结果显示本方法特异、简单、迅速,适合用于PCV2的检测工作。

    猪繁殖与呼吸综合征病毒RT-LAMP检测试剂盒及其检测方法

    公开(公告)号:CN101575650A

    公开(公告)日:2009-11-11

    申请号:CN200910087099.2

    申请日:2009-06-24

    Abstract: 本发明涉及一种猪繁殖与呼吸综合征病毒RT-LAMP检测试剂盒及其检测方法。根据GenBank公布的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRSSV)序列,设计了PRSSV RT-LAMP反应系统所需引物;采用本发明人设计并配制的病毒RNA提取试剂(LBB II-RNA)提取PRSSV病毒RNA,使用本发明建立的PRSSV RT-LAMP反应体系进行检测,反应结束后加入显色剂判定结果,结果显示在63℃ 45min,PRSSV病毒RNA获得了高效的特异性扩增;再利用SpuI酶切进行猪繁殖与呼吸综合征病毒美洲型经典株和NSP2变异株(高致病性蓝耳病毒株)的快速检测。相较现有技术,本发明具有检测速度快,灵敏度强并能区分检测美洲型经典毒株和NSP2变异株(高致病性蓝耳病毒株),而且反应成本低、操作便捷,适合多层次检测需求。

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